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T/CQAAS 006-2023 花椒品种分子身份证构建方法

T/CQAAS 006-2023 The method for constructing the molecular identity of pepper varieties

团体标准 中文(简体) 现行 页数：6页 | 格式：PDF

基本信息

标准号
T/CQAAS 006-2023
标准类型
团体标准
标准状态
现行
中国标准分类号（CCS）
-
国际标准分类号（ICS）
01.020 术语学(原则和协调配合)
发布日期
2023-12-07
实施日期
2024-01-01
发布单位/组织
-
归口单位
重庆市农学会
适用范围
主要技术内容:3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1标准样品经权威机构认定认证的代表已知品种特征特性的样品，本标准中为农作物种子，即农作物的种植材料或者繁殖材料，包括籽粒、果实和根、茎、苗、芽、叶等。3.2分子标记指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异的特异性 DNA 片段。3.3SSR 标记是一类由几个核苷酸（一般为 1～6 个）为重复单位组成的长达几十个核苷酸的串联重复序列，由于基本单元重复次数的不同，形成了 SSR 长度的多态性。3.4DNA 指纹具有完全个体特异的DNA多态性，本标准中指 SSR 等分子标记扩增的多态性。3.5品种身份证指反映品种的商品属性和 DNA 指纹信息的数字和（或）字母组合。4方法4.1DNA提取采用改良的CTAB法提取花椒新鲜叶片的DNA，具体包括以下步骤：(1)在65℃水浴中预热提前配置好的2×CTAB提取缓冲液，0 .1MTris-HCl、0.02M EDTA、 1 .4M NaCl、2％PVP、2％CTAB；(2)在液氮中研磨石榴叶片至粉末状，转至2.0mL离心管中；(3)迅速加入2×CTAB提取缓冲液1 .0mL，10μlβ-巯基乙醇，混匀，65℃水浴60min，隔10- 15min颠倒摇匀一次；(4)常温下12000rpm离心5min，吸上清转移至新的2.0mL离心管中；(5)加入等体积的氯仿/异戊醇，充分混匀5min，放置5min，12000rpm常温离心10min；(6)吸上清到新的2.0mL离心管中，用氯仿/异戊醇重复抽提一次；(7)离心，吸上清到新的离心管中，加入等体积的异丙醇混匀，-20℃放置2h，沉淀DNA；(8)10000rpm常温离心10min；(9)倒掉异丙醇，用500μL乙醇洗沉淀两次，吹干后用100μLTE溶解DNA；(10)加入10mg/mlRNaseA 2μL终浓度200ng/ul混匀，37℃保温2h以上；(11)加入500μLTE，再加入等体积的氯仿/异戊醇，轻轻颠倒摇匀2min；(12)12000rpm常温离心10min；(13)吸上清到新的离心管中，加入等体积的异丙醇混匀，-20℃放置2h，沉淀DNA；(14)12000rpm常温离心10min；(15)倒掉异丙醇，用500μL乙醇清洗沉淀两次，吹干后用50μLTE溶解DNA；4℃冰箱中保存。(16)使用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测D

发布历史

文前页预览

T/CQAAS 006-2023 花椒品种分子身份证构建方法-第1页

研制信息

起草单位：
重庆市农业科学院果树研究所、重庆市江津区农产品质量安全中心、重庆市江津区花椒产业协会、重庆市江津区花椒加工业协会、重庆市江津先锋花椒城有限公司、重庆蓓廷农业科技有限公司
起草人：
张义刚、程玥啨、谢永红、曾维友、范烨、苏家奎、池浩、周於强、童建川、陈秀强、赵海忠、杨仕春、刘瑜涵、李剑
出版信息：
页数：6页 | 字数：- | 开本： -

内容描述

T/CQAAS

团体标准

T/006-2023

花椒品种分子身份证构建方法

2023-12-07发布2024-01-01实施

重庆市农学会发布

T/CQAAS

目次

前言.............................................................................II

1范围................................................................................3

2规范性引用文件......................................................................3

3术语和定义..........................................................................3

3.1标准样品StandardSample..........................................................3

3.2分子标记MolecularMarker.........................................................3

3.3SSR标记SimpleSequenceRepeatMarker..............................................3

3.4DNA指纹DNAFingerprint.........................................................3

3.5品种身份证VarietiesID............................................................3

4方法................................................................................3

4.1DNA提取........................................................................3

4.2花椒叶片的转录组分析.............................................................4

4.3分子标记引物的设计...............................................................4

4.4SRAP标记扩增....................................................................4

4.5电泳检测......................................................................

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