GB/T 44586.1-2024 体外诊断医疗器械 多重核酸分子检测 第1部分：核酸质量评价术语和通用要求

ICS1110010

CCSC.30.

中华人民共和国国家标准

GB/T445861—2024/ISO21474-12020

.:

体外诊断医疗器械多重核酸分子检测

第1部分核酸质量评价术语和通用要求

:

Invitrodiagnosticmedicaldevices—Multiplexmoleculartestingfor

nucleicacids—Part1Terminoloandeneralreuirementsfornucleic

:gygq

acidqualityevaluation

ISO21474-12020IDT

(:,)

2024-09-29发布2025-04-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T445861—2024/ISO21474-12020

.:

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

总体要求

4…………………6

通则

4.1…………………6

分析前的考虑因素

4.1.1……………6

标本质量的考虑因素

4.1.2…………7

核酸质量的考虑因素

4.1.3…………7

多重分子检测核酸质量与评价

4.2……………………7

多重分子检测的核酸质量评价

4.2.1………………7

核酸量的评价

4.2.2…………………8

核酸的制备程序

5…………………………8

通则

5.1…………………8

样品准备

5.2……………8

通则

5.2.1……………8

组织标本制备的考虑因素

5.2.2……………………9

核酸的提取和纯化

5.2.3……………10

质量评价方法

5.2.4…………………10

附录资料性评价完整性

A()RNA……………………12

附录资料性评价的完整性

B()DNA…………………13

附录资料性利用评价来源于样品的可扩增

C()PCRFFPEDNA…………………14

附录资料性样品

D()microRNA………………………16

参考文献

……………………17

Ⅰ

GB/T445861—2024/ISO21474-12020

.:

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件是体外诊断医疗器械多重核酸分子检测的第部分已经

GB/T44586《》1。GB/T44586

发布了以下部分

:

第部分核酸质量评价术语和通用要求

———1:。

本文件等同采用体外诊断医疗器械多重核酸分子检测第部分核酸质

ISO21474-1:2020《1:

量评价术语和通用要求

》。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由国家药品监督管理局提出

。

本文件由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会归口

(SAC/TC136)。

本文件起草单位北京市医疗器械检验研究院北京市医用生物防护装备检验研究中心中国食品

:()、

药品检定研究院浙江大学医学院附属第一医院梅里埃诊断产品上海有限公司广州达安基因股份

、、()、

有限公司厦门艾德生物医药科技股份有限公司深圳市第二人民医院南京诺唯赞生物科技股份有限

、、、

公司

。

本文件主要起草人李达刘东来韩东升马灵丽杨勇宋庆涛顾大勇聂俊伟

:、、、、、、、。

Ⅲ

GB/T445861—2024/ISO21474-12020

.:

引言

规定了体外诊断医疗器械多重核酸分子检测的相关要求拟由个部分组成

GB/T44586,3。

第部分核酸质量评价术语和通用要求通过规定质量评价术语和通用要求指导临床标本

———1:。,

中人类或微生物病原体核酸的质量控制

。

第部分确认和验证通过规定确认和验证的通用要求指导临床标本中人类或微生物病原

———2:。,

体的多重核酸分子检测过程

。

第部分解读和报告通过规定使用体外诊断医疗器械和实验室自建检测解读和报告的通

———3:。

用要求指导临床标本中人类或微生物病原体的多重核酸分子检测过程

,。

Ⅳ

GB/T445861—2024/ISO21474-12020

.:

体外诊断医疗器械多重核酸分子检测

第1部分核酸质量评价术语和通用要求

:

