GB/T 5009.85-2003 食品中核黄素的测定

ICS67.040

C53

中华人民共和国国家标准

GB/T5009.85-2003

代替GB/T12391-1990

食品中核黄素的测定

Determinationofriboflavininfoods

2003-08-11发布2004-01-01实施

中华人民共和国卫生部

中

发布

国国家标准化管理委员会

GB/T5009.85-2003

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本标准第一法对应于AOAC45.108《食物和维生素制品中核黄素的荧光测定法》(1995年版)。

本标准与AOAC45.1.08的一致性程度为非等效

本标准代替GB/T12391-1990((食物中核黄素的测定方法》

本标准与GB/T12391-1990相比主要修改如下:

—修改了标准的中文名称，标准中文名称改为《食品中核黄素的测定》;

一一按GB/T20001.4-2001《标准编写规则第4部分:化学分析方法》对原标准的结构进行

了修改。

本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口

本标准起草单位:中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所。

本标准主要起草人:王光亚、曲宁、李晶、周瑞华、王竹。

原标准于1990年首次发布，本次为第一次修订。

GB/T5009.85-2003

食品中核黄素的测定

范围

本标准规定了食品中核黄素含量的测定方法微生物法和荧光法。

本标准适用于各类食品中核黄素的测定

本方法检出限:荧光法为。.006lg;线性范围:荧光法为。1pg-20ug

第一法荧光法

2原理

核黄素在440nm-500nm波长光照射下发生黄绿色荧光。在稀溶液中其荧光强度与核黄素的浓

度成正比。在波长525nm下测定其荧光强度。试液再加人低亚硫酸钠(Na2Sz0,)，将核黄素还原为无

荧光的物质，然后再测定试液中残余荧光杂质的荧光强度，两者之差即为食品中核黄素所产生的荧光

强度。

3试荆

3.1硅镁吸附剂:60目~100目。

3.22.5mol/L乙酸钠溶液。

3.3木瓜蛋白酶((100g/L):用2.5mol/I_乙酸钠溶液配制。使用时现配制。

3.4淀粉酶(100g/L):用2.5mol/L乙酸钠溶液配制。使用时现配制。

3.50.1mol/L盐酸

3.61mol/L氢氧化钠

3.70.1mol/I氢氧化钠。

3.8低亚硫酸钠溶液(200g/l,):此液用时现配。保存在冰水浴中，4h内有效。

3.9洗脱液:丙酮+冰乙酸+水((5+2+9),

3.10澳甲酚绿指示剂((0.4g/L)e

3.11高锰酸钾溶液(30g/L)o

3.12过氧化氢溶液((30a),

3.13核黄素标准液的配制(纯度98%)

3.13.1核黄素标准储备液((25pg/ml,):将标准品核黄素粉状结晶置于真空干燥器或盛有硫酸的干燥

器中。经过24h后，准确称取50mg，置于21容量瓶中，加人2.4mL冰乙酸和1.51水。将容量瓶置

于温水中摇动，待其溶解，冷至室温，稀释至ZL，移至棕色瓶内，加少许甲苯盖于溶液表面，于冰箱中

保存。

3.13.2核黄素标准使用液:吸取2.00mL核黄素标准储备液，置于50m工棕色容量瓶中，用水稀释至

刻度。避光，贮于4℃冰箱，可保存一周。此溶液每毫升相当于1.00ow核黄素n

4仪器

实验室常用设备

4.2高压消毒锅

4.3电热恒温培养箱

GB/T5009.85-2003

4.4核黄素吸附柱:见图1,

霎

图1核黄素吸附柱

4.5荧光分光光度计

5分析步骤

整个操作过程需避光进行。

5.1试样提取

5.1.1试样的水解

准确称取2g-10g样品(约含10pg-v200pg核黄素)于100ML三角瓶中，加50mL0.1mol/L

盐酸，搅拌直到颗粒物分散均匀。用40mL瓷柑祸为盖扣住瓶口，置于高压锅内高压水解，10.3X

100Pa30min。水解液冷却后，滴加1mol/L氢氧化钠，取少许水解液，用。.4创L澳甲酚绿检验呈草

绿色，pH为4.5,

5.1.2试样的酶解

5.