GB/T 22983-2008 牛奶和奶粉中六种聚醚类抗生素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

ICS67.050

X04

中华人民共和国国家标准

GB/T22983—2008

牛奶和奶粉中六种聚醸类抗生素

残留量的测定

液相色谱-串联质谱法

Determinationofsixpolyetherantibioticsresidues

inmilkandmilkpowder—LC-MS-MSmethod

2008-12-31发布2009-05-01实施

发布

GB/T22983—2008

本标准附录A、附录B为资料性附录。

本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局、中华人民共和国青海出入境检验检

疫局。

本标准主要起草人：薄海波、曹彦忠、雒丽丽、贾光群、星玉秀、李连通、庞国芳。

T

GB/T22983—2008

牛奶和奶粉中六种聚醸类抗生素

残留量的测定

液相色谱■串联质谱法

1范围

本标准规定了牛奶和奶粉中六种聚瞇类抗生素残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。

本标准适用于液态奶(包括原料奶、纯牛奶、脱脂牛奶)和奶粉(包括纯奶粉、脱脂奶粉和婴幼儿配方

奶粉)中拉沙洛菌素(lasalocid)、莫能菌素(moncnsin)、尼日利亚菌素(nigcricin)、盐霉素(salinomycin)、

甲基盐霉素(narasin)、马杜霉素钱(madubamycinammonium)残留量的测定。

本标准的方法检出限：牛奶中拉沙洛菌素、莫能菌素、尼日利亚菌素、盐霉素、甲基盐霉素、马杜霉素

钱检出限均为0.2陆/L；奶粉中拉沙洛菌素漠能菌素、尼日利亚菌素、盐霉素、甲基盐霉素、马杜霉素

钱检出限均为1.6Mg/kgo

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6379.1测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第1部分：总则与定义

(GB/T6379.1—2004,ISO5725-1：1994,IDT)

GB/T6379.2测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第2部分：确定标准测量方法重复

性与再现性的基本方法(GB/T6379.2—2004,ISO5725-2：1994,IDT)

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682—2008,ISO3696：1987,MOD)

3原理

试样中聚醍类抗生素，用乙月青提取，固相萃取柱净化，高效液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。

4试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯。

4.1水：GB/T6682,—级。

4.2乙睛：色谱纯。

4.3甲醇：色谱纯。

4.4正己烷：色谱纯。

4.5乙月青饱和的正己烷：取少量乙月青(4.2)加入正己烷(4.4)中，充分混匀。静止分层后，取上层正

己烷。

4.6甲酸：优级纯。

4.7乙酸钱：优级纯。

4.8无水硫酸钠：用前在650°C灼烧4h,置于干燥器中冷却后备用。

4.9水系流动相：1mL甲酸与0.385g乙酸钱溶于1000mL水，混匀。当天配制。

4.10甲醇溶液(1+1)：100mL甲醇与100mL水混合均匀。

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GB/T22983—2008

4.11拉沙洛菌素(CAS25999-20-6)、莫能菌素(CAS22373-78-0)、尼日利亚菌素(CAS28643-80-3)、

盐霉素(CAS55721-31-8)、甲基盐霉素(CAS55134-13-9)、马杜霉素鞍(CAS84878-61-5)标准品：纯度

大于等于95%。

4.12标准储备溶液:准确称取适量的每种标准物质(4.11),分别用甲醇(4.3)配制成浓度为1mg/mL

标准储备溶液。储备液贮存在一18I冰柜中。

4.13标准工作溶液：吸取1.00inL标准储备溶液(4.12),移入100mL棕色容量瓶，用甲醇定容，该溶

液浓度为10Mg/mL,贮存在0°C〜4C冰箱中。

4.14OasisHLB固相萃取小柱或相当者：3mL,60mgo使用前依次用3mL甲醇和5mL水活化小

柱，保持柱体湿润。

4.15滤膜：0.2卩叫

5仪器和设备

5.1液相色谱-串联质谱联用仪：配有电喷雾离子源(ESI源)。

5.2分析天平：感量0.1mg和0.01go

5.3旋涡混匀器。

5.4振荡器。

5.5离心机：最大转速不低于5000r/mino

5.6移液器：1mLo

5.7自动浓缩仪或相当者。

5.8浓缩瓶：50mLo

5.9固相萃取装置。

5.10氮气吹干仪。

6试样制备与保存

6.1试样的制备

从全部样品中取出有代表性样品约1leg,充分混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内。密封后作

为试样，标明标记。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

6.2试样的保存

将试样于4°C保存。

7测定方法

7.1提取

7.1.1牛奶样品

称取10.0g混匀的试样于50mL聚丙烯离心管中，加无水硫酸钠(4.8)约10g和乙睛(4.2)

2X20mL,涡旋混匀1min,振荡10min,以3000r/min离心3mino合并上清液，加10mL乙月青饱和

的正己烷(4.5),涡旋1min,弃去正己烷，减压浓缩至近干。用4mL甲醇溶液(4.10)溶解残渣，待

净化。

7.1.2奶粉样品

称取12.5g奶粉于烧杯中，加适量35°C~50°C水将其溶解，待冷却至室温后，用水定容至

100mL,充分混匀。量取10.0g样品溶液于50mL聚丙烯离心管中，按7.1.1步骤提取。

7.2净化

将7.1所得的样品溶液加载到固相萃取柱中，并用2mL甲醇溶液(4.10)淋洗浓缩瓶，并入固相萃

取柱,依次用5mL水和3mL甲醇溶液(4.10)淋洗柱体,4mL甲醇(4.3)洗脱。用氮气吹干仪将洗脱

液吹干，用1.0mL甲醇溶解,ii0.2Mm滤膜，供液相色谱-串联质谱测定。

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GB/T22983—2008

7.3基质标准工作溶液的制备

称取6份阴性样品各10.0g,置于50mL具塞的聚丙烯管中，分别加入不同体积的六种聚瞇类抗

生素的标准工作溶液（4.13）,按6.1和6.2步骤操作。制备成浓度为1.0ng/mL.5.0ng/mL、

10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL>100.0ng/mL的基质标准工作溶液。

7.4测定条件

7.4.1液相色谱参考条件

液相色谱参考条件如下：

a）色谱柱：BEHC1S,1.7“m,50mmX2.1mm（内径）或相当者；

）柱温：40°C；

c）进样量:5.0卩L；

d）流动相：流动相A：甲醇（4.3）,流动相B：水系流动相（4.9）。洗脱程序及流速见表1。

表1流动相梯度程序及流速

时间/min流速/("/min)A/%B/%

0.0025090.010.0

2.0025070.030.0

2.012509010.0

2.5()2509010.0

7.4.2串联质谱参考条件

串联质谱参考条件如下：

a）离子源：电喷雾离子源；

）扫描方式：正离子扫描；

c）检测方式：多反应监测；

d）毛细管电压：2.8kV；

e）离子源温度：110°C；

f）去溶剂气温度：380C；

g）去溶剂气（氮气）流量：600L/h；

h）锥孔气（氮气）流量：50L/h；

i）碰撞气流量：0.1L/h；

J）锥孔电压、碰撞能量和驻留时间等质谱参数及母离子和子离子详见表20