1范围

本文件提供了核酸作为分析物用于多重分子检测的质量评价术语和通用要求多重分子检测是指

,

可同时识别两个或更多核酸靶序列的检测手段本文件适用于所有的多重分子检测方法用于体外诊

。,

断医疗器械和实验室自建检测的检验并提供核酸靶序列定性和定量检测的信息

(IVD)(LDTs),。

本文件目的为指导多重分子试验中检测和或定性人体临床标本中人类核酸或者微生物病原体核

/

酸靶序列质量控制本文件适用于医学实验室中的各种分子体外诊断检测同时还供实验室客户体

。。、

外诊断开发者制造商生物样本库开展生物医学研究的机构和商业组织以及监管机构使用本文件

、、、,。

不适用于宏基因组学

。

注实验室内部使用的检验方法称为实验室自建方法或内部检验

:“”“LDT”,“(in-housetest)”。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

医学实验室质量和能力的要求第部分通用要求

GB/T22576.1—20181:(ISO15189:

2012,IDT)

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

和维护的用于标准化的术语数据库地址如下

ISOIEC,:

在线浏览平台

———ISO/obp;

电子百科

———IEChttp://electropedia./org。

31

.

准确度accuracy

测量结果与真值之间的一致程度

。

注术语准确度当用于一组测试或测量结果时由随机误差分量和系统误差分量即偏倚分量组成

:“”,,(ISO3534-2:

,)。

20063.3.1

来源有修改

[:ISO/IECGuide99:2007,2.13,]

32

.

算法algorithm

用于生成合理解释或报告结果的检测数据的一组规则或计算方法

。

33

.

等位基因allele

遗传学控制遗传变异的一个基因的不同形式

<>。

1

GB/T445861—2024/ISO21474-12020

.:

注一个等位基因被定义为一个能被替代的多态性序列不是基因所必需的序列占据一个确定

::1)DNA,DNA;2)

的基因位点被替代的基因形式之一

,。

34

.

等位基因比例allelicratio

特定等位基因占总等位基因数量的百分比通常用分数表示

(3.3)(3.3),。

注1例如如果一个特定的等位基因占某一基因位点总等位基因数量的那么等位基因比例为

:,(3.3)40%,0.4。

注2等位基因比例等同于等位基因频率

:。

35

.

分析物analyte

以可测量含量名称表示的组分

。

来源有修改

[:ISO17511:2020,3.1,]

36

.

化学纯度chemicalpurity

影响多重分析的化学物质的污染程度

。

注的核酸纯度是经过提取步骤去除了有干扰作用的有机物质和蛋白质组分以及核酸的污染

:PCR,。

37

.

DNA微阵列DNAmicroarray

DNA芯片DNAchip

以高密度方式直接或间接集合的探针阵列用于高通量筛选大规模生物物质的固态基质

DNA,。

来源

[:ISO16578:2013,3.3]

38

.

文件化程序documentedprocedure

执行特定的活动或者是文件制定操作和维护实验室间比对的过程

、(3.13)。

39

.

评价方法evaluationmethod

用于核酸质量评价的方法

。

310

.

失效期expirydateexpirationdate

;

在指定条件下确保贮存物质特征性能的时间范围上限

,。

注试剂校准品质控品和其他组分的有效期由制造商根据试验确定的稳定性特性指定

:IVD(3.16)、、(3.38)。

来源有修改

[:GB/T29791.1—2013,3.17,]

311

.

外部测量标准品externalmeasurementstandard

参考标准品referencestandard

为测试多重分析方法的互换性而准备的材料或物质其特征值是在某个科学或工程组织资助下的

,

协作试验工作中得到的一致值

。

注1通常针对多重分子分析

:。

注2标准物质也能作为外部测量的标准

:。

来源有修改

[:ISO16578:2013,3.9,]

312

.

预期用途intendeduse

预期目的intendedpurpose

体外诊断制造商在技术指标使用说明和体外诊断制造商提供的信息中给出的关于产品过程或服

、、

务使用的目标意图

。

来源有修改

[:GB/T29791.1—2013,3.31,]

2

GB/T445861—2024/ISO21474-12020

.:

313

.

实验室间比对interlaboratorycomparison

按照预先规定的条件由两个或多个实验室对相同或类似的项目进行测量或检测的组织实施和

,、

评价

。

来源

[:ISO/IEC17043:2010,3.4]

314

.

