GB/T 22259-2025 饲料中土霉素的测定

ICS65120

CCSB.46

中华人民共和国国家标准

GB/T22259—2025

代替GB/T22259—2008

饲料中土霉素的测定

Determinationofoxytetracyclineinfeeds

2025-08-01发布2026-02-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T22259—2025

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件代替饲料中土霉素的测定高效液相色谱法与

GB/T22259—2008《》,GB/T22259—2008

相比除结构调整和编辑性改动外主要技术变化如下

,,:

更改了适用范围检出限和定量限见第章年版的第章

a)、(1,20081);

增加了液相色谱串联质谱法见第章

b)-(4);

更改了原理见年版的第章

c)(5.1,20083);

更改了试剂或材料见年版的第章

d)(5.2,20084);

更改了仪器设备见年版的第章

e)(5.3,20085);

更改了样品见年版的第章

f)(5.4,20086);

更改了试验步骤见年版的第章

g)(5.5,20087);

更改了试验数据处理见年版的第章

h)(5.6,20088)。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC76)。

本文件起草单位河南省农畜水产品检验技术研究院陕西省畜牧技术推广总站

:、。

本文件主要起草人吴宁鹏彭丽李宏李慧素崔超胡艳丽张振宇张崇威晁娟娟孟蕾贾玉华

:、、、、、、、、、、。

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为

:

年首次发布为

———2008GB/T22259—2008;

本次为第一次修订

———。

Ⅰ

GB/T22259—2025

饲料中土霉素的测定

1范围

本文件描述了饲料中土霉素的液相色谱串联质谱和高效液相色谱测定方法

-。

本文件适用于配合饲料浓缩饲料精料补充料添加剂预混合饲料饲料原料和混合型饲料添加剂

、、、、

中土霉素的测定

。

本文件液相色谱串联质谱法的检出限为定量限为高效液相色谱法配合

-0.02mg/kg、0.05mg/kg;

饲料水产配合饲料除外浓缩饲料精料补充料和饲料原料的检出限为定量限为

()、、1.0mg/kg、2.0mg/kg,

水产配合饲料的检出限为定量限为添加剂预混合饲料和混合型饲料添加剂的

5.0mg/kg、10.0mg/kg,

检出限为定量限为

2.5mg/kg、5.0mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

动物饲料试样的制备

GB/T20195

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

。

4液相色谱-串联质谱法LC-MS/MS

()

41原理

.

试样中的土霉素用盐酸甲醇溶液或缓冲溶液提取提取溶液经稀释或固相萃取柱净化液相

,HLB,

色谱串联质谱仪测定基质匹配标准曲线校正外标法定量

-,,。

42试剂或材料

.

除非另有规定仅使用分析纯试剂

,。

421水一级

..:GB/T6682,。

422乙腈色谱纯

..:。

423甲醇色谱纯

..:。

424甲酸色谱纯

..:。

425盐酸甲醇溶液移取盐酸溶于甲醇中混匀

..:20mL1000mL,。

426盐酸溶液移取盐酸加水稀释至混匀

..(1mol/L):9mL,100mL,。

427氢氧化钠溶液称取氢氧化钠加水溶解并稀释至混匀

..(1mol/L):4g,100mL,。

428缓冲溶液分别称取一水柠檬酸十二水磷酸氢二钠和二水乙二胺四乙酸二钠

..Ⅰ:12.9g、27.6g

1

GB/T22259—2025

加入水溶解混匀用盐酸溶液和氢氧化钠溶液调至加水稀释

37.2g,900mL,。(4.2.6)(4.2.7)pH4.0,

至混匀

1000mL,。

429甲醇溶液移取甲醇用水稀释至混匀

..10%:10mL(4.2.3),100mL,。

4210甲醇溶液移取甲醇用水稀释至混匀

..20%:20mL(4.2.3),100mL,。

4211甲酸溶液移取甲酸用水稀释至混匀

..0.1%:1mL(4.2.4),1000mL,。

4212标准储备溶液准确称取土霉素对照品纯度不低于适量精

..(1mg/mL):(CAS:79-57-2,88%)(

确至相当于土霉素于容量瓶中加甲醇溶解并定容混匀以

0.01mg),10mg,10mL,(4.2.3),。-18℃

下保存有效期为个月

,1。

4213标准工作溶液准确移取标准储备溶液置容量瓶中用甲

..(10μg/mL):1mL(4.2.12),100mL,

醇稀释定容混匀临用现配

、、。。

4214标准系列溶液准确移取适量标准工作溶液用甲醇溶液稀释配制成

..Ⅰ:(4.2.13),20%(4.2.10)

质量浓度分别为和的标准

20ng/mL、40ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、1000ng/mL2000ng/mL

系列溶液临用现配

,。

4215标准系列溶液准确移取适量标准工作溶液用甲醇溶液稀释配制成

..Ⅱ:(4.2.13),20%(4.2.10)

质量浓度分别为和的标准系列溶液

1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、50ng/mL100ng/mL,

临用现配

。

4216亲水亲脂平衡固相萃取柱或性能相当者

..:60mg/3mL,。

4217微孔滤膜尼龙

..:,0.22μm。

43仪器设备

.

431液相色谱串联质谱仪配电喷雾离子源

..-:。

432电子天平精度和

..:0.01g0.01mg。

433涡旋混合器

..。

434涡旋振荡器

..。

435超声波清洗器

..。

436离心机转速不低于

..:10000r/min。

437固相萃取装置

..。

438氮吹仪

..。

44样品

.

按制备试样至少粉碎使其全部通过孔径的试验筛充分混匀装入

GB/T20195,200g,0.425mm,,

密闭容器中备用选取类型相同均匀一致且在待测物保留时间处仪器响应值小于方法定量限

,。,、,

的饲料样品作为空白样品

30%,。

45试验步骤

.

451配合饲料浓缩饲料精料补充料和饲料原料

..、、

平行做两份试验称取精确至试样于离心管中准确加入盐酸甲醇溶

。5g(0.01g)50mL,25mL

液涡旋混匀振荡提取离心准确移取上清液至另一离心

(4.2.5),,10min,10000r/min5min,0.2mL

管中准确加水涡旋混匀离心取上清液过微孔滤膜待测

,0.8mL,,10000r/min5min,(4.2.17),。

452添加剂预混合饲料和混合型饲料添加剂

..

4521提取

...

平行做两份试验称取精确至试样于离心管中加入缓冲溶液

。2g(0.01g)50mL,20mLⅠ(4.2.8),

2

GB/T22259—2025

涡旋混匀振荡提取超声提取离心取上清液至另一离心管中

,10min,10min,10000r/min10min,。

残渣分别用和缓冲溶液