GB 5009.259-2016 食品安全国家标准 食品中生物素的测定

中华人民共和国国家标准

—

GB5009.2592016

食品安全国家标准

食品中生物素的测定

2016-08-31发布2016-09-20实施

中华人民共和国

发布

国家卫生和计划生育委员会

—

GB5009.2592016

前言

本标准代替—《婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定》。

GB5413.192010

—,:

本标准与GB5413.192010相比主要变化如下

———“”;

标准名称修改为食品安全国家标准食品中生物素的测定

———修改了标准曲线管和待测液管制备的表述方式;

———修改了测定步骤表达方式;

———、、、、、、、、

增加了谷薯类肉类新鲜果蔬藻类试样蛋类豆类坚果类内脏强化生物素的食品处理

过程;

———删除了仪器和设备中通用玻璃器皿的描述。

Ⅰ

—

GB5009.2592016

食品安全国家标准

食品中生物素的测定

1范围

本标准规定了食品中生物素的测定方法。

本标准适用于食品中生物素的测定。

2原理

()。,

生物素是植物乳杆菌Lactobacilluslantarum生长所必需的营养素在生物素测定培养基中

p

,,

植物乳杆菌的生长与待测试样中生物素含量呈线性关系根据透光率与标准工作曲线进行比较即可计

算出试样中待测物质的含量。

3试剂和材料

,,/。

除非另有说明本方法所用试剂均为分析纯水为GBT6682规定的二级水

3.1试剂

无水乙醇()。

3.1.1CHO

26

氢氧化钠()。

3.1.2NaOH

盐酸()。

3.1.3HCl

3.1.4柠檬酸盐。

淀粉酶:/。

3.1.5α-≥1.5Umg

木瓜蛋白酶:/。

3.1.6≥5Umg

3.1.7硫酸(HSO)。

24

3.2试剂配制

():。

3.2.1乙醇溶液50%量取500mL无水乙醇与500mL水混匀

(/):,,。

3.2.2氢氧化钠溶液0.5molL称取20g氢氧化钠溶于1000mL水中混匀

():,,。

3.2.3氯化钠溶液0.85%称取8.5g氯化钠加水溶解并稀释至1000mL混匀

(/):,,。

3.2.4盐酸溶液1molL吸取83mL盐酸用水稀释至1000mL混匀

():,

3.2.5柠檬酸盐缓冲液pH4.5称取1.5g柠檬酸至一个100mL带磁力搅拌器的烧杯中加入约

,(/),(/),

蒸馏水至溶解再加入的调节至用将溶液

50mL12mLNaOH1molLpH4.50.1molLHCl

,。。

转入100mL容量瓶中并用蒸馏水定容该缓冲液可在2℃~8℃储存3d

:,,

蛋白酶淀粉酶液分别称取木瓜蛋白酶和淀粉酶加入水研磨至匀浆

3.2.6-200mgα-20mL

/离心。现用现配。

3000rmin5min~10min

():。

3.2.7硫酸溶液3%量取30mL硫酸加入到1000mL水混匀

1

—

GB5009.2592016

3.3标准品

()():。

生物素或标准品纯度

d-BiotinVitaminHCHNOS≥99%

101623

3.4标准溶液配制

(/):,()

3.4.1生物素标准储备液100mL精确称取100m生物素标准品用乙醇溶液50%溶解并转

μgg

,。,。

移至容量瓶中定容至刻度储存于棕色瓶中于冰箱保存个月

1000mL2℃~4℃12

(/):

3.4.2生物素标准中间液1.0mL准确吸取1.00mL生物素标准储备液置于100mL棕色容量瓶

μg

,(),。

中用乙醇溶液稀释并定容至刻度混匀后储存于瓶中冰箱保存个月

50%2℃~4℃6

(/):,

3.4.3生物素标准工作液10nmL准确吸取1.00mL生物素标准中间液置于100mL容量瓶中

g

,。。

用水稀释定容至刻度混匀临用前现配

(/):,/;

3.4.4标准曲线工作液10nmL分两个浓度高浓度溶液的浓度为0.2nmL低浓度溶液的浓度

gg

/。