GB 5009.224-2016 食品安全国家标准 大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定

中华人民共和国国家标准

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GB5009.2242016

食品安全国家标准

大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定

2016-08-31发布2017-03-01实施

中华人民共和国

发布

国家卫生和计划生育委员会

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GB5009.2242016

前言

本标准代替/—《大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定》。

GBT214982008

/—,:

本标准与GBT214982008相比主要变化如下

———“”;

标准名称修改为食品安全国家标准大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定

———“”;

删除了原标准范围中胰蛋白酶抑制剂活性可以用来表示豆制品的烘烤程度

———“”;

修改了原理

———“”;

修改了试剂和材料

———“”;

删除了采样

———“”;

修改了试样制备

———“”;

删除了测定次数

———“”;

修改了结果计算

———“”;

修改了精密度

———“”;

删除了检验报告

———删除了附录B。

Ⅰ

—

GB5009.2242016

食品安全国家标准

大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定

1范围

本标准规定了大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性()的测定方法。

TIA

本标准适用于大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定。

2原理

(),,

胰蛋白酶可与苯甲酰精氨酸对硝基苯胺发生反应生成对硝基苯胺该物质在

-L--L-BAPA

。,,

410nm下有特征吸收大豆制品中的胰蛋白酶抑制剂可抑制此反应使吸光度值下降其下降程度与

。,

胰蛋白酶抑制活性成正比采用分光光度计在410nm处测定该反应前后的吸光度值可定量分析胰

蛋白酶抑制剂活性。

3试剂和材料

,,/。

除非另有说明本方法所用试剂均为分析纯水为GBT6682规定的三级水

3.1试剂

盐酸()。

3.1.1HCl

冰乙酸()。

3.1.2CHCOOH

3

氢氧化钠()。

3.1.3NaOH

氯化钙(·)。

3.1.4CaCl2HO

22

胰蛋白酶():冻藏。

3.1.5Trsin-20℃

yp

苯甲酰精氨酸对硝基苯胺()。

3.1.6-L--L-BAPA

三羟甲基氨基甲烷[(),]。

3.1.7NHCCHOHTris

223

二甲亚砜(,)。

3.1.8CHOSDMOS

26

3.2试剂配制

(/):(),,。

3.2.1盐酸溶液6molL取50mL盐酸3.1.1加入水中用水稀释至100mL混匀

(/):(),,。

3.2.2盐酸溶液1molL取83mL盐酸3.1.1加入水中用水稀释至1000mL混匀

(/):(),,。

3.2.3盐酸溶液0.1molL取8.3mL盐酸3.1.1加入水中用水稀释至1000mL混匀

(/):/,,。

3.2.4盐酸溶液0.001molL取1mL1molL盐酸溶液加入水中用水稀释至1000mL混匀

(/):(),,。

3.2.5乙酸溶液5.3molL取30mL冰乙酸3.1.2加入水中用水稀释至100mL混匀

(/):(),,

3.2.6氢氧化钠溶液0.01molL称取0.40g氢氧化钠3.1.3溶于500mL水中用水稀释

至1000mL。

:()/,/

3.2.7氯化钙盐酸溶液称取0.735g氯化钙3.1.4溶解于1L0.001molL盐酸溶液中用1molL

盐酸溶液和/盐酸溶液调节至。

0.1molLpH3.0±0.1

1

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GB5009.2242016

(/):(),

3.2.8胰蛋白酶储备液0.270mmL将胰蛋白酶3.1.5放置至室温称取胰蛋白酶27.0m于小

gg

,(),,()

烧杯中用氯化钙盐酸溶液3.2.7溶解转移至100mL容量瓶中以氯化钙盐酸溶液3.2.7定容至刻

。,。

度保存于0℃~4℃冰箱中最多可使用5d

(/):()

胰蛋白酶使用液用移液管量取胰蛋白酶储备液于容

3.2.90.0135mmL5.0mL3.2.8100mL

g

,()。

量瓶中用氯化钙盐酸溶