GB 23748-2016 食品安全国家标准 辐照食品鉴定 筛选法

中华人民共和国国家标准

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GB237482016

食品安全国家标准

辐照食品鉴定筛选法

2016-12-23发布2017-06-23实施

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

发布

国家食品药品监督管理总局

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GB237482016

前言

本标准代替/—《辐照食品的鉴定彗星试验法筛选法》、/—

GBT237482009DNANYT2214

《》/—《:

辐照食品鉴定光释光法和出口辐照食品的鉴别方法第部分单细胞

2012SNT2910.220112

凝胶电泳法》。

/—,:

本标准与GBT237482009相比主要变化如下

———“”;

标准名称修改为食品安全国家标准辐照食品鉴定筛选法

———:;

增加了两种筛选方法光释光法和微生物学筛选法

———增加了DNA彗星试验法的限制性说明。

Ⅰ

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GB237482016

食品安全国家标准

辐照食品鉴定筛选法

1范围

:、

本标准规定了三种快速筛选食品是否接受过辐照的鉴定方法光释光法DNA彗星试验法和微生

物学筛选法。

、;

本标准中的光释光法适用于甲壳类香辛料和调味品类产品的辐照鉴定DNA彗星试验法适用于

、、、;

动物产品谷物坚果果蔬的辐照鉴定微生物学筛选法适用于冷冻畜禽肉和水产品等各类生鲜食品的

辐照鉴定。

第一法光释光法

2术语和定义

光释光(,)

2.1photostimulatedluminescencePSL

,。

富含硅酸盐类样品俘获的辐射能量经一定波长的光激发后以光的形式释放出来的现象

强度()

2.2PSLPSLintensit

y

,。

样品经光激发后检测到的发光量以光子计数率表示

筛查()

2.3PSLscreeninPSL

g

样品初次测量的PSL强度。

校正()

2.4PSLcalibratedPSL

,。

筛查PSL测量之后同一样品用已知剂量辐照后测量的PSL强度

阈值()

2.5thresholds

,,()()。

在筛查模式下用于判定样品辐照与否的PSL强度包括一个低阈值T1和一个高阈值T2

阴性()

2.6PSLneativePSLresult

g

PSL测量强度低于低阈值。

可疑()

2.7PSLintermediatePSLresult

PSL测量强度在低阈值和高阈值之间。

阳性()

2.8PSLositivePSLresult

p

PSL测量强度高于高阈值。

1

—

GB237482016

空白对照()

2.9darkcount

,。

无光刺激时对空样品容器获得的光子计数率

阳性对照()

