GB 5413.25-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中肌醇的测定

中华人民共和国国家标准

GB5413.25—2010

食品安全国家标准

婴幼儿食品和乳品中肌醇的测定

Nationalfoodsafetystandard

Determinationofinositolinfoodsforinfantsandyoungchildren,

milkandmilkproducts

2010-03-26发布2010-06-01实施

中华人民共和国卫生部发布

GB5413.25—2010

前言

本标准代替GB/T5413.25-1997《婴幼儿配方食品和乳粉肌醇的测定》。

本标准与GB/T5413.25-1997相比，第一法主要变化如下：

——对菌种保藏培养基进行了纠正；

——试样处理由盐酸蒸馏法改为盐酸高压水解法；

——菌种接种方式由菌液与培养基混合后分装试管改为菌液向试管中滴加法；

——对标准工作溶液的浓度做了调整；

——灭菌温度由100℃调整为121℃；

——明确了控制接种菌悬液浓度的要求和方法；

——提高了计算公式的适用性；

——增加了检出限。

第二法主要变化如下：

——采用肌醇硅烷化衍生法；

——增加了检出限。

本标准的附录A和附录Ｂ为资料性附录。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为：

——GB5413-1985、GB/T5413.25-1997。

I

GB5413.25—2010

食品安全国家标准

婴幼儿食品和乳品中肌醇的测定

1范围

本标准规定了婴幼儿食品和乳品中肌醇的测定方法。

本标准适用于婴幼儿食品和乳品中肌醇的测定。

2规范性引用文件

本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版

本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。

第一法微生物法

3原理

利用葡萄汁酵母菌（Saccharomycesuvarum）对肌醇的特异性和灵敏性，定量测定出试样中待测

物质的含量。在含有除待测物质以外所有营养成分的培养基中，微生物的生长与待测物质含量呈线性

关系，根据透光率与标准工作曲线进行比较，即可计算出试样中待测物质的含量。

4试剂和材料

除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。

4.1菌株：葡萄汁酵母菌（Saccharomycesuvarum），ATCC9080。

4.2肌醇（myo-Inositol）标准品：分子式CHO，纯度≥99%。

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4.3氯化钠（NaCl）。

4.4氢氧化钠（NaOH）。

4.5培养基

4.5.1麦芽浸粉琼脂培养基（MaltExtractAgar）：参见附录A。

4.5.2肌醇测定培养基：参见附录A。

4.6氯化钠溶液（9g/L）：称取9.0g氯化钠溶解于1000mL水中，分装试管，每管10mL。121℃

灭菌15min。

4.7盐酸（1mol/L）：量取82.0mL盐酸溶于水中，冷却后定容至1000mL。

4.8盐酸（0.44mol/L）：量取36.6mL盐酸溶于水中，冷却后定容至1000mL。

4.9氢氧化钠溶液（600g/L）：称取300g氢氧化钠溶解于水中，冷却后定容至500mL。

4.10氢氧化钠溶液（1mol/L）：称取40g氢氧化钠溶解于水中，冷却后定容至1000mL。

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GB5413.25—2010

4.11肌醇标准溶液

4.11.1肌醇标准贮备液（0.2mg/mL）：肌醇标准品置于装有五氧化二磷的干燥器中干燥24h以上，

称取50mg肌醇标准品（4.2）（精确到0.1mg），用水充分溶解，定容至250mL，贮存于冰箱中。

4.11.2肌醇标准中间液（10µg/mL）：吸取5mL肌醇标准贮备液（4.11.1）用水定容到100mL，

贮存于冰箱。

4.11.3肌醇标准工作液（1µg/mL和2µg/mL）：吸取10mL肌醇标准中间液（4.11.2）两次，分别

用水定容到100mL和50mL。该工作液需每次临用前配制。

4.12干燥剂：五氧化二磷（PO）。

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4.13玻璃珠：直径约5mm。

5仪器和设备

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

5.1天平：感量为0.1mg。

5.2pH计：精度≤0.02。

5.3分光光度计。

5.4涡旋混合器。

5.5离心机：转速≥2000转/分钟。

5.6恒温培养箱：30℃±1℃。

5.7振荡培养箱：30℃±1℃，振荡速度140次/min～160次/min。

5.8冰箱：2℃～5℃。

5.9无菌吸管：10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器或吸头。

5.10瓶口分液器：0mL～10mL。

5.11锥形瓶：200mL。

5.12容量瓶（A类）：100mL，250mL，500mL。

5.13单刻度移液管（A类）：容量5mL。

5.14漏斗：直径90mm。

5.15定量滤纸：直径90mm。

5.16试管：18mm×180mm。

注：玻璃仪器使用前，用活性剂对硬玻璃测定管及其他必要的玻璃器皿进行清洗，清洗之后在200℃干热2h。

6分析步骤

6.1接种菌悬液的制备

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GB5413.25—2010

6.1.1菌种复苏

将菌株（4.1）活化后接种到麦芽浸粉琼脂斜面培养基（4.5.1）上，