DB21/T 3286-2020 水质 5种磺胺类抗生素的测定 固相萃取高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法

ICS13.020.40

Z10

DB21

辽宁省地方标准

DB21/T3286—2020

水质5种磺胺类抗生素的测定

固相萃取/高效液相色谱-三重四极杆串联

质谱法

2020-08-30发布2020-09-30实施

辽宁省市场监督管理局发布

DB21/T3286—2020

目次

前言..............................................................................II

1适用范围.............................................................................1

2规范性引用文件.......................................................................1

3方法原理.............................................................................1

4干扰和消除...........................................................................1

5试剂.................................................................................1

6仪器和设备...........................................................................2

7样品.................................................................................2

8分析步骤.............................................................................3

9结果计算与表示.......................................................................5

10精密度和准确度......................................................................6

11质量保证和质量控制..................................................................7

12废物处理............................................................................7

附录A（资料性附录）方法的精密度和准确度..............................................8

I

DB21/T3286—2020

前言

本标准按照GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则编写。

本标准附录A为资料性附录。

本标准由大连市市场监督管理局提出。

本标准由辽宁省生态环境厅归口。

本标准主要起草单位：辽宁省大连生态环境监测中心。

本标准主要起草人：付晓燕、刘莲莲、杨硕、杨萌。

本标准发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈，

我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。

归口管理部门通讯地址：辽宁省生态环境厅（沈阳市浑南区双园路30甲），联系电话：024-62788517。

标准起草单位通讯地址：辽宁省大连生态环境监测中心（辽宁省大连市沙河口区连山街58号），联

系电话：0411-84691900。

II

DB21/T3286—2020

水质5种磺胺类抗生素的测定

固相萃取/高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法

警告：实验中所使用的甲醇、磺胺类抗生素属于有毒有机物，实验操作时应避免接触皮肤和衣物，

溶液配制过程应在通风橱内进行。

1适用范围

本标准规定了测定水中磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶和磺胺甲恶唑等

5种磺胺类抗生素的高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法。

本标准适用于地表水、地下水、海水、工业废水和生活污水中5种磺胺类抗生素的测定。

当样品体积为100ml，浓缩定容至1.0ml，进样体积为10.0μl时，本方法磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧

啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶和磺胺甲恶唑的检出限分别为0.01μg/L、0.01μg/L、0.01μg/L、

0.009μg/L和0.01μg/L，测定下限分别为0.04μg/L、0.04μg/L、0.04μg/L、0.036μg/L和0.04

μg/L，测定上限均为100μg/L。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14581水质湖泊和水库采样技术指导

HJ91.1污水监测技术规范（部分代替HJ/T91污水监测技术规范）

HJ/T91地表水和污水监测技术规范

HJ/T164地下水环境监测技术规范

HJ442近岸海域环境监测规范

HJ493水质样品的保存和管理技术规定

3方法原理

水样经固相萃取后，水中磺胺类抗生素经液相色谱仪分离，用串联质谱仪在多反应监测（MRM）条

件下测定，根据保留时间和特征离子对定性，内标法以峰面积（或峰高）定量。

4干扰和消除

当样品中存在基质干扰时，可通过优化色谱条件、稀释样品、减少进样体积以及对样品进行预处理

等方式降低或消除。

5试剂

1

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除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的优级纯试剂，实验用水符合GB/T6682，一级。