2.10lihtcount

g

(14)。

将参考光源比如装有的闪烁体或者等效物置于样品容器中得到的光子计数率

C

3原理

。,

富含硅酸盐类物质的样品能够储存射线能量通过一定波长的光再次激发照射样品中储存的能

,。,

量可以释放产生光释放光信号利用光释放光检测仪测试光信号的强度比较不同光信号强度的大

,。

小判定样品是否经过辐照

4仪器和设备

:、、。

4.1光释光测量系统包括样品容器光激发源脉冲刺激仪和同步光子计数系统

:。

4.2测量盘直径5cm

:/。

电离辐射源对电离辐射源的使用和管理按和的规定

4.3GB17568GBT25306

5分析步骤

:。。

注样品在测量前避光放置测量时使用一次性测量盘

5.1香辛料和调味品的样品制备

,,。,

准备双份样品均匀铺在测量盘底部分别检测如果两次检测结果与判定阈值相比不一致则将

,,。

样品等分后重新进行检测取其中最高的两个检测值作为结果进行判定依此类推

4

5.2甲壳类动物的样品制备

,。,

将带壳或去壳样品放入测量盘中样品中带有动物肠子时有利于光释光信号的检测如个体较大

;()。

可对样品切割也可取肠子不少于根放入测量盘中进行测量

6

5.3仪器设置

设定辐照食品筛查系统的个体测量参数。

检查空白对照和阳性对照。

:,,。

注应当定期或者当测量出现阳性结果后对容器进行空样品检测检查仪器是否受到污染

5.4样品测定

5.4.1筛查测量

进行样品检测并记录结果。

5.4.2校正测量

,。(

筛查测量后的样品加盖保存防止样品损失或污染对这些样品再辐照特定剂量香辛料和贝类食

),(),。

物辐照1kGy辐照后室温甲壳类动物和其他易腐烂样品应冷藏避光保存12h进行校正测量

2

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GB237482016

6分析结果表述

6.1阈值设定

香料和调味品的阈值设定为:/,/。

T=700countsminT=5000countsmin

12

甲壳类动物的阈值设定为:/,/。

T=1000countsminT=4000countsmin

12

6.2结果判断

,、、,。

根据与阈值的比较样品测量结果可分为阴性可疑阳性三种情况分别进行判定

6.2.1阴性结果

6.2.1.1筛查PSL

,。

筛查PSL为阴性结果时可判定样品未经辐照

6.2.1.2校正PSL

,。

校正PSL和筛查PSL同为阴性时该样品不能被判定为辐照食品若要进一步确认样品是否接

,。

受过辐照应采用辐照食品鉴定的其他确证方法

,,,。

校正PSL为阴性但筛查PSL为阳性时表明测量系统有错误应当取新鲜的原始样品重新测量

6.2.2可疑结果

6.2.2.1筛查PSL

,。

筛查PSL为可疑结果时不能直接判定样品是否接受过辐照

6.2.2.2校正PSL

,。

校正PSL和筛查PSL同为可疑结果时判定样品接受过辐照

,,。

校正PSL为可疑结果筛查PSL为阴性结果时表明样品可能是低敏感性未辐照食品若要进一

,。

步确认样品是否接受过辐照应采用辐照食品鉴定的其他确证方法

,,。

校正PSL为可疑结果筛查PSL为高数值阳性结果时表明测量有误

,,

校正为可疑结果筛查为接近的阳性结果时表明样品可能接受过高于校正剂量的辐

PSLPSLT2

。。

照应当重新测量样品进行判定

6.2.3阳性结果

6.2.3.1筛查PSL

,。

筛查PSL为阳性结果时可判定样品接受过辐照

6.2.3.2校正PSL

,。

校正PSL和筛查PSL为同级别的阳性结果时判定样品接受过辐照

,,。

校正PSL为阳性结果且远高于阴性或可疑结果的筛查PSL时表明样品可能未经辐照

,(),

校正和筛查为阳性结果但校正小于筛查时相差到个数量级表明测量

PSLPSLPSLPSL12

,。

有误需要重新进行测量

3

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GB237482016

第二法DNA彗星试验法

7原理

。,,

DNA分子经过辐照后会发生断裂将细胞包埋在琼脂中用裂解试剂溶解细胞膜然后在一定的

。,。,

电压下进行电泳受损的DNA片段在电场中向阳极方向快速移动形成尾状分布染色后DNA受

,。

损的细胞就会出现彗星状电泳图谱未受辐射的细胞图谱接近圆形或者轻微拖尾

8试剂

,,/。

除非另有说明本方法所用试剂均为分析纯水为GBT6682规定的三级水

二甲基亚砜(,)。

8.1DMSOCHOS

26

氯化钠()。

8.2NaCl

氯化钾()。

8.3KCl

磷酸氢二钠(·)。

8.4NaHPO12HO

242

磷酸二氢钾()。

8.5KHPO

24

乙二胺四乙酸二钠(,·)。

8.6NaEDTACHNONa2HO

210142822

氢氧化钠()。

8.7NaOH

三羟甲基氨基甲烷(,)。

8.8TrisCHNO

4113

8.9硼酸(HBO)。

33

十二烷基磺酸钠(,)。

8.10SDSCHONaS

12254

吖啶橙(··)。

8.11CHNHClZnCl

171932

溴化乙锭()。

8.12CHBrN

21203

三氯乙酸(,)。

8.13TCACHClO

232

硫酸锌()。

8.14ZnSO4

甘油()。

8.15CHO

383

碳酸钠()。

8.16NaCO

23

硝酸铵()。

8.17NHNO

43

硝酸银()。

8.18ANO

g3

钨硅酸([()]·)。

8.19HSiWOxHO

431042

甲醛()。

8.20CHO

2

冰乙酸()。

8.21CHCOOH

3

磺化吡啶()。

8.22CHONS

101242

8.23琼脂糖。

8.24低熔点琼脂糖。

9试剂配制

试验中所用的试剂配制见附录A。

4

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GB237482016

10仪器和设备

10.1水平电泳槽。

:。

10.2电子天平感量为0.1g

10.3电加热磁力搅拌器。

10.4微波炉。

:、、。

10.5微孔滤膜孔径100m200m500m

μμμ

:,。

10.6显微镜载玻片76mm×26mm带磨砂边

:;,;

荧光显微镜倍倍蓝色激发波长用于吖啶橙染色观察绿色激发波

10.7100~400460nm~485nm

,。

长515nm~560nm用于磺化吡啶或溴化乙锭染色观察

11分析步骤

11.1样品制备

11.1.1动物组织

11.1.1.1骨髓样品制备

,,。,

切开骨头称取约50mg骨髓置于试管中加入3mL冰预冷的PBS缓冲液用玻璃棒搅拌将细

,,,(

胞悬起用100m的微孔滤膜过滤细胞悬液收集滤液并将滤液置于冰盒上备用细胞悬液可置于冰

μ

,;