GB 5009.222-2016 食品安全国家标准 食品中桔青霉素的测定

中华人民共和国国家标准

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GB5009.2222016

食品安全国家标准

食品中桔青霉素的测定

2016-12-23发布2017-06-23实施

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

发布

国家食品药品监督管理总局

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GB5009.2222016

前言

本标准代替/—《红曲类产品中桔青霉素的测定》、/—《进出口粮

GBT5009.2222008SNT24262010

》/—《

谷中桔霉素含量检测方法液相色谱法和出口食品中桔霉素的测定方法免疫

SNT29162011

亲和柱净化高效液相色谱法》。

-

/—,:

本标准与GBT5009.2222008相比主要变化如下

———“”;

标准名称修改为食品安全国家标准食品中桔青霉素的测定

———增加了净化步骤;

———增加了适用范围。

Ⅰ

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GB5009.2222016

食品安全国家标准

食品中桔青霉素的测定

1范围

本标准规定了食品中桔青霉素的测定方法。

、、、,、、

本标准第一法适用于大米玉米辣椒红曲类产品中桔青霉素的测定第二法适用于大米大麦燕

、。

麦小麦中桔青霉素的测定

第一法免疫亲和柱净化高效液相色谱法

-

2原理

,、,,

试样中的桔青霉素用甲醇水提取提取液经过滤稀释后用免疫亲和柱净化采用液相色谱结合

-

,。

荧光检测器测定桔青霉素的含量外标法定量

3试剂和材料

,,。

除非另有说明本方法所用试剂均为分析纯水为GB6682规定的二级水

3.1试剂

():。

3.1.1甲醇CHOH色谱纯

3

():。

3.1.2乙腈CHCN色谱纯

3

():。

3.1.3磷酸HPO色谱纯

34

():。

3.1.4冰乙酸CHO色谱纯

242

氢氧化钠()。

3.1.5NaOH

吐温()。

3.1.620CHO

5811426

氯化钠()。

3.1.7NaCl

磷酸氢二钠()。

3.1.8NaHPO

24

磷酸二氢钾()。

3.1.9KHPO

24

氯化钾()。

3.1.10KCl

3.2试剂配制

(/):,。

3.2.1氢氧化钠溶液2molL称取80.0g固体氢氧化钠溶于1L水中

(/,):,/

磷酸溶液准确移取磷酸加水定容至用的

3.2.210mmolLH7.51.376mL2000mL2molL

p

氢氧化钠溶液调节至。

pH7.5

(/,):,/

磷酸溶液准确移取磷酸加水定容至用的

3.2.310mmolLH2.51.376mL2000mL2molL

p

氢氧化钠溶液调节至。

pH2.5

:、、、,,

3.2.4PBS缓冲溶液称取8.0g氯化钠1.2g磷酸氢二钠0.2g磷酸二氢钾0.2g氯化钾用水溶解

1

—

GB5009.2222016

,。

调节至用水定容至

pH7.01000mL

:。

吐温溶液准确移取吐温以缓冲溶液定容至

3.2.50.1%20-PBS1mL20PBS1000mL

:。

3.2.60.1%磷酸溶液准确移取1mL磷酸加水定容至1000mL

:/()()。

洗脱液甲醇磷酸溶液

3.2.7Ⅰ-10mmolLpH2.570+30

:()。

洗脱液甲醇磷酸溶液

3.2.8Ⅱ-0.1%70+30

3.3标准品

(,:),。

桔青霉素号纯度或经国家认证并授予标准物质证书的标

CHOCAS518-75-2≥99.0%

13145

准物质。

3.4标准溶液配制

:,

3.4.1标准储备液准确称取一定量的桔青霉素标准品以甲醇溶解并定容至10.0mL作为标准储备

,/,。

液浓度为于下保存

100mL4℃

μg

:,,

3.4.2标准中间液准确移取1.0mL桔青霉素标准储备液于10mL容量瓶中用甲醇定容浓度为

/,。

于下保存

10mL4℃

μg

:,,

3.4.3基质标准工作液根据需要取适量的标准中间液用空白样品提取液配成不同浓度的基质标准

,。

工作液现用现配

3.5材料

:,,。

3.5.1桔青霉素免疫亲和柱柱体积3mL最大柱容量20ng或等效柱

:,。

3.5.2玻璃纤维滤纸直径11cm孔径1.5m

μ

4仪器和设备

,。

4.1高效液相色谱仪配荧光检测器

:。

4.2分析天平感量0.0001g和0.01g

高速均质器:/。

4.3≥12000rmin

4.4混匀器。

5分析步骤

5.1提取

、、

5.1.1大米玉米辣椒

(),

称取经充分粉碎均质试样精确至于具塞锥形瓶中加入甲醇水

10.0g0.1g150mL50mL-

(),,,,

70+30提取液以高速均质器高速均质提取2min过滤提取液移取1.0mL滤液置于另一干净的

,/(