5.1甲醇（CH3OH）：液相色谱纯。

5.2甲酸（HCOOH）。

5.3甲酸溶液：1+1000（V/V）。

量取1.0ml甲酸（5.2）缓慢加入1L实验用水中，混匀。

5.4标准物质

5.4.1磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲恶唑标准物质：纯度≥99%。

13

5.4.2磺胺甲基嘧啶-C6内标标准物质：纯度≥99%。

5.5标准溶液

5.5.1磺胺类抗生素标准贮备液：ρ=100.0mg/L。

准确称取适量的每种磺胺类标准物质（5.4.1），用甲醇配成100.0mg/L的标准贮备液，或直接购

买有证标准溶液，贮备液在0~4℃冷藏避光保存，可稳定保存20天，或参照制造商的产品说明保存。

5.5.2磺胺类抗生素标准使用液：ρ=1.00mg/L。

将磺胺类抗生素标准贮备溶液（5.5.1）用甲醇稀释至1.0mg/L，现用现配。

13

5.5.3磺胺甲基嘧啶-C6标准贮备液：ρ=100.0mg/L。

13

准确称取适量的磺胺甲基嘧啶-C6标准物质（5.4.2），用甲醇（5.1）配成100.0mg/L的标准贮备

液，或直接购买有证标准溶液，贮备液在0~4℃冷藏避光保存或参照制造商的产品说明保存使用。

13

5.5.4磺胺甲基嘧啶-C6标准使用液：ρ=1.0mg/L。

13

将磺胺甲基嘧啶-C6标准贮备溶液（5.5.3）用甲醇（5.1）稀释至1.0mg/L，现用现配。

5.6氮气：纯度≥99.9%。

6仪器和设备

6.1高效液相色谱/三重四极杆质谱仪：高效液相色谱仪具备梯度洗脱功能；三重四极杆质谱仪配有电

喷雾离子化源（ESI）。

6.2色谱柱：填料为硅胶基质C18，粒径1.8μm，柱长100mm，内径2.1mm，或其他等效色谱柱。

6.3固相萃取装置。

6.4浓缩装置：K-D浓缩器、氮吹仪等性能相当的设备。

6.5滤膜：针式有机相过滤器，孔径0.22μm，直径13mm，玻璃纤维、亲水性聚丙烯、亲水性聚四氟

乙烯（PTFE）或其它等效材质。

6.6固相萃取柱：填料为二乙烯苯和N-乙烯基吡咯烷酮共聚物或同等柱效的萃取柱，规格为6ml/500

mg。

6.7棕色样品瓶：2.0ml。

6.8采样瓶：500ml棕色玻璃瓶，螺旋盖（具聚四氟乙烯涂层的密封垫）。

6.9微量注射器：10μl、50μl、100μl、1ml。

7样品

7.1样品采集与保存

2

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按照GB/T14581、HJ91.1、HJ/T91、HJ/T164、HJ442和HJ493的相关规定进行样品的采集和保

存。

采集样品时，向采样瓶（6.8）中加入甲酸（5.2）500μl，然后采集样品至满瓶，拧紧螺旋盖密

封，摇匀。水样0~4℃冷藏避光保存，48h内完成分析。

7.2试样制备

活化：用10ml甲醇（5.1）活化固相萃取柱，保证固相萃取柱柱头浸润。再用10ml实验用水活化

固相萃取柱，保证固相萃取柱柱头浸润。

上样：水样上样前放置至室温，准确量取100ml水样，水样以3~5ml/min的流速通过固相萃取柱。

淋洗：用10ml实验用水淋洗固相萃取柱，将在固相萃取柱上保留较弱的杂质淋洗下来，弃去淋洗

液。

洗脱：用10ml甲醇（5.1）洗脱富集后的固相萃取柱，并用接收管接收甲醇洗脱液。

浓缩：将上述提取溶液浓缩至低于1.0ml近干，加甲酸溶液（5.3）定容到1.0ml，最后加入内标

使用液10.0μl，经0.22μm滤膜（6.5）过滤，置于棕色样品瓶（6.7）中，待测定。

7.3空白试样的制备

用实验用水代替样品按照试样制备（7.2）相同操作步骤，制备空白试样。

8分析步骤

8.1仪器参考条件

8.1.1液相色谱仪参考条件

流动相：流动相A为甲醇（5.1），流动相B为甲酸溶液（5.3），线性梯度洗脱程序见表1。

柱温：40℃；

进样体积：10μl；

流速：0.2ml/min；

表1液相色谱流动相线性梯度洗脱程序

时间（min）流动相