YC/T 408-2011 烟用添加剂中正二氢愈疮酸的测定 高效液相色谱法

ICS

65．160

X85

备案号：33253--2011Y口

中华人民共禾口国烟草行业标准

408—2011

YC／T

烟用添加剂中正二氢愈疮酸的测定

高效液相色谱法

Determinationofacidintobaccoadditives--

nordihydroguaiaretic

Highperformancemethod

liquid、chromatographic

2011-08-02发布

国家烟草专卖局发布

408—2011

YC／T

前言

本标准按照GB／T1．1—2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由国家烟草专卖局提出。

本标准由全国烟草标准化技术委员会烟用材料分技术委员会SAC／TC144／SC8归口。

本标准起草单位：云南烟草科学研究院、红塔烟草集团有限责任公司、红云红河烟草集团有限

责任公司。

本标准主要起草人：陈永宽、张承明、缪明明、者为、王璐、盂昭宇、刘巍、段焰青、杨光宇、朱丽、

谭建林。

YC／T408—2011

烟用添加剂中正二氢愈疮酸的测定

高效液相色谱法

1范围

本标准规定了烟用添加剂香精和料液中正二氢愈疮酸的测定方法——高效液相色谱法。

本标准适用于烟用添加剂香精和料液中正二氢愈疮酸的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本包括所有的修改单适用于本文件。

GB／T6682分析实验室用水规格和试验方法

YC／T146．102003烟用香精抽样

3原理

采用含0．1％甲酸的甲醇一水混合溶剂萃取烟用添加剂中的正二氢愈疮酸，经高效液相色谱仪分

离，以荧光检测器测定，外标法定量。

4试剂与材料

除特殊要求外，均使用分析纯试剂。

4．1水，符合GB／T6682中一级水的要求。

4．2乙腈，CH。CN，色谱纯。

4．3甲醇，CH，0H。

4．4甲酸，HC00H。

4．5正二氢愈疮酸，C18Hz：OtCAS：500—38—9，纯度≥97％。

4．6抗坏血酸，C。H。O。CAS：5081—7。

4．7甲醇一水混合溶剂，体积比9：1。

000

4．8萃取溶剂：称1．0mL容量瓶中，定

g抗坏血酸4．6用甲醇一水混合试剂4．7溶解转移至l

容至刻度。

4．9标准溶液

4．9．1一级标准储备液

称取50mg精确至0．1

mg正二氢愈疮酸4．5，用萃取溶剂4．8溶解转移至100mL容量瓶中，

定容至刻度。一级标准储备液在一20℃下避光保存，有效期1个月。

1

408—2011

Yc／T

4．9．2二级标准储备液

移取5mL一级标准储备溶液4．9．1至50

mI。容量瓶中，用萃取溶剂4．8定容至刻度。二级标

准储备液在-20℃条件下避光保存，有效期1个月。

4．9．3标准工作溶液

000000

分别准确移取lOO／zL、300／IL、500pL、1000／LL、2pL、4pL二级标准储备液4．9．2至

50mL容量瓶中，用萃取溶剂4．8定容到刻度，得到系列标准工作溶液。即配即用。

5仪器设备

常用实验仪器及下述各项：

5．1高效液相色谱仪，配置柱温箱、梯度洗脱功能和荧光检测器。

5．2分析天平，感量0．1mg。

5．3振荡器，最大转速应不小于200r／min。

000

5．4离心机，最大转速应不小于8r／min。

5．5有机相滤膜，0．45p-m。

6抽样

按照YC／T145．10一2003抽取样品。

7分析步骤

7．1样品处理

称取2mg试样于100mL具塞锥形瓶中。准确加入50mL萃取溶剂4．8，用

g精确到0．1

150000

r／rain振荡萃取10min，取3mL萃取液置于10mL具塞离心试管中，在5r／min转速条件下离

心10

rain，取1mL上清液过有机相滤膜5．5，滤液用高效液相色谱仪分析。

若待测试样溶液的浓度超出标准工作曲线浓度范围，则对样品前处理适当调整后重新测定。

7．2高效液相色谱条件

高效液相色谱条件：以下分析条件可供参考，采用其他条件应验证其适用性。

mm长度×4．6ram内径；

——c18色谱柱，规格：填料粒径3．0／zm，150

——流动相A：0．1％的甲酸乙腈溶液体积分数；

——流动相B：0．1％的甲酸水溶液体积分数；

——柱温：40℃

——流速：1．0mL／min；

——进样体积：10

gL；

——梯度洗脱程序见表1；

nm。

——荧光检测器检测波长：A。；激发波长为280nm，A。。发射波长为306

408—2011

YC／T

表1梯度洗脱程序

时间流动相A流动相B

mln％％

o．oo3565

5．oo3565

20．004060

21oo90lO

300090lo

31．oo3565

41．003565

7．3标准工作曲线制作

按照色谱条件7．2测定标准工作溶液4．9．3，以正二氢愈疮酸浓度与响应峰面积绘制标准工作

曲线，工作曲线线性相关系数R2≥o．999。

标准工作溶液色谱图参见附录A中的图A．1。

每20次进样后加入一个中等浓度的标准工作溶液进行测定，如果测得的值与原值的相对偏差超过

5％，则应重新进行标准工作曲线的制作。

7．4样品测定

按照色谱条件7．2测定试样7．1，每个样品平行测定两次。

典型样品色谱图示例参见附录A中的图A．2。

8结果的计算与表述

样品中正二氢愈疮酸含量由式1计算计算结果应扣除空白值

X

fH

式中

x——样品中正二氢愈疮酸含量，单位为毫克每千克mg／kg；

C——标准工作曲线计算所得正二氢愈疮酸的浓度，单位为微克每毫升pg／mL；

“——标准工作曲线计算所得空白样品中正二氢愈疮酸的浓度，单位为微克每毫升p．g／mL

v——试样萃取液定容体积，单位为毫升mL；

m——试样质量，单位为克g。

取两次平行测定结果的算术平均值作为样品测定结果，精确至o．Ol

mg／kg。

两次平行测定结果的相对平均偏差应不大于10％。

9回收率、检出限和定量限

本方法的回收率、检出限、定量限结果见表2。

1

YC／T408—201

表2方法的回收率、检出限和定量限结果

回收率检出限定量限

化合物

％mg／kgmg／kg

正二氢愈疮酸9550～101．270．140．45

10试验报告

试验报告应说明：

——识别被测样品需要的所有信息；

——参照本标准所使用的试验方法；

——测定结果，包括各单次测定结果及其平均值

——与本标准规定的分析步骤的差异；

——在测定中观察到的异常现象；

——试验日期

——试验人员。

YC／T408—2011

附录A

资料性附录

色谱图示例

A．1标准工作溶液色谱图

标准工作溶液色谱图如图A．1所示。

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图A．1标准工作溶液色谱图

A．2典型样品色谱图

典型样品色谱图如图A．2所示。

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：罢

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∽

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68101214

图A．2典型样品色谱图