DB45/T 1488-2017 动物源性食品中兽药残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

ICS67.040

X0404XDB45

广西壮族自治区地方标准

DBDB1488—201745/T

动物源性食品中兽药残留量的测定液相

色谱-串联质谱法

DeterminationofkindsofveterinarydrugresiduesinfoodstuffsofanimaloriginbybyoriginanimaloffoodstuffsinresiduesdrugveterinaryofkindsofDetermination

liquidliquidchromatography-tandemspectrometrymass

2017-02-20发布2017-03-20实施

广西壮族自治区质量技术监督局发布

DB45/T1488DB45/T—2017

前言

本标准按GB/T1.1—2009给出的规则起草。1.1—2009给出的规则起草。本标准按GB/T

本标准由广西壮族自治区产品质量检验研究院提出并起草。

本标准主要起草人：李暄、郭盈岑、农馥俏、干宁军、莫百春、何晓蓉、黎德勇、黄超技、褚丽琼、

宁盼盼、黎志诚。

I

DB45/T1488DB45/T—2017

动物源性食品中兽药残留量的测定液相色谱-串联质谱法液相色谱-串联质谱法动物源性食品中兽药残留量的测定

1范围

本标准规定了动物源性食品中兽药残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。本标准规定了动物源性食品中兽药残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。

Salbutamol本标准适用于鱼、虾、禽等动物源性食品中西马特罗（Cimaterol）、沙丁胺醇（）、克伦

Clenbuterol特罗（）、甲硝唑（）Metronidazole、地美硝唑（DimetronidazoleChlorpromazine）、氯丙嗪（）、

氯霉素（Chloramphenicol）残留量的测定。）和α-玉米赤霉醇（Zeranol

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682—2008分析实验室用水规格和试验方法分析实验室用水规格和试验方法6682—2008GB/T

3原理

试样中兽药残留采用乙腈、甲醇水在超声波辅助条件下提取，提取液经离心分离，正己烷去脂，液

相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。

4试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水应符合GB/T6682—2008规定的一级水。6682—2008规定的一级水。除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水应符合GB/T

4.14.1甲醇：质谱级。

4.24.2乙腈：质谱级。

4.34.3正己烷：色谱级。

4.44.4混合振荡，静置分层后，取上层溶液。乙腈饱和正己烷溶液：乙腈与正己烷体积比1+1

4.54.5甲醇：水（5:5）溶液：甲醇与水体积比1+1混合振荡，静置。

4.64.6混合振荡，静置。9+1甲醇:水（9:1）溶液：甲醇与水体积比

4.74.7混合振荡，静置1+1甲醇:水（9:1）饱和正己烷溶液：甲醇水混合液（4.6）与正己烷以体积比

分层后，取上层溶液。

4.84.8西马特罗、沙丁胺醇、克伦特罗、甲硝唑、地美硝唑、氯丙嗪、氯霉素和α-玉米赤霉醇标准品：

纯度≥99.5%。纯度≥99.5%。

4.94.9标准溶液储备液：–18保存，可使用℃6个月。配制方法如下：

a)分别准确量取适量的克伦特罗、沙丁胺醇、西马特罗、甲硝唑、地美硝唑和氯丙嗪标准品，

用甲醇配制成100µg/mLA标准溶液储备液；

b)分别准确量取适量的氯霉素和α-玉米赤霉醇，用甲醇配制成100µg/mLB标准溶液储备液。

4.104.10标准中间浓度工作溶液：2µg/mL。4℃保存，可使用3个月。配制方法如下：

1

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a)标准中间浓度工作溶液A：吸取1.00AmL混合标准溶液储备液（4.9）于50mL容量瓶中，用

甲醇水溶液（4.5）稀释至刻度；

b)标准中间浓度工作溶液B：吸取1.00BmL混合标准溶液储备液（4.9）于50mL容量瓶中，用

甲醇水溶液（4.5）稀释至刻度。

4.114.11基质混合标准工作溶液：根据每种标准物质的灵敏度和仪器线性范围，分别吸取一定量的标准

中间浓度工作溶液4.10a)和4.10，用空白试样提取液配成系列浓度的基质混合标准工作溶液，当b)

天配制。参考浓度梯度为0.05ng/mL，0.10ng/mL，0.50ng/mL，1.00ng/mL，5.00ng/mL，10.00g/mL。

4.124.12一次性注射式滤器：配有0.22µm微孔有机滤膜。

5仪器和设备

5.15.1电喷雾离子源。液相色谱-串联质谱仪：配有

5.25.2分析天平：感量0.1和0.01mgg。

5.35.3000离心机：4r/min。

5.45.4组织捣碎机。

5.55.5均质器。

5.65.6超声波清洗机。

5.75.7砂芯漏斗：G3号。

5.85.8涡旋混匀器。

6试样制备与保存

6.16.1试样的制备

取动物源性食品可食部分约400，装入洁净容器密封，标记。g用组织捣碎机绞碎

6.26.2试样的保存

小于或等于-18将试样于℃冰箱中保存。

7测定步骤

7.17.1提取与净化

7.1.17.1.1称取5.00g试样，置于50mL聚丙烯离心管（加入1）中，15mL乙腈，10mL乙腈饱和正己

烷溶液（4.4）均质000匀浆（10in，2r/mmin），以0004r/min离心5min，得到一个三相体系，从

上至下分别为正己烷相、乙腈相及残渣。用玻璃滴管将正己烷相转移于50mL管（离心2）中，乙腈

相转移于另一只50mL管（离心3）中。用1mL乙腈萃取管2000中正己烷，4r/min离心5min后，

将乙腈相与管3中的乙腈相合并。

7.1.27.1.2另取一支50mL离心管（管4），加入10mL甲醇：水（9:1）溶液（4.6）洗涤均质刀头10s，

洗涤液移入管1残渣中，再向管1加入10mL甲醇：水（9:1）饱和正己烷溶液（4.7），用玻棒搅动残

渣，于涡旋混匀器上提取1min5，超声提取min，以0004r/min离心5m管in，取甲醇相与3中

乙腈相合并。

2

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7.1.37.1.3向管1残渣中加入15mL超纯水超声提取5m000in，4r/min离心5min，将水相与管3中有机

相合并。将管3于0004r/min离心5min玻璃滴管吸去上层正己烷相，若无分层，若溶液有分层，用

则直接过砂芯漏斗，用水于50mL过有机滤膜，待液相色谱-串联质谱分析。容量瓶中定容，

7.1.47.1.4按以上步骤对同一试样进行平行试验，并进行空白试验。

7.27.2液相色谱-串联质谱条件

7.2.17.2.1液相色谱条件

7.2.1.17.2.1.1色谱柱：SyncronisC18色谱柱，1.7µm，100mm×2.1mm或相当者。

7.2.1.27.2.1.2柱温：35℃。

7.2.1.37.2.1.3A溶液0.1%甲+流动相：甲醇梯度洗脱程序参见表酸水溶液，1。

表1A溶液梯度洗脱程序

时间甲醇0.1%甲酸水溶液

min%%

0.001090

2.007030

3.507030

4.00955

7.00955

7.101090

10.001090

7.2.1.47.2.1.4B溶液水，+流动相：甲醇梯度洗脱程序参见表2。

表2B溶液梯度洗脱程序

时间甲醇水

min%%

0.001090

1.00