T/QAS 013-2020 枸杞中芦丁含量的测定 高效液相色谱法

范围:本标准规定了高效液相色谱法测定枸杞中芦丁的原理、试剂、仪器和设备、样品制备、分析步骤、数据处理和精密度。 本标准适用于枸杞干果中芦丁的测定; 主要技术内容:6样品制备取具有代表性样品200 g，用四分法将试样缩分至100 g，测试前，取样品100g,置于60℃烘箱中干燥5h以上，然后取出样品，冷却至室温后用高速万能粉碎机粉碎，置于样品袋备用。7分析步骤7.1试样提取精确称取1.0g（精确到0.0001g）粉碎的枸杞样于100mL离心管中，加70%(V甲醇/V水)甲醇水溶液50mL，摇匀，放置超声波清洗器中超声提取50min（每15min震摇1次），取出后在4000r/min转速下离心10min，上清液过0.45μm微孔滤膜过滤，供高效液相色谱仪测定。7.2高效液相参考条件a)色谱柱：Hypersil GOLD C18柱250mm*4.6mm，5.0μm，或相当者；b)柱温：30℃；c)流动相：A:甲醇，B:4％甲酸溶液，A:B=40%：60%；d)流速:1.0mL/min；e)波长:360nm；f)进样量:10μL。7.3标准曲线的绘制用70%的甲醇溶液将芦丁标准溶液逐级稀释得到浓度为0、5、10、50、100、200μg/mL的标准工作溶液（见表1），依次由低到高进样检测，质量浓度X（μg/mL）为横坐标，以响应值（峰面积）Y为纵坐标进行线性回归，得到标准曲线回归方程。表1标准工作溶液项目标准溶液（母液）标准溶液1234567芦丁1mg/mL工作标准溶液浓度μg/mL）05102050100200移取标准溶液体积/mL00.050.100.200.501.002.007.4测定待测液中芦丁的响应值应在标准曲线范围内，超过线性范围则应稀释后再进样分析，同时做空白实验