GB/T 23208-2008 河豚鱼、鳗鱼和对虾中450种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

ICS67．050

X04

囝囤

中华人民共和国国家标准

GB／T

河豚鱼、鳗鱼和对虾中450种农药及

相关化学品残留量的测定

液相色谱一串联质谱法

Determinationof450andrelatedchemicalsresidues

pesticides

inandmethod

fugu，eelprawn—LC-MS—MS

2009—05-0

2008—12-31发布1实施

丰瞀鹊鬻瓣訾辫瞥星发布中国国家标准化管理委员会促1”

GB／T

目次

前言………………一

1范围…·………．．

2规范性引用文件

3原理……………．

4试剂和材料……．

5仪器……………Ⅲ●●，，2

6试样制备与保存一2

7测定步骤………．2

8结果计算……····5

9精密度…………．5

附录A(资料性附录)

450种农药及相关化学品中、英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合

标准溶液浓度·…6

附录B(资料性附录)450种农药及相关化学品监测离子对、碰撞气能量、源内碎裂电压和保留

时间…………··

附录C(资料性附录)……………．

450种农药及相关化学品多反应监测(MRM)色谱图

附录D(资料性附录)

450种农药及相关化学品精密度数据表…………．

附录E(资料性附录)450种农药及相关化学品英文中文名称对照索引(按英文字母顺序)加％船船

GB／T

刖罱

本标准的附录A、附录B、附录C、附录D、附录E为资料性附录。

本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局、山东农业大学。

本标准主要起草人：庞国芳、郑锋、范春林、李岩、王明林。

Ⅲ

GB／T

河豚鱼、鳗鱼和对虾中450种农药及

相关化学品残留量的测定

液相色谱一串联质谱法

1范围

本标准规定了河豚鱼、鳗鱼和对虾中450种农药及相关化学品(参见附录A和附录E)残留量液相

色谱串联质谱测定方法。

本标准适用于河豚鱼、鳗鱼和对虾中450种农药及相关化学品的定性鉴别，也适用于其中380种农

药及相关化学品的定量测定。

95mg／kg(参见附

本标准定量测定的380种农药及相关化学品方法检出限为0．02pg／kg～0．1

录A)。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件。其最新版本适用于本标准。

GB／T6379．1测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第l部分：总则与定义

6379．12004，ISO5725—1：1994，IDT)

(GB／T

GB／T6379．2测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第2部分：确定标准测量方法重复

性与再现性的基本方法(GB／T6379．2--2004，Is()57252：1994，IDT)

GB／T66822008，1S03696：1987，MOD)

6682分析实验室用水规格和试验方法(GB／T

GB／T9695．193100l：1984)

9695．19肉与肉制品取样方法(GB／T1988，neqISO／DIS

3原理

试样用环己烷+乙酸乙酯(1+1)均质提取，凝胶渗透色谱净化，液相色谱串联质谱仪测定，外标法

定量。

4试剂和材料

6682规定的一级水。

水为GB／T

4．1乙腈：色谱纯。

4．2环己烷：色谱纯。

4．3乙酸乙酯：色谱纯。

4．4甲酸：优级纯。

4．5乙酸胺：优级纯。

4．6甲醇：优级纯。

4．7甲苯：优级纯。

4．8丙酮：优级纯。

4．9无水乙酸钠：分析纯。

3mm×0．45

4．10微孑L过滤膜(尼龙)：13133Ill×0．2弘m，1gm。

1

23208--2008

GB／T

4．11无水硫酸钠：分析纯。用前在650℃灼烧4h。贮于干燥器中，冷却后备用。

4．120．1％甲酸溶液(体积分数)。

000

4．135mmol／L乙酸铵溶液：称取0．375mL。

g乙酸铵，加水稀释至1

4．14农药及相关化学品标准物质：纯度≥95％。

4．15环己烷+乙酸乙酯混合溶剂：1+l(体积比)。

4．16农药及相关化学品标准溶液

4．16．1标准储备溶液

准确称取5mL容量瓶中，

mg～10mg(精确至0．1mg)农药及相关化学品各标准物质分别放入10

根据标准物质的溶解度选甲醇、甲苯、丙酮、乙腈等溶解并定容至刻度(溶剂选择参见附录A)。标准储

备溶液避光4℃保存，可使用一年。

4．16．2混合标准溶液

并根据每种农药及相关化学品在仪器上的响应灵敏度，确定其在混合标准溶液中的浓度。本标准对

450种农药及相关化学品的分组及其混合标准溶液浓度参见附录A。

依据每种农药及相关化学品的分组、混合标准溶液浓度及其标准储备液的浓度，移取一定量的单个

农药及相关化学品标准储备溶液于】00mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。混合标准溶液避光4℃保

