GB 5413.19-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定

中华人民共和国国家标准

GB5413.19—2010

食品安全国家标准

婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定

Nationalfoodsafetystandard

Determinationoffreebiotininfoodsforinfantsandyoungchildren,

milkandmilkproducts

2010-03-26发布2010-06-01实施

中华人民共和国卫生部发布

GB5413.19—2010

前言

本标准代替GB/T5413.19-1997《婴幼儿配方食品和乳粉游离生物素的测定》。

本标准附录A为规范性附录。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为：

——GB5413-1985、GB/T5413.19-1997。

I

GB5413.19—2010

食品安全国家标准

婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定

1范围

本标准规定了婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定方法。

本标准适用于婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定。

2规范性引用文件

本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本

适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。

3原理

利用植物乳杆菌（Lactobacillusplantarum）对游离生物素的特异性和灵敏性，定量测定出试样中待

测物质的含量。在含有除待测物质以外所有营养成分的培养基中，微生物的生长与待测物质含量呈线性

关系，根据透光率与标准工作曲线进行比较，即可计算出试样中待测物质的含量。

4试剂和材料

除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。

4.1菌株：植物乳杆菌（Lactobacillusplantarum），ATCC8014。

4.2生物素（d-Biotin或VitaminH）标准品（CHNOS）：纯度≥99%。

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4.3培养基

4.3.1乳酸杆菌琼脂培养基：见附录A。

4.3.2乳酸杆菌肉汤培养基：见附录A。

4.3.3生物素测定用培养基：见附录A。

注：一些商品化合成培养基效果良好，商品化合成培养基按标签说明进行配制。

4.4乙醇溶液（50%）。

4.5硫酸溶液（3%）：量取3mL硫酸加入到水中，定容至100mL。

4.6氢氧化钠溶液（0.5mol/L）：称取20g氢氧化钠溶于1000mL水中。

4.7氯化钠溶液（9g/L）：称取9.0g氯化钠溶解于1000mL水中，分装试管，每管10mL。121℃灭

菌15min。

4.8标准溶液的制备

4.8.1生物素标准贮备液（100μg/mL）：称取生物素标准品（4.2）用乙醇溶液（4.4）定容至生物素

浓度为100μg/mL，贮于冰箱中。

4.8.2生物素标准中间液（1μg/mL）：吸取1mL生物素标准贮备液（4.8.1），用乙醇溶液（4.4）定

容至100mL。

4.8.3生物素标准工作液（10ng/mL）：吸取1mL生物素标准中间液（4.8.2），用乙醇溶液（4.4）

定容至100mL。

4.8.4标准曲线工作液

1

GB5413.19—2010

分两个浓度，高浓度溶液的浓度为0.2ng/mL；低浓度溶液的浓度为0.1ng/mL。从工作液中（4.8.3）

吸取两次各5mL，用水分别定容到250mL