DB33/T 2333-2021 饲料中β-胡萝卜素的测定 高效液相色谱法

CICSC65.020.01

CCSB20

DB33

浙江省地方标准

DB33/T2333—2021

饲料中β-胡萝卜素的测定

高效液相色谱法

Determinationofβ-caroteneinfeeds—

Highperformanceliquidchromatography

2021-04-13发布2021-05-13实施

浙江省市场监督管理局发布

DB33/T2333—2021

前言

本标准按GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本标准的某些内容可能涉及专利。本标准的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由浙江省农业农村厅提出。

本标准由浙江省畜牧兽医和饲料标准化技术委员会（ZJQS/TC33）归口。

本标准起草单位：浙江省动物疫病预防控制中心（浙江省兽药饲料监察所）。

本标准主要起草人：施杏芬、吕伟军、阮鑫、张志健、裘丞军、吴望君、商小金。

II

DB33/T2333—2021

饲料中β-胡萝卜素的测定

高效液相色谱法

1范围

本标准规定了饲料中β-胡萝卜素的高效液相色谱测定方法。

本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料中β-胡萝卜素的测定。

本标准配合饲料、浓缩饲料、精料补充料的定量限为1mg/kg，添加剂预混合饲料的定量限为2mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本标准必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本标准；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

标准。

GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法

GB/T20195动物饲料试样的制备

3术语和定义

本标准没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样中β-胡萝卜素经碱溶液超声皂化，生成全反式β-胡萝卜素，经石油醚萃取，减压浓缩后，用

高效液相色谱法测定，外标法定量。

5试剂或材料

除非另有规定，仅使用分析纯试剂。

5.1水：GB/T6682-2008，一级。

5.2甲醇：色谱纯。

5.3异丙醇：色谱纯。

5.4二氯甲烷：色谱纯。

5.5石油醚（沸程30℃～60℃）。

5.6正己烷。

5.7无水硫酸钠。

5.8乙二胺四乙酸二钠（EDTA）。

5.92,6-二叔丁基对甲酚（BHT）。

5.10L-抗坏血酸乙醇溶液：称取L-抗坏血酸0.5g，加4mL水加热溶解，用无水乙醇稀释至100mL混

匀（现配现用）。

5.1150%氢氧化钾溶液：称取氢氧化钾50g，加水100mL溶解，混匀。

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DB33/T2333—2021

5.12饱和氯化钠溶液：先将烧杯中的水煮沸，向沸水中边搅拌边加入氯化钠，直到有固体颗粒析出，

将此溶液冷却至室温。

5.13标准储备溶液（500µg/mL）：称取全反式β-胡萝卜素标准品（CAS：7235-40-7，纯度不低于

95%）50mg（精确至0.01mg）至100mL棕色容量瓶中，加入10mL二氯甲烷（5.4）溶解，用二氯甲烷

（5.4）稀释并定容至刻度，混匀，每次临用前按附录A标定。-20℃保存，有效期2个月。

5.14标准中间溶液（100µg/mL）：精确移取β-胡萝卜素标准储备溶液（5.13）10.0mL于50mL棕色

容量瓶中，加入二氯甲烷（5.4）稀释并定容。于4℃保存，有效期为1周。

5.15标准系列溶液：精确移取适量β-胡萝卜素标准中间溶液（5.14）于100mL棕色容量瓶中，用流动

相稀释定容配成系列标准溶液，浓度分别为0.0µg/mL、0.50µg/mL、1.00µg/mL、2.50µg/mL、5.00µg/mL、

10.00µg/mL。临用现配。

5.16微孔滤膜：0.45µm，有机系。

6仪器设备

6.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器/二极管阵列检测器。

6.2分析天平：感量分别为0.001g和0.01mg。

6.3超声