GB/T 5009.118-2003 小麦中T-2毒素的酶联免疫吸附测定(ELISA)

ICS67.040

C53霭黔

中华人民共和国国家标准

GBIT5009.118-2003

代替GBIT14933-1994

小麦中T-2毒素的酶联免疫吸附测定

(ELISA)

DeterminationofT-2toxininwheatwith

enzyme-linkedimmanosorbentassay(ELISA)

2003-08-11发布2004-01-01实施

中华人民共和国卫生部*，

中国国家标准化管理委员会‘’”

GB/T5009.118-2003

月叨青

本标准代替GB/T14933-1994(小麦中T-2毒素的酶联免疫吸附测定方法(ELISA)).

本标准与GB/T14933-1994相比主要修改如下:

—修改了标准的中文名称，标准中文名称改为《小麦中T-2毒素的酶联免疫吸附测定(ELISA));

—按GB/T20001.4-2001《标准编写规则第4部分:化学分析方法》对原标准的结构进行

了修改。

本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。

本标准起草单位:卫生部食品卫生监督检验所。

本标准主要起草人:阳传和、罗雪云、计融。

原标准于1994年首次发布，本次为第一次修订。

GB/T5009.118-2003

小麦中T-2毒素的酶联免疫吸附测定

(ELISA)

范围

本标准规定了小麦中T-2毒素的酶联免疫吸附测定方法(ELISA)o

本标准适用于小麦及其制品中T-2毒索的测定。

本方法的检出限为1拼9/kg。

第一法间接法

2原理

将已知抗原吸附在固相载体表面，洗除未吸附抗原，加人一定量抗体与待测试样(含有抗原)提取液

的混合液，竞争温育后，在固相载体表面形成抗原航体复合物。洗除多余抗体成分，然后加人酶标记的

抗球蛋白的第二抗体结合物，与吸附在固体表面的抗原航体复合物相结合，再加人酶的底物。在酶的

催化作用下，底物发生降解反应，产生有色产物，通过酶标检测仪，测出酶底物的降解量，从而推知被测

试样中的抗原量。

3试荆

3。飞甲醇。

32石油醚。

3.3三抓甲烷。

34无水乙醉。

3.5乙酸乙醋。

3,6二甲基甲酞胺。

3.7四甲基联苯胺(TMB),

3.8吐温-20;.

3.930%过氧化氢(30%H2q)。

3.10抗体:杂交瘤细胞系1n7产生的抗T-2毒素的特异性单克隆抗体。

3.11抗原:T-2毒素与载体蛋白一牛血清白蛋白(BSA)的结合物。

3.12兔抗鼠免疫球蛋白与辣根过氧化酶的结合物(酶标二抗)。

3.13ELISA缓冲液系统。

3.13.1包被缓冲液为pH9.6的碳酸盐缓冲液，称取1.59g碳酸钠(Na2COs),2.93g碳酸氢钠

(NaHCOs)，加水稀释至1000mL,

3.13.2洗液为含。05%吐温-20的pH?.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS