GB 5009.245-2016 食品安全国家标准 食品中聚葡萄糖的测定

中华人民共和国国家标准

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GB5009.2452016

食品安全国家标准

食品中聚葡萄糖的测定

2016-08-31发布2016-09-20实施

中华人民共和国

发布

国家卫生和计划生育委员会

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GB5009.2452016

食品安全国家标准

食品中聚葡萄糖的测定

1范围

本标准规定了食品中聚葡萄糖的测定方法。

本标准适用于食品中添加的聚葡萄糖的测定。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

聚葡萄糖[()]

CHO

6105n

、(),、

由葡萄糖山梨糖醇和柠檬酸或磷酸按一定比例混合在高温下加热聚合并精制干燥而成的多

,。。

聚体平均聚合度12属于可溶性膳食纤维

3原理

、,、,

食品中聚葡萄糖经热水浸提超滤离心后滤液经酶解去除淀粉果聚糖等干扰物后再用离子色

谱脉冲安培检测器定量测定聚葡萄糖含量。

-

4试剂和材料

,,/。

除非另有说明本方法所用试剂均为分析纯水为GBT6682规定的一级水

4.1试剂

():,。

4.1.1氢氧化钠溶液50%色谱纯离子色谱专用

冰乙酸()。

4.1.2CHCOOH

3

三水合乙酸钠(·)。

4.1.3CHCOONa3HO

32

无水乙酸钠()。

4.1.4CHCOONa

3

果聚糖酶():/。

4.1.5fructanase≥2000UmL

():/();/(

淀粉葡糖苷酶可溶性淀粉对硝基酚麦

4.1.6Amlolucosidase≥3260UmL≥200UmL--

ygβ

芽糖苷,)。

p-NP-maltoside

β

异淀粉酶():/。

4.1.7Isoamlase≥1000UmL

y

4.2试剂配制

(/):,。

4.2.1乙酸溶液0.2molL准确吸取1.2mL冰乙酸用水稀释至100mL

(/):,。

4.2.2乙酸钠溶液0.2molL准确称取2.72g三水合乙酸钠用水溶解并稀释至100mL

():(/)(/)

乙酸盐缓冲液为将乙酸溶液与乙酸钠溶液混

4.2.3pH4.528mL0.2molL22mL0.2molL

1

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GB5009.2452016

,。

合用水稀释至100mL

:、、,

4.2.4混合酶液分别吸取680L果聚糖酶84L淀粉葡糖苷酶17L异淀粉酶混合加乙酸盐缓

μμμ

冲液稀释至20mL。混合酶液临用现配。

4.3流动相

(/):(),

流动相含氢氧化钠准确吸取氢氧化钠溶液用预先脱气的水

4.3.1A0.15molL15.7mL50%

,。

稀释2L惰性气体保护

(/,/):(

流动相含氢氧化钠乙酸钠准确称量无水乙酸钠或三

4.3.2B0.15molL0.50molL41g68g

),,,,。

水合乙酸钠用流动相溶解定容至混匀过膜脱气

A1L0.45m

μ

:,,,。

注配制流动相时去离子水需预先脱气0.5h定容后的流动相混匀时倒置混匀5~6次不可剧烈振摇配好的

,。

流动相沿储液瓶壁缓缓倒入脱气0.5h后惰性气体保护

4.4参考物质

[()]:,:。

聚葡萄糖CHO纯度大于90%CAS68424-04-4

6105n

:,,,

注为保证结果的准确性如能确定添加的聚葡萄糖来源应选用食品中添加的聚葡聚糖同源的参考物质并达到

FCC级。

4.5参考物质溶液的配制

(/):()

