GB 5413.15-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中烟酸和烟酰胺的测定

中华人民共和国国家标准

GB5413.15—2010

食品安全国家标准

婴幼儿食品和乳品中烟酸和烟酰胺的测定

Nationalfoodsafetystandard

Determinationofvitaminniacinandniacinamideinfoodsforinfantsand

youngchildren,milkandmilkproducts

2010-03-26发布2010-06-01实施

中华人民共和国卫生部发布

GB5413.15—2010

前言

本标准第二法等同采用国际分析家学会（AOAC）944.13NiacinandNiacinamide(NicotinicAcidand

Nicotinamide)inVitaminPreparations。

本标准代替GB/T5413.15-1997《婴幼儿配方食品和乳粉烟酸和烟酰胺的测定》。

本标准第二法与GB/T5413.15-1997相比，主要变化如下：

——增加了光密度法测定；

——增加了淀粉类试样的测定；

——增加标准曲线绘制的文字描述。

本标准附录A为资料性附录。

本标准代替标准的历次版本发布情况为：

——GB5413-1985、GB/T5413.15-1997。

I

GB5413.15—2010

食品安全国家标准

婴幼儿食品和乳品中烟酸和烟酰胺的测定

1范围

本标准规定了婴幼儿食品和乳品中烟酸和烟酰胺的测定方法。

本标准适用于婴幼儿食品和乳品中烟酸和烟酰胺的测定。

2规范性引用性文件

本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本

适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。

第一法高效液相色谱法

3原理

试样经热水提取、酸性沉淀蛋白质后，以C18色谱柱分离，用紫外检测器定量。

4试剂和材料

除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1淀粉酶：酶活力≥1.5U/mg。

4.2盐酸。

4.3氢氧化钠。

4.4盐酸(2.4mol/L)：准确移取10mL盐酸（4.2）于50mL容量瓶中，用水定容。

4.5氢氧化钠溶液（2.5mol/L）：称取5.0g氢氧化钠（4.3）于50mL容量瓶中，用水定容。

4.6高氯酸（HClO4）：体积分数为60%。

4.7甲醇（CH4O）：色谱纯。

4.8异丙醇(CHO)：色谱纯。

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4.9庚烷磺酸钠(CHNaOS)：优级纯。

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4.10标准溶液

4.10.1烟酸及烟酰胺标准储备液（1.0mg/mL）：称取烟酸及烟酰胺标准品各0.1g（精确到0.0001g），

分别置于100mL容量瓶中，用水溶解定容。

4.10.2烟酸及烟酰胺混合标准中间液（40µg/mL）：分别准确吸取烟酸及烟酰胺标准储备液（4.10.1）

2mL至50mL定量瓶中，用水定容。临用前配制。

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GB5413.15—2010

4.10.3烟酸及烟酰胺混合标准系列测定液：分别准确吸取烟酸及烟酰胺混合标准中间液（4.10.2）0.0

mL、1.0mL、2.0mL、5.0mL、10.0mL，至50mL容量瓶中用水定容。该标准系列浓度分别为0.00µg/mL、

0.80µg/mL、1.60µg/mL、4.00µg/mL、8.00µg/mL。临用前配制。

5仪器和设备

5.1高效液相色谱仪，带紫外检测器。

5.2pH计：精度为0.01。

5.3超声波振荡器。

5.4天平：感量为0.1mg。

5.5培养箱：30℃～80℃。

6分析步骤

6.1试样的预处理

6.1.1含淀粉的试样：称取混合均匀固体试样约5.0g（精确到0.0001g）加入约25mL45℃～50℃

的水，或称取混合均匀液体试样约20.0g（精确到0.0001g）于150mL锥形瓶中，再加入约0.5g淀粉

酶（4.1），摇匀后向锥形瓶中充氮，盖上瓶塞，置于50℃～60℃的培养箱内培养约30min，取出冷

却至室温。

6.1.2不含淀粉的试样：称取混合均匀固体试样约5.0g（精确到0.0001g）加入约25mL45℃～50℃

的水，或称取混合均匀液体试样约20.0g（精确到0.0001g）于150mL锥形瓶中，振摇，静置5min～

10min，充分溶解，并冷却至室温。

6.1.3提取：将上述锥形瓶置于超声波振荡器中振荡约10min。

6.1.4沉淀及定容：待试样溶液降至室温后，用盐酸（4.4）调节试样溶液的pH值至1.7±0.1，放置约

2min后，再用氢氧化钠溶液（4.5）调节试样溶液的pH值至4.5±0.1。将试样溶液转至50mL容量瓶

中，用水反复冲洗锥形瓶，洗液合并于50mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀后经滤纸过滤，滤液

再经0.45μm微孔滤膜加压过滤，用试管收集，即为试样待测液。

6.2参考色谱条件

色谱柱：C18柱（粒径5μm，150mm×4.6mm）或具有同等性能的色谱柱。

流动相：甲醇（4.7）70mL，异丙醇（4.8）20mL，庚烷磺酸钠（4.9）1g，用910mL水溶解并混

匀后，用高氯酸（4.6）调pH至2.1±0.1，经0.45μm膜过滤。

流速：1.0mL/min。

检测波长：261nm。

柱温：25℃。

进样量：10μL。

6.3定量分析

6.3.1标准曲线绘制

将烟酸及烟酰胺混合标准系列测定液（4.10.3）依次进行色谱测定（其标准样品色谱图参见附录A

中图A.1.1）。记录各组分的色谱峰面积或峰高，以峰面积或峰高为纵坐标，以标准测定液的浓度为横

坐标，绘制标准曲线。

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