GB 5413.14-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定

中华人民共和国国家标准

GB5413.14—2010

食品安全国家标准

婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定

Nationalfoodsafetystandard

DeterminationofvitaminB12infoodsforinfantsandyoungchildren,

milkandmilkproducts

2010-03-26发布2010-06-01实施

中华人民共和国卫生部发布

GB5413.14—2010

前言

本标准代替GB/T5413.14-1997《婴幼儿食品和乳粉维生素B12的测定》。

本标准与GB/T5413.14-1997相比，主要变化如下：

——标准名称改为《婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定》。

本标准附录A为规范性附录。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为：

——GB5413-1985、GB/T5413.14-1997。

I

GB5413.14—2010

食品安全国家标准

婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定

1范围

本标准规定了婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定方法。

本标准适用于婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定。

2规范性引用文件

本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本

适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。

3原理

利用莱士曼氏乳酸杆菌（Lactobacillusleichmannii）对维生素B12的特异性和灵敏性，定量测定出

试样中维生素B12的含量。在测定用培养基中供给除维生素B12以外的所有营养成分，这样微生物生长

产生的透光率就会同标准曲线工作液及未知待测溶液中维生素B12的含量相对应。以不同浓度标准溶液

的透光率相对于各浓度水平标准物质的浓度绘制标准曲线，根据标准曲线即可计算出试样中维生素B12

的含量。

4试剂和材料

除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。

4.1菌株：莱士曼氏乳酸杆菌（Lactobacillusleichmannii）ATCC7830。

4.2维生素B12（VitaminB12或Cyanocobalamin）标准品：分子式C63H88CoN14O14P，纯度≥99%。

4.3培养基

4.3.1乳酸杆菌琼脂培养基：见附录A。

4.3.2乳酸杆菌肉汤培养基：见附录A。

4.3.3维生素B12测定用培养基：见附录A。

注：一些商品化合成培养基效果良好，商品化合成培养基按标签说明进行配制。

4.49g/L氯化钠溶液（生理盐水）

称取9.0g氯化钠溶解于1000mL水中，分装于具塞试管，每管10mL。121℃灭菌15min。

4.5乙醇溶液：体积分数为25%。

4.6无水磷酸氢二钠（NaHPO）。

24

4.7无水偏重亚硫酸钠（NaSO）。

225

4.8柠檬酸（含一个结晶水）（CHO•HO）。

6872

4.9标准溶液的制备

4.9.1维生素B12贮备液（10μg/mL）：精确称取维生素B12标准品（4.2），用乙醇溶液（4.5）定容

至维生素B12浓度为10μg/mL。

1

GB5413.14—2010

4.9.2维生素B12中间液（100ng/mL）：用乙醇溶液（4.5）将5.0mL维生素B12贮备液（4.9.1）定

容至500mL。

4.9.3维生素B12工作液（1ng/mL）：用乙醇溶液（4.5）将5.0mL