DB31/T 600-2012 猪附红细胞体PCR检测方法

ICS11220

B42.

备案号34154—2012

:

上海市地方标准

DB31/T600—2012

猪附红细胞体PCR检测方法

MethodofdetectingEperythrozoonsuisbyPCR

2012-05-17发布2012-10-01实施

上海市质量技术监督局发布

DB31/T600—2012

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由上海交通大学提出

。

本标准由上海市畜牧办公室归口

。

本标准由上海交通大学中华人民共和国上海出入境检验检疫局上海市动物疫病预防控制中心

、、、

上海市动物卫生监督所起草

。

本标准主要起草人杨志彪袁聪俐华修国夏永高崔立朱建国陈琦蒋静

:、、、、、、、。

Ⅰ

DB31/T600—2012

猪附红细胞体PCR检测方法

1范围

本标准规定了猪附红细胞体检测方法

PCR。

本标准适用于猪附红细胞体的检测

。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

实验室生物安全通用要求

GB19489

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

附红细胞体Eperythrozoons

附红细胞体病的病原主要寄生于人和动物的红细胞表面血浆及骨髓以引起

(Eperythrozoonsis),、,

贫血黄疸和发热为主要特征是一种重要的人兽共患病病原

、,。

32

.

猪附红细胞体Eperythrozoonsuis

猪附红细胞体病的病原主要寄生于猪的红细胞表面血浆及骨髓以引起贫血黄疸和发热为主要

,、,、

特征并有隐性感染慢性迁延条件致病急性发病时致死率高的特征

,、、、。

4原理

以从血液样本中提取的基因组作为模板加入到扩增猪附红细胞体的反应混合液中

DNA,PCR,

进行扩增最后通过琼脂糖凝胶电泳检测产物与进行比较来确定扩增产物

PCR。PCR,DNAMarker,

的大小在此基础上判定样品的检测结果

,。

所用引物是根据猪附红细胞体保守序列设计

16SrRNA。

5试剂和材料

除另有规定所用试剂均为分析纯水为符合的灭菌双蒸水

,,GB/T6682。

51猪附红细胞体反应混合物

.PCR:

上下游引物各缓冲液含镁离子双蒸水加至引物序列如下扩

、1μL,10×PCR2.5μL()、23μL。,

增长度为引物浓度为

396bp,20μmol/L。

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