存．可使用一个月。

4．16．3基质混合标准工作溶液

农药及相关化学品基质混合标准工作溶液是用样品空白溶液配成不同浓度的基质混合标准工作溶

液A、B、c、D、E、F、G，用于做标准工作曲线。

基质混合标准工作溶液应现用现配。

5仪器

5．1液相色谱串联质谱仪：配有电喷雾离子源。

HIIll×25BeadsS

5．2凝胶渗透色谱仪：配有360film，内装BIOX3填料的净化柱或相当者。

5．3分析天平：感量0．1mg和0．01g。

5．4旋转蒸发器。

000

5．5均质器：最大转速为24r／min。

200

5．6离心机：最大转速为4r／min。

mI．。

5．7鸡心瓶：200

5．8移液器：1m1．。

5．9氮气吹干仪。

6试样制备与保存

6．1试样的制备

9695．1

按GB／T9抽取的样品用绞肉机绞碎，充分混匀，用四分法缩分至不少于500g．作为试样

装入清洁容器内，密封后，标明标记。

6．2试样的保存

将试样于18℃冷冻保存。

7测定步骤

7．1提取

称取10

g试样(精确至0．01g)，放人盛有20

2

GB／T

5000800

rain，在3r／rain离心3rain。

乙酸乙酯(1+1)混合溶剂。用均质器在1r／rain均质提取1．5

上清液通过装有无水硫酸钠的筒形漏斗，收集于100mI。鸡心瓶中，残渣用35mL环己烷+乙酸乙酯

(1+1)混合溶剂重复提取一次，经离心过滤后，合并两次提取液，将提取液于40℃水浴用旋转蒸发器旋

转蒸发至约5mI。

mL，待净化。若以脂肪计，将提取液收集于已称重的鸡心瓶中，40℃旋转蒸发至约5

后，然后再用氮气吹于仪吹于残存的溶剂，称重鸡心瓶，记下脂肪质量，待净化。

7．2凝胶渗透色谱净化

7．2．1条件

mm×25

a)净化柱：360mm，内装BIO—BeadsS-X3填料或相当者；

b)检测波长：254nm；

c)流动相：乙酸乙酯+环己烷(1+l，体积比)；

d)流速：4．7mL／min；

e)进样量：5mL；

f)开始收集时间：26rain；

min。

g)结束收集时问：44

7．2．2净化

将浓缩的提取液或脂肪用乙酸乙酯+环己烷混合溶剂(1+1)溶解转移至10mL容量瓶中，用约

5mI，环己烷+乙酸乙酯混合溶剂分两次洗涤鸡心瓶，并转移至上述10mL容量瓶中，再用环己烷+乙

酸乙酯混合溶剂定容至刻度，摇匀。样液通过0．45pm滤膜过滤人10mL试管中，用凝胶渗透色谱仪

min～44mL

净化，收集26rain的馏分，在40℃水浴中旋转浓缩至约0．5mL，于35℃下氮气吹干，1

乙腈+水(3+2)溶解残渣，0．2pm微孔滤膜过滤后供液相色谱一串联质谱分析。

同时取不含农药及相关化学品的河豚鱼、鳗鱼和对虾样品，按7．1和7．2步骤制备样品空白提取

液，用于配制基质混合标准工作溶液。

7．3液相色谱一串联质谱测定

7．3．1条件

7．3．1．1A、B、c、D、E、F组液相色谱串联质谱仪器条件

a)色谱柱：ZORBAXSB-C…3．5pm，100mm×2．1ram(内径)或相当者；

b)流动相及梯度洗脱条件见表1；

表1流动相及梯度洗脱条件

时间／rain流速／(pL／min)流动相A(O．1％甲酸水)／％流动相B(乙腈)／％

0．0040099．010

30040070030．0

600400600400

90040060．040．0

150040040．0600

19004001．099．0

23．004001099．0

230l400990l0

c)柱温：40℃；

d)进样量：10肛L；

e)电离源模式：电喷雾离子化

f)电离源极性：正模式；

GB／T23208--2008

g)雾化气：氮气；

h)雾化气压力：0．28MPa；

i)离子喷雾电压：4000V：

j)干燥气温度：350℃；

k)干燥气流速：10L／rain；

1)监测离子对、碰撞气能量和源内碎裂电压参见附录B。

7．3．1．2

G组液相色谱串联质谱仪器条件

a)色谱柱：ZORBAXSB—C18，3．5mm×2．1

pm．100ram(内径)或相当者

b)流动相及梯度洗脱条件见表2；

表2流动相及梯度洗脱条件

总时间／min流速／(pL／min)流动相A(5mmoI乙酸铵水)／％流动相B(乙腈)／％

0004009901．0

300400700300

6．0040060040．0

9．0040060O40．0

