GB 5009.32-2016 食品安全国家标准 食品中9种抗氧化剂的测定

中华人民共和国国家标准

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GB5009.322016

食品安全国家标准

食品中种抗氧化剂的测定

9

2016-12-23发布2017-06-23实施

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

发布

国家食品药品监督管理总局

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GB5009.322016

前言

/—《()》/—《

本标准代替GBT5009.322003油脂中没食子酸丙酯PG的测定和GBT233732009食品

()、()()》。

中抗氧化剂丁基羟基茴香醚BHA二丁基羟基甲苯BHT与叔丁基对苯二酚TBHQ的测定

/—,:

本标准与GBT5009.322003相比主要变化如下

———“”;

标准名称修改为食品安全国家标准食品中种抗氧化剂的测定

9

———增加了抗氧化剂的种类;

———增加了方法的适用范围;

———、、。

增加了液相色谱法气相色谱法液相色谱串联质谱法和气相色谱质谱联用法

Ⅰ

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GB5009.322016

食品安全国家标准

食品中种抗氧化剂的测定

9

1范围

本标准规定了食品中没食子酸丙酯()、,,三羟基苯丁酮()、叔丁基对苯二酚

PG245-THBP

()、()、()、,

去甲二氢愈创木酸叔丁基对羟基茴香醚二叔丁基羟甲基苯酚

TBHQNDGABHA26--4-

()、()、,()、()

没食子酸辛酯二叔丁基对甲基苯酚没食子酸十二酯种抗氧化

Ionox-100OG26-BHTDG9

———、、、

剂的种测定方法高效液相色谱法液相色谱串联质谱法气相色谱质谱法气相色谱法以及比

5

色法。

本标准液相色谱法适用于食品中、、、、、、、、的

PGTHBPTBHQNDGABHABHTIonox-100OGDG

;、、、、;

测定液相色谱串联质谱法适用于食品中THBPPGOGNDGADG的测定气相色谱质谱法适用于

、、、;、、;

