DB37/T 3322-2018 蔬菜中甲拌磷等7种农药及代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

ICS67.050

X04

DB37

山东省地方标准

DB37/T3322—2018

蔬菜中甲拌磷等7种农药及代谢物残留量

的测定液相色谱-串联质谱法

2018-06-12发布2018-07-12实施

山东省质量技术监督局发布

DB37/T3322—2018

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由山东省农业厅提出。

本标准由山东省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：山东省农业环境保护和农村能源总站。

本标准主要起草人：吴成、王蕾、赵志强、任海雷。

I

DB37/T3322—2018

蔬菜中甲拌磷等7种农药及代谢物残留量的测定液相色谱-串联质

谱法

1范围

本标准规定了菠菜、豇豆、番茄、甘蓝、黄瓜和韭菜中甲拌磷等7种农药及代谢物(参见附录A)残留

量液相色谱-串联质谱测定方法。

本标准适用于菠菜、豇豆、番茄、甘蓝、黄瓜和韭菜中甲拌磷等7种农药及代谢物残留量的测定，

其它蔬菜可参照执行。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

试样用乙腈匀浆提取，盐析离心后，取上清液，过滤后用液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。

4试剂和材料

除另有规定外，所有试剂均为色谱纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水。

4.1试剂

a)乙腈(CH3CN，75-05-8)。

b)甲醇(CH3OH，67-56-1)。

c)甲酸(CH2O2，64-18-6)。

d)醋酸铵(C2H7NO2，631-61-8)。

e)氯化钠(NaCl，7647-14-5)，分析纯，140℃烘烤4h。

4.2溶液配制

0.1%甲酸+5mmol/L醋酸铵水溶液：准确移取1mL甲酸和称取0.385g醋酸铵于1000mL容量瓶中，

用水定容至刻度，现配现用。

4.3标准品

7种农药及代谢物标准品：纯度≥95%，标准品信息参照附录A。

1

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4.4标准溶液配制

4.4.1标准储备溶液

分别准确称取适量（精确至0.1mg）农药及代谢物标准品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至