150040040．060．0

19．004001．0990

23．0040010990

230140099010

c)柱温：40℃；

d)进样量：10pI，；

e)电离源模式：电喷雾离子化；

f)电离源极性：负模式；

g)雾化气：氮气；

h)雾化气压力：0．28MPa；

000

i)离子喷雾电压：4V；

j)干燥气温度：350℃；

k)于燥气流速：10L／min；

1)监测离子对、碰撞气能量和源内碎裂电压参见附录B。

7．3．2定性测定

在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致．并且在扣除

背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现．而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比相一

学品。

7．3．3定量测定

本标准中液相色谱一串联质谱采用外标一校准曲线法定量测定。为减少基质对定量测定的影响，定

量用标准溶液应采用基质混合标准工作溶液绘制标准曲线。并且保证所测样品中农药及相关化学品的

响应值均在仪器的线性范围内。450种农药及相关化学品多反应监测(MRM)色谱图参见附录c。

7．4平行试验

按以上步骤对同一试样进行平行试验。

d

GB／T

7．5空白试验

除不称取试样外，均按上述步骤进行。

8结果计算

液相色谱一串联质谱测定采用标准曲线法定量，标准曲线法定量结果按式(1)计算：

x，一×鲁×揣………………㈩

式中：

x。——斌样中被测组分残留量，单位为毫克每升(rag／L)；

C。——从标准曲线上得到的被测组分溶液浓度，单位为微克每毫升(vg／mL)；·

V。——～样品溶液定容体积，单位为毫升(mL)；

m——样品溶液所代表试样的质量，单位为克(g)。

计算结果应扣除空白值。

9精密度

6379．1和GB／T

本标准精密度数据是按照GB／T6379．2的规定确定的．获得重复性和再现性的

值是以95％的可信度来计算。本标准方法的精密度数据参见附录D。

23208--2008

GB／T

附录A

(资料性附录)

450种农药及相关化学品中、英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度

450种农药及相关化学品中、英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度见表A．1。

表A．1450种农药及相关化学品中、英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度

检出限／混合标准溶液

序号中文名称英文名称溶剂

(pg／kg)浓度／(mg／[。)

A组

l苯胺灵propham4400甲苯11．00

2异丙威0．92甲醇023

33，4，5混杀威trimethacarb0．14003

3，4，5甲醇

4环莠隆008甲醇0．02

5甲萘威carbaryl4．13甲醇1．03

6毒草胺propachlor0．L1甲醇0．03

7吡咪唑rabenzazo[e0．53甲醇0．13

8西草净0．05甲醇0．01

9绿谷隆142甲醇036

10速灭磷063甲苯016

il叠氮津azlProtryne055甲醇014

12密草通003甲醇001

】3嘧菌磺胺cyprodinil030甲醇0．07

14播土隆3j8甲醇0．90

15双酰草胺carbetamide146甲醇036

16抗蚜威006甲醇002

17异呼草松017甲醇004

18氰草津007甲醇0．02

19扑草净007甲醇002

20甲基对氧磷paraoxonITleIhy[031甲醇0．08

2l4，4’一二氯二苯甲酮84．4dlchlorobenzonhenone544甲醇1．36

22噻虫啉t}dacloprid015甲醇004

23吡虫啉lmidacloprid8．80甲醇220

24磺噻隆ethidimuron060甲醇0．15

25T‘嗪草酮043甲醇0ll

26燕麦敌diallate3568甲醇892

27乙草胺acemchkjr1896甲醇-174

28烯啶虫胺。niIenPyrain685甲醇171

GB／T

表A．1(续)

检出限／混合标准溶液

序号中文名称英文名称溶剂

(pg／kg)浓度／(rag／L)