体外诊断设备invitrodiagnosticinstrument

IVD设备IVDinstrument

被制造商预期用作体外诊断医疗器械的设备或仪器

(3.15)。

来源有修改

[:GB/T29791.1—2013,3.26,]

315

.

体外诊断产品invitrodiagnosticproduct

体外诊断医疗器械invitrodiagnosticmedicaldevice

IVD医疗器械IVDmedicaldevice

用于诊断疾病或其他状况包括确定健康状况以治愈减轻治疗或预防疾病或其后遗症的试剂

(),、、、

仪器和系统

。

来源美国联邦食品药品和化妆品法案

[:21CFR809.3]

316

.

体外诊断试剂invitrodiagnosticreagent

IVD试剂IVDreagent

被制造商预期用作体外诊断医疗器械的化学生物学或免疫学组分溶液或制备物

(3.15)、、。

来源有修改

[:GB/T29791.1—2013,3.28,]

317

.

实验室自建检测laboratorydevelopedtestsLDTs

;

独立实验室内部设计制造和使用以临床应用为目的的体外诊断器械的形式

、,。

注也被称为内部检验

:“()in-housetest”。

来源

[:CLSIQSRLDT]

318

.

检出限limitofdetectionLOD

;

由给定的测量程序得到的测得量值对于此值在给定声称物质中存在某成分的误判概率为α

,,

时声称不存在该成分的误判概率为

,β。

注1建议α和β的默认值等于

:IUPAC0.05。

注2适用于当测试评价是否存在多种分析物而不是多变量分子检测时的

:(3.5)(3.26)LOD。

注3检出限被定义为在给定的置信度内能被可靠测序到并能区别于不存在的最低核酸量给定样

:(LOD):1),,;2)

品中检测到的最小等位基因组分

。

319

.

微阵列平台的检出限limitofdetectionformicroarrayplatformLODP

;

多重分子检测的检出限limitofdetectionformultiplexmoleculartestplatform

在置信区间范围内通过试验持续检测到的外部测量标准品或标准物质的最低相对

95%,(3.11)()

量这个外部测量标准品或标准物质具有已知测定估计的拷贝数或浓度

,(3.11)()(/)。

注1通常针对多重分子检测

:。

注2作为一个替代多重分析检出限的性能指标

:LODP(3.18)。

来源有修改

[:ISO16578:2013,3.1,]

3

GB/T445861—2024/ISO21474-12020

.:

320

.

大规模平行测序massiveparallelsequencing

通过并行处理大量分子实现高通量测序的方法

DNA。

注例如包括但不限于对数千至数百万短读长个个碱基进行测序的微型化和并行化的测序平台或

:,(≈50~400),

基于聚合酶的可实现长读长平均长度个个碱基的实时测序平台

(≈10000~15000)DNA。

321

.

微小核糖核酸microRNA

与转录后表达调控有关的个个核苷酸长度的单链

17~25RNA。

322

.

多重序列分析物multiplesequencesofanalytes

()

同时测量一个样品中的多个核酸序列的成分

。

注包括提取的核酸和基于核酸扩增试验的扩增前和或扩增后的核酸

:/。

323

.

多重分子检测multiplexmoleculartest

在单次分析中同时评价序列特征和或多个个核酸靶标数量的体外诊断检测例如基于多重

/(≥2),

多重杂交检测微阵列和基于大规模平行测序的方法

PCR(3.25)、、(3.20)。

注1多重被定义为通过统一的样品制备目标或信号扩增等位基因区分和信息采集同时实现两个或更

:“”“、、(3.3)

多目标的检测

。

注2靶标是指除了内参以外的检测目标

:。

324

.

多重分子检测质量级核酸multiplexmoleculartestqualitynucleicacid

具有适当特性例如足够的长度数量化学纯度结构完整性和含有目标核酸序列的

[、、(3.6)、(3.40)]

核酸模板确保其能通过多重分子检测进行测量

,