GB/T 34750-2025 格拉瑟病诊断技术

ICS11220

CCSB.41

中华人民共和国国家标准

GB/T34750—2025

代替GB/T34750—2017

格拉瑟病诊断技术

DianostictechniuesforGlässersdisease

gq’

2025-01-24发布2025-08-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T34750—2025

目次

前言

…………………………Ⅲ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

缩略语

4……………………1

临床诊断

5…………………1

样品采集处理及保存

6、……………………2

细菌分离与鉴定

7…………………………3

巢式检测

8PCR……………5

实时荧光检测

9PCR………………………7

间接

10ELISA……………8

综合判定

11…………………9

附录规范性分离培养和生化鉴定试剂的配制

A()……………………11

附录资料性副猪格拉瑟菌分离鉴定图

B()……………12

附录规范性巢式和实时荧光所用引物序列

C()PCRPCR…………13

附录资料性巢式产物电泳图及荧光扩增曲线图

D()PCRPCR……14

附录资料性副猪格拉瑟菌重组蛋白的制备及鉴定

E()P2…………15

附录资料性抗体阳性对照阳性血清阴性对照阴性血清的制备及鉴定

F()()、()…16

附录规范性间接检测溶液配制

G()ELISA…………17

Ⅰ

GB/T34750—2025

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件代替副猪嗜血杆菌检测方法与相比除结构调

GB/T34750—2017《》,GB/T34750—2017,

整和编辑性改动外主要技术变化如下

,:

更改了范围见第章年版的第章

———(1,20171);

增加了临床诊断见第章

———(5);

更改了样品采集处理及保存见第章年版的

———、(6,20176.1);

更改了细菌分离与鉴定的结果判定见年版的

———(7.8,20176.6.7);

更改了样品的制备见年版的

———DNA(8.3,20177.2);

增加了间接见第章

———ELISA(10);

增加了综合判定见第章

———(11)。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出

。

本文件由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本文件起草单位河南省动物疫病预防控制中心河南省畜产品质量监测检验中心中国动物卫生

:、、

与流行病学中心河南省农业科学院畜牧兽医研究所

、。

本文件主要起草人闫若潜班付国谢彩华吴志明苏红程果马震原王淑娟赵明军徐引弟

:、、、、、、、、、、

郭育培杨海波王翠刘影赵雪丽方先珍房大学宋丹赵美雪柴茂刘敏张利平刘礼杰李蛟

、、、、、、、、、、、、、、

赵胜杰冉晓龙

、。

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为

:

年首次发布为

———2017GB/T34750—2017。

本次为第一次修订

———。

Ⅲ

GB/T34750—2025

格拉瑟病诊断技术

1范围

本文件描述了格拉瑟病的临床诊断样品采集处理与保存细菌分离与鉴定巢式检测实时

、、、PCR、

荧光检测间接等实验室诊断方法

PCR、ELISA。

本文件适用于格拉瑟病的诊断监测

、。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件

。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

碱基对

bp:(basepair)

值循环阈值

Ct:(cyclethreshold)

脱氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

脱氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(deoxyribonucleosidetriphosphates)

酶联免疫吸附试验

ELISA:(enzymelinkedimmunosorbentassay)

免疫球蛋白

IgG:G(immunoglobulinGs)

小沟结合

MGB:(minorgroovebinder)

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸

NAD:(nicotinamideadeninedinucleotide)

磷酸盐缓冲液

PBS:(phosphatebuffersolution)

聚合酶链式反应

PCR:(polymerasechainreaction)

Taq酶Taq聚合酶Taq

:DNA(DNApolymerase)

胰蛋白胨大豆琼脂

TSA:(trypticsoyagar)

胰蛋白胨大豆肉汤

TSB:(trypticsoybroth)

5临床诊断

51流行病学

.

格拉瑟病是由副猪格拉瑟菌感染引起的细菌性传染病副猪格拉瑟菌只感染猪病猪带菌猪是本

,,、

病的主要传染源不同年龄性别和品种的猪均易感主要发生于断奶前后和保育阶段的猪本病一年

。、,。

四季均可发生尤其以早春和深秋季节多发主要通过呼吸道感染可分为急性感染和慢性感染以慢

,。,,

性感染为主

。

1