4.5.1参考物质储备液2.00mgg准确称取0.20g聚葡萄糖参考物质精确至0.0001g至已预先

()。,

称重的100mL具螺口塞的试样瓶中精确至0.001g加入约100g预热至80℃的去离子水拧紧螺

,,,,,

口塞涡旋振荡30s将试样瓶置于80℃水浴10min每隔5min振荡一次以使聚葡萄糖充分溶解取

,,()。,。

出试样瓶冷却至室温称重精确至参考物质储备液于保存有效期个月

0.001g4℃1

:、、、、、(

4.5.2参考物质中间液分别精确称量10.07.505.003.752.501.50参考物质储备液精

gggggg

)(),/、/、/、

确至0.0001g加水至20.0g精确至0.0001g得到浓度为1.000mgg0.750mgg0.500mgg

/、/、/的参考物质中间液。

0.375mgg0.250mgg0.150mgg

:,(),(

4.5.3参考物质工作液取2mL离心管称量精确至0.0001g精确称量参考物质中间液0.20g精

),,(),

确至0.0001g转移至已称重的离心管中加入酶混合液0.8mL称量精确至0.0001g振荡混合均

,,,,,/。

匀于水浴沸水浴取出冰浴于离心上清液过

50℃60min10min5min10000rmin10min

,,/、/、/、/、/、

0.22m滤膜进样分析得到浓度分别为200gg150gg100gg75.0gg50.0gg

μμμμμμ

/,。,

的参考物质工作液系列进样分析以此点参考物质工作液上机获得工作曲线其回归方

30.0μgg6

(2)。

程的决定系数R值应不小于0.995

5仪器与设备

:,。

5.1分析天平感量分别为1m0.1m

gg

:。

5.2恒温水浴箱控温精度±1℃

:/。

5.3高速离心机转速≥10000rmin

5.4涡旋振荡器。

微量可调移液器:、。

5.520L~200L200L~1000L

μμμμ

:。

5.6针筒式过滤器孔径0.22m

μ

:,,。

5.7超滤离心设备100000Da分子截留聚醚砜膜0.5mL容积

:。

5.8磁力搅拌器带搅拌子

:、。

5.9离子色谱仪配备脉冲安培检测器梯度泵

2

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GB5009.2452016

6操作步骤

6.1试样处理

:、,,。

6.1.1固体试样研磨粉碎分析前密闭保存避免水分变化

:。

6.1.2液体试样测定前需混合摇匀

6.2聚葡萄糖提取

:,,,(),

固体试样取具塞试样瓶加入粒磁力搅拌子盖上螺口塞称量精确至记

6.2.1100mL10.001g

。(,,),

为m1准确称取一定量试样约含聚葡萄糖0.05g精确至0.0001g记为m2至试样瓶中加100mL

,,,。

预热至的水磁力搅拌水浴每磁力搅拌取出试样瓶冷却至室温

80℃30s80℃10min5min30s

(),。

后称量精确至0.001g记为m3

(、):,(),。

6.2.2液体试样饮料液态奶等取100mL具塞试样瓶称量精确至0.001g记为m1准确吸取

(,,),,

一定量试样约含聚葡萄糖0.05g精确至0.0001g记为m2至试样瓶中加100mL水振荡混合均

,(),。

匀称量精确至0.001g记为m3

,/,,

6.2.3适量吸取样液至2.0mL的离心管中10000rmin离心15min取上清液过0.22m滤膜取

μ

,/。

0.45mL滤液加入1.5mL带有分子截留膜的离心管中于10000rmin超滤离心30min注意观察

,,、,

是否离心完全及离心液的澄清度如截留膜上方留有样液或离心液混浊可加大转速延长离心时间或

增加稀释倍数()。

F

6.3酶解

,(),。

取离心管称量精确至记为

6.3.12mL0.0001gm4

,(),;

6.3.2吸取0.2mL超滤离心液加入离心管中称量精确至0.0001g记为m5加入酶混合液

,(),;,,,,

0.8mL称量精确至0.0001g记为m6振荡混合均匀于50℃水浴60min沸水浴10min取出

,/。,。。

冰浴于离心上清液过滤膜进样分析上清液需在内检测

5min10000rmin10min0.2m72h

μ

6.4色谱参考条件

检测条件见附录B。

6.5分析结果的表述

():

试样中聚葡萄糖含量按式计算

1

mmmm

6-43-1100

…………()

XFc1

=×××××

ρ6

mmm10

-

542

式中:

———,