GB 5009.273-2016 食品安全国家标准 水产品中微囊藻毒素的测定

中华人民共和国国家标准

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GB5009.2732016

食品安全国家标准

水产品中微囊藻毒素的测定

2016-12-23发布2017-06-23实施

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

发布

国家食品药品监督管理总局

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GB5009.2732016

前言

本标准代替/—《进出口淡水产品中微囊藻毒素的检测方法酶联免疫吸附法》。

SNT26782010

/—,:

本标准与SNT26782010相比主要变化如下

———“”;

标准名称修改为食品安全国家标准水产品中微囊藻毒素的测定

———增加了液相色谱串联质谱法。

-

Ⅰ

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GB5009.2732016

食品安全国家标准

水产品中微囊藻毒素的测定

1范围

()

本标准规定了水产品中微囊藻毒素环状七肽的液相色谱串联质谱和间接竞争酶联免疫吸附的

-

测定方法。

、、。

本标准适用于鱼虾河蚌等水产品中微囊藻毒素的测定

第一法液相色谱串联质谱法

-

2原理

(,),,

试样中的微囊藻毒素和经甲醇溶液提取固相萃取小柱净化液相色

MC-LRMC-RRMC-YR

,。

谱串联质谱测定外标法定量

-

3试剂和材料

,,/。

除非另有说明本方法所用试剂均为分析纯水为GBT6682规定的一级水

3.1试剂

():。

3.1.1甲醇CHO色谱纯

4

():。

3.1.2甲酸CHO色谱纯

22

():。

3.1.3甲酸铵CHON色谱纯

52

():。

3.1.4乙腈CHN色谱纯

23

:。

3.1.5氮气纯度≥99.99%

3.2试剂配制

():。

3.2.1甲醇溶液20%将20mL甲醇与80mL水混合均匀

():。

3.2.2甲醇溶液80%将80mL甲醇与20mL水混合均匀

淋洗溶液:水;甲醇溶液()。

3.2.310mL10mL20%

:。

含甲酸的甲醇溶液用甲醇将甲酸定容至

3.2.40.1%0.1mL100mL

3.3标准品

:(,,)、

微囊藻毒素标准品微囊藻毒素号微囊藻毒素

-LRMC-LRCHNOCAS101043-37-2-

49741012

(,,)、(,,

号微囊藻毒素号

YRMC-YRCHNOCAS101064-48-6-RRMC-RRCHNOCAS

5272101349751312

),。

111755-37-4纯度均≥95%

3.4标准溶液配制

(/):、、

3.4.1微囊藻毒素标准储备液10mL分别称取微囊藻毒素标准品MC-LRMC-YRMC-RR各

μg

1

—

GB5009.2732016

(,),,。

0.5mg按实际含量折算精确至0.01mg用500L甲醇溶解再用水定容至50mL标准储备液贮

μ

,,。

存于密闭棕色玻璃瓶中于储存有效期为个月

-20℃3

(/):(/),

标准中间液吸取微囊藻毒素标准储备液于容量瓶中用

3.4.210nmL10mL10L10mL

gμgμ

。,。

甲醇定容至刻度标准中间液于冷冻避光保存有效期为个月

-20℃3

:(/)

3.4.3基质匹配的混合标准系列工作液用空白基质溶液将微囊藻毒素标准中间溶液10nmL稀释

g

/、/、/、/、//。

成含量为和的混合标准系列工作液现用

0.1L0.2L0.5L1.0L2.0L5.0L

μgμgμgμgμgμg

现配。

3.5材料

:,/,。

3.5.1固相萃取小柱ODSC柱500m6mL或性能相当者

18g

有机相微孔滤膜:。

3.5.20.22m

μ

:/,。

3.5.3玻璃纤维滤纸GFF规格或性能相当者

4仪器和设备

:。

液相色谱质谱仪配有电喷雾离子源

4.1-

:。

4.2分析天平感量为0.001g和0.00001g

:/。

4.3离心机转速大于8000rmin

4.4均质器。

4.5旋转蒸发仪。

4.6涡旋振荡器。

5分析步骤

5.1试样制备

,,,,。

取样品的可食部分约500g充分均质或粉碎装入洁净容器中密封并标明标记试样置于

,。

-18℃以下避光保存一个月内须完成检测

5.2提取

(),,(),

准确称取5g精确至0.01g试样置于50mL离心管中加入10mL甲醇溶液80%充分振荡

,/,。,,

均匀8000rmin离心10min取上清液于新离心管中残渣重复提取一次合并两次提取液提取液

,。。。

定容至30mL以玻璃纤维滤纸过滤取6mL滤液加入30mL水稀释待净化

5.3净化

,//。

固相萃取小柱使用前依次用甲醇和水活化流速控制在滴滴将提取

C10mL10mL1s~2s

18

,(),,,

液全部过柱后用10mL甲醇溶液20%淋洗以10mL含有0.1%甲酸的甲醇溶液洗脱收集洗脱液

。(),,。

以氮气浓缩至近干加入1mL甲醇溶液20%充分溶解残渣用有机相微孔滤膜过滤待上机检测

5.4空白对照试验

、。

分别称取与待测样品基质相同不含所测微囊藻毒素的空白试样份于离心管中以下

1050mL

。,。

操作按和的操作处理合并份空白试样溶液用微孔滤膜过滤滤液可作为空白基质溶液

5.25.310

配制基质匹配的混合标准系列工作液。

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