DB13/T 5457-2021 马铃薯对黄萎病抗性评 价技术规程

ICS65.020

CCSB16

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河北省地方标准

DB13/T5457—2021

马铃薯对黄萎病抗性评价技术规程

2021-12-13发布2022-01-13实施

河北省市场监督管理局发布

DB13/T5457—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规

定起草。

本文件由河北省农业农村厅提出。

本文件起草单位：河北省农林科学院植物保护研究所。

本文件主要起草人：鹿秀云、李社增、年冠臻、郭庆港、张晓云、赵卫松、苏振贺、马平。

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马铃薯对黄萎病抗性评价技术规程

1范围

本文件规定了马铃薯对黄萎病（Verticilliumwilt）抗性的室内评价和田间评价的方法及程序。

本文件适用于马铃薯品种和材料抗黄萎病的评价。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用

文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）

适用于本文件。

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

感病对照品种referencedsusceptiblevariety

罹病后黄萎病病情指数能达40.0以上的品种。

病情指数diseaseindex

全面考核供试品种发病率和严重程度的综合指标。

病情指数校正系数correctionofthediseaseindex

标准病情指数（50.0）与同批次评价试验中感病对照品种病情指数的比值，记作K。

相对病情指数relativediseaseindex

病情指数与病情指数校正系数的乘积，记作RDI。

4仪器设备

恒温摇床、恒温培养箱、超净工作台、高压灭菌锅、冰箱、显微镜、甩干机、可控温的温室及培

养室（使温度保持在20℃～28℃）、不锈钢锅、电磁炉、培养皿、试管、剪子、镊子、三角瓶等。

5室内评价

病原菌的选择、培养和接种液制备

选择马铃薯黄萎菌强致病力菌株，在马铃薯琼脂培养基（PDA）上活化7d～10d，挑取菌落边缘

的新鲜菌丝块4～5块转接于马铃薯葡萄糖培养液（PDB，150mL/300mL三角瓶）中，在25℃、180rmin-

1条件下恒温振荡培养5d后用2层灭菌纱布滤除菌丝，得到分生孢子悬浮液。在显微镜下用血球计数

板计数，并用灭菌水将其浓度调整为1.0×107孢子/mL，作为接种液。

感病对照品种选择

选择对黄萎病表现高度感病的马铃薯品种费乌瑞它作感病对照品种。

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马铃薯种薯处理与育苗

将供试马铃薯品种及感病对照品种的种薯置于25℃催芽15d左右，待芽长至0.5cm后，用75%酒

精消毒刀具，自尾芽开始切成立体小三角块（25g～50g），保证每块至少有1～2个芽眼。25℃摊开

放置4h，待薯块切口风干后播种于薄壁塑料育苗盆。育苗盆口径为20cm，下部垫灭菌土（大田土壤

重量:育苗基质重量=1:1，121℃，0.1MPa～0.15MPa，1h）5cm～6cm，压实，每盆放置3块薯块，

上部覆土厚度为3cm～4cm，灌足自来水，在温室中培养（培养温度为20℃～28℃，出苗后10h光照，

14h黑暗。阴天开补光灯，光照过强使用遮阳网）。每个品种播种5盆作为1次重复，重复4次。

病原菌接种

采用人工伤根接种法。待马铃薯出苗后15d，用消毒的壁纸刀将花盆底部切掉，再用壁纸刀沿

花盆底部平切伤根，然后放到底部铺有2cm灭菌土的同样新花盆中，置于接种液（2.0L）中浸泡30

min，继续在原来环境中培养。设置清水处理为对照。

66田间评价

选地

人工黄萎病圃应建立在马铃薯代表性产区或土壤气候条件相似、有利于黄萎病发生的地区；要

求发病均匀，正常年份感病对照品种的病情指数达到40.0～60.0；病圃地势平坦，排灌方便，周围

无房屋、树木等荫蔽，有隔离设施。

病原菌培养基质的准备

选用带短绒的棉花毛籽作为繁殖病原菌的营养基质。首先将棉花毛籽放入容器中，加入自来水

（洗涤灵浓度0.1%）将棉籽浸没，浸泡过夜；次日将棉籽装入纱袋中并用甩干机甩干，然后装入菌

种繁殖袋中（每袋3.0kg），用棉塞和报纸封口，高压湿热灭菌1h（121℃，0.1MPa～0.15MPa）备

用。