刻度，配制成100mg/L的标准储备溶液(或购买有证标准储备溶液)，0℃～4℃保存，保存期为6个月。

4.4.2中间标准溶液

准确吸取适量的标准储备溶液，用甲醇稀释配制成10mg/L的7种农药及代谢物中间标准溶液，

0℃～4℃保存，保存期为1个月。

4.4.3混合标准工作溶液

准确吸取适量的中间标准溶液，用甲醇稀释配制成所需浓度的混合标准工作溶液，现用现配。

4.5材料

微孔过滤膜：有机系，0.22µm。

5仪器和设备

a)液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)；

b)分析天平：感量0.0001g和0.01g；

c)组织捣碎机；

d)旋涡混合器；

e)均质器：转速不低于15000r/min；

f)离心机：转速不低于5000r/min；

6试样制备

蔬菜样品取样部位按照GB2763附录A执行，将样品切碎、混匀、均一化，制成匀浆，制备好的试样

均分成两份，装入洁净的盛样容器内，密封并标明标记。应将试样于-18℃冷冻保存。

7分析步骤

7.1提取

称取15g试样（精确至0.01g）于100mL离心管中，加入30mL乙腈，用均质器在12000r/min匀浆

提取2min，加入6g氯化钠，再匀浆提取1min，3500r/min离心5min，取上清液约2mL，用0.22µm

滤膜过滤，待测。

7.2测定

7.2.1液相色谱－串联质谱参考条件

a)色谱柱：Shim-packXR-ODSⅢ色谱柱，50mm×2.0mm（i.d.），1.6µm，或相当者；

b)流动相：A为0.1%甲酸+5mmol/L醋酸铵水溶液按4.2配制的溶液，B为甲醇，梯度洗脱程序

参照表1，流速：0.35mL/min；

2

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c)柱温：40℃；

d)进样体积：10.0μL；

e)扫描方式：正/负离子模式；

f)检测方式：多反应监测(MRM)，多反应监测条件参照附录B；

g)加热块温度：400℃；

h)脱溶剂管(DL)温度：250℃；

i)干燥气（N2）流速：15.0L/min，纯度≥99.999%；

j)雾化气（N2）流速：3.0L/min，纯度≥99.999%；

k)电喷雾正离子源(ESI+)接口电压：4.5kV，电喷雾负离子源(ESI-)接口电压：-3.5kV；

l)检测器电压：1.74kV。

表1梯度洗脱程序

时间/minA/%B/%

0.59010

2.05050

5.05050

9.0595

11.5595

13.09010

注1：非商业性说明：以上质谱条件是在SHIMADZULCMS-8040质谱仪上完成的，列出试验用仪器型号仅是为了提供

参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。

7.2.2定性测定

进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱

图中，所选择的离子均出现，而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比进行比较，其允许偏差

不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在该农药及代谢物。如果不能确证，应重新进样，以扫描方

式（有足够灵敏度）或采用增加其他确证离子的方式或用其他灵敏度更高的分析仪器来确证。

表2定性时相对离子丰度的最大允许偏差

相对离子丰度＞50%＞20%至50%＞10%至20%≤10%

允许相对偏差±20%±25%±30%±50%

7.2.3定量测定

本方法采用外标法单定量离子对定量测定。为减少基质的影响，定量用标准溶液应采用基质混合标

准工作溶液。标准溶液浓度应与待测物浓度相近。在仪器最佳工作条件下，对基质混合标准工作溶液进

样，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中待测物响应值均应在仪器测定的

线性范围。本方法的甲拌磷等7种农药及代谢物标准物质多反应监测色谱图参照附录A中图A.1，质谱

图参照附录C。

7.3空白试验

除不称取试样外，均按上述步骤进行。

7.4平行试验

3

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按以上步骤对同一试样进行平行测定。

8结果计算和表述

液相色谱-串联质谱测定结果可由计算机按外标法自动计算，也可按式(1)计算：

V13AV

＝..................................(1)

ASmV2

式中：

ω——质量分数，指试样中各农药及代谢物残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；

——标准溶液中农药及代谢物的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；

A——样品溶液中农药及代谢物的峰面积；

AS——农药及代谢物标准溶液中农药及代谢物的峰面积；

V1——提取溶剂总体积，单位为毫升（mL）；

m——试样的质量，单位为克（g）；

V2——样品溶液进样体积，单位为微升（µL）；

V3——标准溶液进样体积，单位为微升（µL）；

注1：计算结果应扣除空白值，计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留两位有

效数字，含量超过1mg/kg时表示到三位有效数字。

9精密度

a)在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），按照

附录E。

b)在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），按照

附录F。

10定量限和回收率

10.1定量限

本方法的定量限(LOQ)参照附录A。

10.2回收率

当添加水平为LOQ、2×LOQ、20×LOQ时，添加回收率参照附录D。

4

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AA

附录A

（资料性附录）

甲拌磷等7种农药及代谢物中英文名称、分子式、CAS号、保留时间、定量限和标准物质色谱图

甲拌磷等7种农药及代谢物中英文名称、分子式、CAS号、保留时间和定量限，参照表A.1。标准物

质色谱图参照图A.1。

表A.1甲拌磷等7种农药及代谢物中英文名称、分子式、CAS号、保留时间和定量限

保留时间定量限

序号中文名称英文名称分子式CAS号

（min）（mg/kg）

1甲拌磷亚砜Phorate-sulfoxideC7H17O4PS22588-05-85.680.005

2甲拌磷砜Phorate-sulfoneC7H17O4PS32588-04-76.080.005

3氟甲腈Fipronil-desulfinylC12H4Cl2F6N4205650-65-38.330.005

4氟虫腈FipronilC12H4Cl2F6N4OS120068-37-38.450.005

5氟虫腈硫醚Fipronil-sulfideC12H4Cl2F6N4S120067-83-68.550.005

6氟虫腈砜Fipronil-sulfoneC12H4Cl2F6N4O2S120068-36-28.690.005

7甲拌磷PhorateC7H17O2PS3298-02-28.910.005

1-甲拌磷亚砜2-甲拌磷砜3-氟甲腈4-氟虫腈5-氟虫腈硫醚6-氟虫腈砜7-甲拌磷