29盖草津。melhoprotryn．e010甲醇002

30二甲酚草胺dimethenamid1．72甲醇043

31特草灵terrbuearb084甲醇0．21

32戊菌唑0．80甲醇0．20

33腈菌唑myclobutanil0．40甲醇010

34咪唑乙烟酸imazethapyr0．45甲醇011

35多效唑paclobutraz010．23甲醇006

36倍硫磷亚砜{enthionsulfoxide0．13甲醇0．03

37三唑醇triadimen014．22甲醇106

38仲丁灵butralin0．76甲醇0．19

39螺啄茂胺0．02甲醇0．01

40mIelo{os26．62甲醇666

甲基立枯磷methyl

4I甜菜胺desmedipham16l甲醇040

42杀扑磷methidathioa4．26甲醇L07

43烯丙菊酯allethrin2416甲醇604

44二嗪磷0．29甲蓉0．07

——

45敌瘟磷edifenphos030甲醇008

46丙草胺Dretllachlor013甲醇003

47氟硅唑flusilazole023甲醇0．06

——

48丙森锌iprovalicarb0．93甲醇0．23

49麦锈灵benodaniI10‘)甲醇0．35

50氟酰胺flulolanil046甲醇O12

5lrl44036

氨磺磷farnphu甲醇

52苯霜灵benalyxyl050甲醇012

53苄氯三唑醇diclobutrazole0．19甲醇0．05

54乙环唑071甲醇0．18

55氯苯嘧啶醇fenarimol024甲醇006

56ester080甲醇020

酞酸二环己基酯phthalicacid，dicyclobexyl

57胺菊酯073甲醇018

58抑菌灵8dlchlofluanldl04甲苯026

j9解草酯cloquintocetmexyl0．75甲醇019

60联苯三唑醇bltertanol13．36甲醇334

——

6l甲基毒死蜱chlmprifos640甲醇l60

methyl

62吡哺草酮lepraloxydim488甲醇l22

23208—2008

GB／T

表A．1(续)

检出限／混合标准溶液

序号中文名称英文名称溶剂

(pg／kg)浓度／(mg／I。)

63益棉磷azinphosethyl43．57甲醇10．89

64炔草酸8clodinafoppropargyl0．98甲醇0．24

65杀铃脲triflumuron157甲醇0．39

66异唾氟草isoxaflutole156甲醇0．39

67莎稗磷anilofos0．29甲醇0．07

68喹禾灵quizalofop—ethyl0．27甲醇007

69精氟吡甲禾灵haloxyfopmethyI106甲醇0．26

70bu011

精吡磺草隆fluazifopryl甲醇0．03

7l乙基溴硫磷6bromophos—ethyl908．3l甲醇5677

72地散磷bensulide13．68甲醇3．42

73醚苯磺隆triasulfuron064甲醇016

74溴苯烯磷bromfenvinfos12l甲醇030

75嘧菌酯018甲醇0．05

76吡菌磷pyrazoPhos065甲醇016

77氟虫脲flufenoxuron127甲醇032

78茚虫威1ndoxacarb3．02甲醇075

B组

79棉隆50．80甲醇1270

80烟碱088甲醇022

81非草隆0．41甲醇010

82灭蝇胺82．90甲醇0．72

83鼠立克0．62甲醇0．16

84乙酰甲胺磷534甲醇133

85禾草敌0．84甲醇02l

86多菌灵carbendazim0．19甲醇005

6-chloro一4‘hydroxy一3phenylpyr

876氯4羟基3一苯基哒嗪0．66甲酵0．17

Idazin

88残杀威Propoxur976甲醇244

89异唑隆O．16甲醇004

90绿麦隆chloroto【uron0．25甲醇006

9】久敛威1lhJofanox6280甲醇15．70

92氯草灵chlorbufam7320甲醇1830

93唾虫威bendiocarb1．27甲醇0．32

94扑灭津Propazine0．13甲醇003

95特丁津1erbuthylazine019甲醇0．05

8

GB／T

表A．1(续)

检出限／混合标准溶液

序号中文名称英文名称溶剂

7L)

(pg／kg)浓度／(mg

96敌草隆diuron0．62甲醇0l6

97氯甲硫磷chlormephos1792甲醇44．80

98萎锈灵0．22甲醇006

99sulfate1．30008

野燕枯difenzoquat—methyl甲醇

100噻虫胺clmhianidin2520甲醇6．30

101室草特6．15甲醇1．54

102二甲草胺dimelhachloro076甲醇0．19

103溴谷隆methohronluron6．74甲苯168

104甲拌磷4phorate12S．60甲醇31．40

105苯草醚acIonifen9．68甲醇2．42

106地安磷meDhosfolan093甲醇023

107脱苯甲基亚胺唑249甲醇062

imibenconazoledes—henzyl

108革不隆2．84甲醇07l

109精甲霜灵0．62甲醇015

110发硫磷0．98甲醇0．25

111乙氧呋草黄ethofumesate14880甲醇3720

112异稻瘟净iprobenfos33l甲醇083

113特普TEPP416甲醇1．04

114环丙唑醇cyproconaz010029甲醇007

115噻虫嗪th