T/LNSI 011-2024 人羊膜上皮干细胞外泌体

ICS11.020

CCSC05

团体标准

T/LNSI011-2024

人羊膜上皮干细胞外泌体

Humanamnioticepithelialstemcellderivedexosomes

2024-08-15发布2024-08-15实施

辽宁省免疫学会发布

T/LNSI011-2024

目次

前言III

1范围1

2规范性引用文件1

3术语和定义1

4符号和缩略语2

5技术要求2

6检验方法4

7检验规则5

8使用说明6

9标签7

10包装、储存及运输7

11废弃物处理8

附录A（规范性）外泌体形态检测透射电镜观察法9

附录B（规范性）外泌体数量检测纳米流式检测法10

附录C（规范性）外泌体粒径检测纳米流式检测法12

附录D（规范性）外泌体蛋白检测蛋白印迹法14

附录E（规范性）抑制淋巴细胞增殖检测CFSE标记法16

附录F（规范性）抑制Th1功能检测胞内因子染色法17

I

T/LNSI011-2024

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化的文件结构和起草规则》的规定起

草。

本文件由沈阳艾米奥生物工程技术研发中心有限公司、沈阳市再生生物医学重点实验室提出。

本文件由辽宁省免疫学会归口。

本文件起草单位：沈阳艾米奥生物工程技术研发中心有限公司、中国医科大学干细胞与再生医学研

究室、沈阳市再生生物医学重点实验室、沈阳市干细胞与再生医学重点实验室、辽宁艾米奥干细胞与再

生医学研究院、辽宁省细胞生物学学会、辽宁省生物技术协会、沈阳市干细胞与再生医学产业技术创新

联盟、沈阳药科大学、中国医科大学附属第一医院、中国医科大学附属口腔医院、中国医科大学附属盛

京医院、艾米奥国际干细胞医院。

本文件主要起草人：庞希宁、庞然、施萍、单风平、王莉莎、赫甡、宋扬、徐东芬、荆晶、姜雯宇、

高航、谢光麟、邵锡柱、王竟、孟涛、苏航、张美玲、聂宏光、郎宏鑫、刘晓玉、王喜良、张涛、赵峰、

张殿宝、王瑞、李彩虹、李宏图、潘长伟、孔娟、王哲、王蔚、殷军、郭然、张宁、李晓航、王娇。

本标准的制订基于相关技术的综合考虑，旨在推动行业的发展和规范化。在编写过程中，团体成员

充分研究了现有技术和专利信息，并积极寻求相关权益方的支持和参与。特此声明，在编写本标准期间，

我们已经采取了合理的努力来促进并保护涉及的知识产权。

鉴于技术的不断创新和发展，如果其他相关专利或权益未在本标准中明确声明，请权益人及时联系

标准制定团体，以便进行进一步的沟通和许可。

本标准中使用的专利声明如下：

[CN201710008851]：[庞希宁]，[CN]，[一种人羊膜上皮干细胞无血清培养基及其培养方法]。

以上声明是为了更好地保护知识产权，遵循了国家相关法律法规和知识产权的规定。我们鼓励所有

使用本标准的相关方与专利权人合作，以确保公平的利益分配和技术发展。

III

T/LNSI011-2024

人羊膜上皮干细胞外泌体

1范围

本文件规定了人羊膜干上皮干细胞来源外泌体的技术要求、检验方法、检验规则、使用说明、标签、

包装、储存、运输和废弃物处理要求。

本文件适用于人羊膜上皮干细胞来源外泌体的生产和检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

WS213丙型肝炎诊断

WS273梅毒诊断

WS293-2019《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断》

T/LNSI002-2023《人羊膜上皮干细胞》

T/CSCB0007-2022《人干细胞来源细胞外囊泡制备通用要求》

T/CSCB0001-2022《人干细胞研究伦理审查技术规范》

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

中华人民共和国药典（2020年版）

全国临床检验操作规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1干细胞stemcells

1

T/LNSI011-2024

干细胞是来自于胚胎、胎儿或成人体内具有在一定条件下无限制自我更新与增殖分化能力的一类细

胞，能够产生表现型与基因型和自己完全相同的子细胞，也能产生组成机体组织、器官的已特化的细胞，

同时还能分化为祖细胞。

3.2人羊膜上皮干细胞humanamnioticepithelialstemcells

位于羊膜的胎儿面，是由胚泡内细胞团发育而来，具有部分胚胎干细胞的特征，可分化为3个胚

层不同类型的细胞。具有低免疫原性和无端粒酶活性特性。体外贴壁培养细胞呈不规则多角型，如鹅卵

石样连接成片。

3.3外泌体exosome

外泌体是细胞分泌的膜外双层脂质小囊泡，直径30~200nm，包含了蛋白质、脂质、多糖及RNA

等物质，可以转运核酸、脂质和蛋白质，参与细胞间的信息交流。

3.4人羊膜上皮干细胞外泌体humanamnioticepithelialstemcellderivedexosome

人羊膜上皮干细胞外泌体是人羊膜上皮干细胞分泌的膜外双层脂质小囊泡，粒径应小于200纳米，

呈双层膜结构的杯托状结构。

4符号和缩略语

下列符号和缩略语适用于本文件。

EBV——疱疹病毒（Epstein-BarVirus）

HBV——乙型病毒性肝炎（HepatitisBVirus）

HCMV——人巨细胞病毒（HumanCytomegalovirus）

HCV——丙型肝炎病毒（HepatitisCVirus）

HIV——人类免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus）

HTLV——人类嗜T细胞病毒（HumanT-lymphotropicVirus）

TP——梅毒螺旋体（TreponemaPallidum）

5技术要求

5.1原材料

2

T/LNSI011-2024

5.1.1应符合T/CSCB0001-2022要求。

5.1.2应建立供者细胞采集的供者评估与筛选标准、采集方法、运输标准和交接标准，保证供者和细

胞的安全。

5.1.3供体应筛查HIV、HBV、HCV、