GB/T 5413.16-1997 婴幼儿配方食品和乳粉 叶酸(叶酸盐活性)的测定

GB/T5413.16—1997

前言

本标准等效采用美国公职分析化学师协会（AOAC）方法。

本系列标准从实施之日起，代替GB5413—1985。

本标准由中国轻工总会提出。

本标准由全国乳品标准化中心归口。

本标准负责起草单位：国家乳制品质量监督检验中心、浙江省轻工业研究所。

本标准参加起草单位：卫生部食品卫生监督检验所、浙江省轻工业研究所、

哈尔滨森永乳品有限公司、雀巢（中国）投资服务有限公司。

本标准主要起草人：殷晓红、王芸、杨金宝、张玉杰。

中华人民共和国国家标准

婴幼儿配方食品和乳粉

叶酸（叶酸盐活性）的测定

Milkpowderandformulafoodsforinfantandyoungchildren

-Determinationoffolicacid(folateactivity)

GB/T5413.16—1997

1范围

本标准规定了用微生物法测定叶酸（叶酸盐活性）的方法。

本标准适用于婴幼儿配方食品和乳粉中叶酸（叶酸盐活性）的测定。

2方法提要

Lactobacilluscasei）的生长情况来评价。

叶酸盐的活性通过干酪乳杆菌（

3试剂、菌种和培养基

所有试剂，如未注明规格，均指分析纯；所有实验用水，如未注明其他要求，

均指三级水。

3．1鸡胰腺：称取100mg干燥的鸡胰腺，加20mL蒸馏水，搅拌15min，离心

10min（3000r/min），取上清液用。现用现配。

3．2生理盐水：称0.9g氯化钠（分析纯）于100mL容量瓶中，稀释至刻度，

振荡溶解。分装10mL到每个培养管中，盖上盖，121℃灭菌20min，每周准备一

次。

3．3磷酸缓冲液：c(HPO)为0.05mol/L，含有抗坏血酸。溶解50mg抗坏血酸

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于100mL0.05mol/L磷酸缓冲液中，现用现配。

3．4叶酸，标准品。

3．5浓氨水。

3．6甲苯。

3．7菌种：干酪乳杆菌（Lactobacilluscasei）。

国家技术监督局国家技术监督局1997—05—281997—05—28批准批准1998—09—011998—09—01实施实施

GB/T5413.16—1997

3．8培养基。

3．8．1乳酸杆菌琼脂培养基：胨化乳15g，酵母浸膏5g，葡萄糖10g，番茄

汁100mL，磷酸二氢钾2g，聚山梨糖单油酸酯1g，琼脂10g，加蒸馏水至1000mL，

pH6.8±0.2（25℃）。

3．8．2乳酸杆菌肉汤培养基：胨化乳15g，酵母浸膏5g，葡萄糖10g，番茄

汁100mL，磷酸二氢钾2g，聚山梨糖单油酸酯1g，加蒸馏水至1000mL，pH6.8

±0.2（25℃）。

3．8．3叶酸测定用培养基：酪蛋白胨10g，葡萄糖40g，乙酸钠40g，磷酸氢

二钾1g，磷酸二氢钾1g，DL-色氨酸0.2g，L-天门冬氨酸0.6g，L-半胱氨酸盐

酸盐0.5g，硫酸腺嘌呤10mg，盐酸鸟嘌呤10mg，尿嘧淀10mg，黄嘌呤20mg，

聚山梨糖0.1g，谷光甘肽5mg，硫酸镁0.4g，氯化钠20mg，硫酸亚铁20mg，硫

酸锰15mg，核黄素1mg，p-氨基苯甲酸2mg，维生素B44mg，盐酸硫胺素400μg，

泛酸钙800μg，烟酸800μg，生物素2