食品中BHABHTTBHQIonox-100的测定气相色谱法适用于食品中BHABHTTBHQ的测定

比色法适用于油脂中PG的测定。

第一法高效液相色谱法

2原理

,();,

油脂样品经有机溶剂溶解后使用凝胶渗透色谱GPC净化固体类食品样品用正己烷溶解用乙

,。,。

腈提取固相萃取柱净化高效液相色谱法测定外标法定量

3试剂和材料

,,/。

除非另有说明本方法所用试剂均为色谱纯水为GBT6682规定的一级水

3.1试剂

3.1.1甲酸(HCOOH)。

乙腈()。

3.1.2CHCN

3

甲醇()。

3.1.3CHOH

3

():,。

3.1.4正己烷CH分析纯重蒸

614

乙酸乙酯()。

3.1.5CHCOOCHCH

323

环己烷()。

3.1.6CH

612

():。

3.1.7氯化钠NaCl分析纯

():,,,。

3.1.8无水硫酸钠NaSO分析纯650℃灼烧4h贮存于干燥器中冷却后备用

24

3.2试剂配制

:。

3.2.1乙腈饱和的正己烷溶液正己烷中加入乙腈至饱和

:。

3.2.2正己烷饱和的乙腈溶液乙腈中加入正己烷至饱和

1

—

GB5009.322016

():。

乙酸乙酯和环己烷混合溶液取乙酸乙酯和环己烷混匀

3.2.31+150mL50mL

():。

乙腈和甲醇混合溶液取乙腈和甲醇混合

3.2.42+1100mL50mL

:。

3.2.5饱和氯化钠溶液水中加入氯化钠至饱和

():,。

甲酸溶液取甲酸移入容量瓶定容至刻度

3.2.60.1+99.90.1mL100mL

3.3标准品

:。

3.3.1叔丁基对羟基茴香醚纯度≥98%

,:。

二叔丁基对甲基苯酚纯度

3.3.226-≥98%

:。

3.3.3没食子酸辛酯纯度≥98%

:。

3.3.4没食子酸十二酯纯度≥98%

:。

3.3.5没食子酸丙酯纯度≥98%

:。

3.3.6去甲二氢愈创木酸纯度≥98%

,,:。

三羟基苯丁酮纯度

3.3.7245-≥98%

:。

3.3.8叔丁基对苯二酚纯度≥98%

,:。

二叔丁基羟甲基苯酚纯度

3.3.926--4-≥98%

:、。

注英文名字分子式和号见附录

CASA

3.4标准溶液配制

:(),

3.4.1抗氧化剂标准物质混合储备液准确称取0.1g精确至0.1mg固体抗氧化剂标准物质用乙腈

,,/,

溶于100mL棕色容量瓶中定容至刻度配制成浓度为1000mL的标准混合储备液0℃~4℃避

g

光保存。

:/

3.4.2抗氧化剂混合标准使用液移取适量体积的浓度为1000mL的抗氧化剂标准物质混合储备

g

液分别稀释至浓度为/、/、/、/、/的混合标准使用液。

20mL50mL100mL200mL400mL

ggggg

3.5材料

固相萃取柱:/。

3.5.1C2000m12mL

18g

:。

3.5.2有机系滤膜孔径0.22m

μ

4仪器和设备

:/。

4.1离心机转速≥3000rmin

4.2旋转蒸发仪。

4.3高效液相色谱仪。

4.4凝胶渗透色谱仪。

:。

4.5分析天平感量为0.01g和0.1mg

4.6涡旋振荡器。

5分析步骤

5.1试样制备

,,

固体或半固体样品粉碎混匀然后用对角线法取四分之二或六分之二或根据试样情况取有代表性

,;,,。

试样密封保存液体样品混合均匀取有代表性试样密封保存

2

—

GB5009.322016

5.2测定步骤

5.2.1提取

:()(),

固体类样品称取精确至试样于离心管中加入乙腈饱和的正

5.2.1.11g0.01g5.150mL5mL

,,。,

己烷溶液涡旋1min充分混匀浸泡10min加入5mL饱和氯化钠溶液用5mL正己烷饱和的乙腈

,/,,

溶液涡旋2min3000rmin离心5min收集乙腈层于试管中再重复使用5mL正己烷饱和的乙腈溶

,,,。。

液提取次合并次提取液加甲酸溶液调节待净化同时做空白试验

230.1%pH=4

:()(),

油类称取精确至试样于离心管中加入乙腈饱和的正己烷溶

5.2.1.21g0.01g5.150mL5mL

,,,,/

液溶解样品涡旋静置用正己烷饱和的乙腈溶液涡旋提取离

1min10min5mL2min3000rmin

,,,,

心收集乙腈层于试管中再重复使用正己烷饱和的乙腈溶液提取次合并次提取液

5min5mL23

。。

待净化同时做空白试验

5.2.2净化

,,

在固相萃取柱中装入约的无水硫酸钠用甲醇活化萃取柱再以乙腈平衡萃取

C2g5mL5mL

18

,。(),,,

柱弃去流出液将所有提取液5.2.1倾入柱中弃去流出液再以5mL乙腈和甲醇的混合溶液洗脱

,,,,

收集所有洗脱液于试管中40℃下旋转蒸发至干加2mL乙腈定容过0.22m有机系滤膜供液相色

μ

谱测定。

()

5.2.3凝胶渗透色谱法纯油类样品可选

()(),

称取样品5.110g精确至0.01g于100mL容量瓶中以乙酸乙酯和环己烷混合溶液定容至刻

,;,。

度作为母液取5mL母液于10mL容量瓶中以乙酸乙酯和环己烷混合溶液定容至刻度待净化

(),(

取10mL待测液加入凝胶渗透色谱GPC进样管中使用GPC净化凝胶渗透色谱净化条件见附

),,,,,

录B收集流出液40℃下旋转蒸发至干加2mL乙腈定容过0.22m有机系滤膜供液相色谱测

μ

。。

定同时做空白试验

5.3液相色谱仪条件

):,,,,;

a色谱柱C柱柱长250mm内径4.6mm粒径5m或等效色谱柱

18μ

):,:;

流动相甲酸水溶液流动相甲醇

bA0.5%B

):(),:(),

洗脱梯度流动相流动相从降至

c0~5minA50%5min~15minA50%20%15min~

(),:(),:

流动相流动相从降至流动

20minA20%20min~25minA20%10%25min~27min

(),:();

相从增至流动相

A10%50%27min~30minA50%

)柱温:;

d35℃

)进样量:;

e5L

μ

)检测波长:。

f280nm

5.4标准曲线的制作

,,

将系列浓度的标准工作液分别注入液相色谱仪中测定相应的抗氧化剂以标准工作液的浓度为横

,(:、、),。

坐标以响应值如峰面积峰高吸收值等为纵坐标绘制标准曲线9种抗氧化剂液相色谱图见附

录C。

5.5试样溶液的测定

,,

将试样溶液注入高效液相色谱仪中得到相应色谱峰的响应值根据标准曲线得到待测液中抗氧化

3

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GB5009.322016

剂的浓度。

6分析结果的表述

():

试样中抗氧化剂含量按式计算

1

V

…………()

X=×1

ii

ρ

m

式中:

———,(/);

X试样中抗氧化剂含量单位为毫克每千克mk

igg

———,(/);

i从标准曲线上得到的抗氧化剂溶液浓度单位为微克每毫升gmL

ρμ

———,();

V样液最终定容体积单位为毫升mL

———,()。

m称取的试样质量单位为克g

()。

结果保留三位有效数字或保留到小数点后两位

7精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

8其他

():/,,,():/,

本方法的检出限为没食子酸丙酯三羟基苯丁酮叔丁基

PG2mk245-THBP4mk

gggg

():/,():/,():

对苯二酚TBHQ10mk去甲二氢愈创木酸NDGA4mk叔丁基对羟基茴香醚BHA

gggg

/,,():/,():/,,

二叔丁基羟甲基苯酚没食子酸辛酯二

10mk26--4-Ionox-10020mkOG2mk26-

gggggg

():/,():/;/。

叔丁基对甲基苯酚BHT4mk没食子酸十二酯DG10mk定量限均为20mk

gggggg

第二法液相色谱串联质谱法

9原理

,();,

油脂样品经有机溶剂溶解后使用凝胶渗透色谱GPC净化固体类食品样品用正己烷溶解用乙

,。,。

腈提取固相萃取柱净化液相色谱串联质谱联用仪测定外标法定量

10试剂和材料

,,/。

除非另有说明本方法所用试剂均为色谱纯水为GBT6682规定的一级水

10.1试剂

同3.1

10.2试剂配制

同3.2

4

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GB5009.322016

10.3标准品

:。

10.3.1没食子酸辛酯纯度≥98%

:。

10.3.2没食子酸十二酯纯度≥98%

:。

10.3.3没食子酸丙酯纯度≥98%

:。

10.3.4去甲二氢愈创木酸纯度≥98%

,,: