JJF 1874-2020 (自动)核酸提取仪校准规范

中华人民共和国国家计量技术规范

JJF1874—2020

自动核酸提取仪校准规范

()

CalibrationSecificationforAutomaticNucleicAcidExtractors

p()

2020-11-26发布2021-05-26实施

国家市场监督管理总局发布

JJF1874—2020

自动核酸提取仪校准规范

()

—

CalibrationSpecificationforJJF18742020

AutomaticNucleicAcidExtractors

()

归口单位全国生物计量技术委员会

:

起草单位浙江省计量科学研究院

:

中国计量科学研究院

本规范委托全国生物计量技术委员会负责解释

JJF1874—2020

本规范主要起草人

:

张辉浙江省计量科学研究院

()

余笑波浙江省计量科学研究院

()

隋志伟中国计量科学研究院

()

参加起草人

:

陈川中国计量科学研究院

()

沙跃兵浙江省计量科学研究院

()

JJF1874—2020

目录

引言

………………………(Ⅲ)

范围

1……………………(1)

引用文件

2………………(1)

概述

3……………………(1)

计量特性

4………………(1)

温度示值误差

4.1………………………(1)

温度均匀性

4.2…………(1)

温度稳定性

4.3…………(1)

振动频率示值误差

4.4…………………(1)

振动频率稳定性

4.5……………………(1)

取液量示值误差

4.6……………………(1)

取液量重复性

4.7………………………(1)

取液量一致性

4.8………………………(1)

核酸提取回收率一致性

4.9……………(1)

核酸提取回收率重复性

4.10…………(1)

核酸提取回收率

4.11…………………(1)

校准条件

5………………(1)

环境条件

5.1……………(1)

校准设备和标准物质

5.2………………(2)

校准项目和校准方法

6…………………(2)

温度示值误差

6.1………………………(2)

温度均匀性

6.2…………(2)

温度稳定性

6.3…………(3)

振动频率示值误差

6.4…………………(3)

振动频率稳定性

6.5……………………(3)

取液量示值误差

6.6……………………(4)

取液量重复性

6.7………………………(4)

取液量一致性

6.8………………………(4)

核酸提取回收率一致性

6.9……………(5)

核酸提取回收率重复性

6.10…………(5)

核酸提取回收率

6.11…………………(6)

校准结果表达

7…………(6)

复校时间间隔

8…………(6)

附录校准原始记录格式参考

A()…………………(7)

附录校准证书内页格式

B()………(10)

Ⅰ

JJF1874—2020

附录温度示值误差校准结果的不确定度评定示例

C………………(12)

附录振动示值误差校准结果的不确定度评定示例

D………………(14)

附录取液量示值误差校准结果的不确定度评定示例

E……………(16)

附录核酸提取回收率校准结果不确定度评定示例

F………………(18)

附录纯水密度表

G……………………(20)

Ⅱ

JJF1874—2020

引言

国家计量校准规范编写规则通用计量术语及

JJF1071—2010《》、JJF1001—2011《

定义测量不确定度评定与表示共同构成支撑校准规范制修订

》、JJF1059.1—2012《》

工作的基础性系列规范本规范在自动核酸提取仪的主要技术参数实验测试结果的

。()

基础上编制参考了聚合酶链反应分析仪校准规范

,JJF1527—2015《》。

本规范为首次发布

。

Ⅲ

JJF1874—2020

自动核酸提取仪校准规范

()

1范围

本规范适用于全自动核酸提取仪和半自动核酸提取仪的校准

。

2引用文件

本规范引用了下列文件

:

测量不确定度评定与表示

JJF1059.1—2012

环境试验设备温度湿度校准规范

JJF1101—2019、

聚合酶链反应分析仪校准规范

JJF1527—2015

凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本规范凡是不注日期的引用文

,;

件其最新版本包括所有的修改单适用于本规范

,()。

3概述

自动核酸提取仪以下简称提取仪是应用核酸提取试剂完成样本核酸提取的

()()

一类核酸提取纯化设备其原理是在一定温度振动等条件下对样本进行裂解提取

,、,、

和纯化提取仪由温控系统振荡系统取液系统和分离纯化系统全部或部分组成

。、、。

4计量特性

温度示值误差

4.1

温度均匀性

4.2

温度稳定性

4.3

振动频率示值误差

4.4

振动频率稳定性

4.5

取液量示值误差

4.6

取液量重复性

4.7

取液量一致性

4.8

核酸提取回收率一致性

4.9

核酸提取回收率重复性

4.10

核酸提取回收率

4.11

5校准条件

环境条件

5.1

环境温度

5.1.1:(10~30)℃。

相对湿度

5.1.2:≤80%。

提取仪所在室内不得有明显的机械振动无电磁干扰

5.1.3,。

1

JJF1874—2020

其他允许的环境条件

5.1.4。

校准设备和标准物质

5.2

温度测量装置

5.2.1

可至少同时测量组温度数据测量范围最大允许误差

7,(0~120)℃,±0.3℃。

振动频率测量装置

5.2.2

测量范围为级或优于级

(0.1~500)Hz,0.10.1。

电子天平

5.2.3

分度值最大称量值满足级要求经过计量检定或校准

0.1mg,≥200g,Ⓘ,。

核酸标准物质

5.2.4

采用有证标准物质浓度相对扩展不确定度Uk

,≥1000ng/μL,rel≤5%(=2)。

微量分光光度计

5.2.5

经过校准或用有证标准物质进行标定

,。

6校准项目和校准方法

温度示值误差

6.1

温度点一般选择或者其他有实际需要的温度为校准点

55℃、65℃、90℃,。

使用温度测量装置将温度传感器固定在提取仪的加热模块上温度传感器均匀分

,,

布保证温度传感器与加热模块贴合紧密对于不同加热模块的提取仪可根据实际情

,。,

况均匀选取测量点测温点数选取规则如下提取仪孔位数位位测温点选

,:48~96,

个提取仪孔位数位位测温点选个提取仪孔位数位及以下的测温点

7;8~48,5;8,

选个

3。

设定被校提取仪的校准温度稳定或以上待温度稳定后读取测温点的

,10min,,

温度值根据公式和公式计算温度的示值误差

,(1)(2)。

T=T-T

Δas(1)

n

T=1Ti

ni=(2)

∑1

式中

:

T温控工作区域内温度示值误差

Δa———,℃;

T温控工作区域内设定温度值

s———,℃;

T所有测温点温度传感器测量值的平均值

———,℃;

Ti第i个温度传感器测量值

———,℃;

n测温点数量

———。

温度均匀性

6.2

分别测试提取仪温度设定为也可选择其他有实际需要的温

55℃、65℃、90℃(

度进行测试时工作区域的温度均匀性根据公式计算温度的均匀性

)。(3)。

T=T-T

Δumaxmin(3)

式中

:

T温度均匀性

Δu———,℃;

2

JJF1874—2020

T所有测温点温度传感器测量值的最大值

max———,℃;

T所有测温点温度传感器测量值的最小值

min———,℃。

注:若提取仪提取通道少于个,则不做均匀性考察。

3

温度稳定性

6.3

测试提取仪温度设定为时加热区域的温度稳定性待提取仪温度稳定后测

65℃。,

试隔记录一次所有测温点温度传感器测量平均值这些平均值极差的一

10min,1min,

半冠以号表示温度的稳定性根据公式计算温度的稳定性

,±。(4)。

T=±1T-T

Δw(maxmin)(4)

2

式中

:

T温度稳定性

Δw———,℃;

T所有测温点温度传感器测量平均值中的最大值

max———,℃;

T所有测温点温度传感器测量平均值中的最小值

min———,℃。

振动频率示值误差

6.4

校准振动频率点选取提取仪频率设定最大值的低中高

20%()、50%()、80%()

个点或者其他有实际需求的振动频率作为校准点使用振动频率测量装置进行

3,。

测量

。

待提取仪稳定后设定待测频率值分别测量低中高提取仪振动频率的

5min,,、、

示值每个频率测量次根据公式和公式计算振动频率的示值误差

,3,(5)(6)。

F=F-F

Δas(5)

n

F=1Fi

ni=(6)

∑1

式中

:

F振动频率示值误差

Δa———,Hz;

F振动频率设定值

s———,Hz;

Fn次测量振动频率的平均值

———,Hz;

Fi第i次振动频率测量值

———,Hz;

n测量次数

———。

注:若提取仪振动频率没有具体数值,则此项可以不做。

振动频率稳定性

6.5

测试提取仪振动频率设定为中等值时振动频率的稳定性选取振动频率为设定最大

。

值的待提取仪振动稳定后测试隔记一次振动频率之

50%,,10min,1min,10min

内测得的振动频率极差的一半冠以号表示振动频率的稳定性根据公式计算

,±。(7)

振动频率的稳定性

。

F=±1F-F

Δw(maxmin)(7)

2

式中

:

F振动频率稳定性

Δw———,Hz;

3

JJF1874—2020

F振动频率测量值的最大值

max———,Hz;

F振动频率测量值的最小值

min———,Hz。

取液量示值误差

6.6

分别设定提取仪取液量为或者其他有实际需要的取液量

50μL、100μL、200μL,

作为校准点超纯水作为被取液选择一个通道每个取液量测量次用电子天平称

。,,3,

量所取液体质量根据实验温度时水的密度将所取液体的质量换算成体积根据公式

,,,

和公式计算取液量的示值误差

(8)(9)。

V=V-V

Δas