DB50/T 1713-2024 人外周血淋巴细胞染色体畸变自动分析与剂量估算技术规范

ICS13.100

CCSC60

50

重庆市地方标准

DB50/T1713—2024

人外周血淋巴细胞染色体畸变自动分析与

剂量估算技术规范

2024-11-27发布2025-02-27实施

重庆市市场监督管理局发布

DB50/T1713—2024

目次

前言.................................................................................II

1范围................................................................................1

2规范性引用文件......................................................................1

3术语和定义..........................................................................1

4一般要求............................................................................2

5实验室..............................................................................2

6微量全血培养........................................................................3

7细胞收获............................................................................3

8自动化畸变分析......................................................................4

9结果评价............................................................................5

10自动化剂量效应曲线的建立...........................................................6

附录A（资料性）自动扫描分析显微镜设备配置...........................................8

附录B（资料性）仪器设备及技术要求...................................................9

附录C（资料性）染色体分组..........................................................10

附录D（资料性）染色体畸变类型和表示符号............................................11

附录E（资料性）染色体畸变量和表示方法..............................................12

附录F（资料性）染色体畸变检测原始记录..............................................13

附录G（资料性）染色体畸变检测报告单................................................14

附录H（资料性）染色体剂量估算验证示例..............................................15

I

DB50/T1713—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由重庆市疾病预防控制中心提出。

本文件由重庆市卫生健康委员会归口并组织实施。

本文件起草单位：重庆市疾病预防控制中心、重庆市卫生健康委员会。

本文件主要起草人：吴梦云、张华东、袁方、李炜、谭秀洪、胡彬、杜全洪、谢悦峰、杨涛。

II

DB50/T1713—2024

人外周血淋巴细胞染色体畸变自动分析与剂量估算技术规范

1范围

本文件规定了人外周血淋巴细胞染色体畸变自动分析与剂量估算的一般要求、实验室、微量全血培

养、细胞收获、自动化畸变分析、结果评价以及自动化剂量效应曲线的建立的要求。

本文件适用于放射工作人员染色体畸变检测和一次较均匀全身核与辐射事故剂量估算。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GBZ2.1—2019工作场所有害因素职业接触限值第1部分：化学有害因素

GBZ/T248—2014放射工作人员职业健康检查外周血淋巴细胞染色体畸变检测与评价

GB/T28236—2011染色体畸变估算生物剂量方法

3术语和定义

GBZ/T248—2014和GB/T28236—2011界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

自动化分析automatedanalysis

利用各种技术手段，通过自动检测、信息处理、分析判断、操纵控制，使机器、设备等按照预定的

规律自动运行，实现预期的目标，或生产过程、管理过程、设计过程等高效自动地完成。

放射工作人员radiationworker

在放射工作单位从事放射职业活动中受到电离辐射照射的人员。

细胞中期cellmetaphase

细胞从上一次分裂结束到下一次分裂终了的过程较细胞周期，由G1期、S期、G2期和M期组成。M期

一般分为前期、中期、后期和末期，处于中期的细胞为细胞中期。

染色体chromosome

细胞在有丝分裂或减数分裂过程中由染色质聚缩而成的棒状结构。

染色体核型chromosomekaryotype

将一个细胞内的染色体按照一定的顺序排列起来所构成的图像称为该细胞的核型。

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非稳定性染色体畸变unstabledchromosomeaberration

畸变在细胞内的存在转归，可分为非稳定性染色体畸变和稳定性染色体畸变。非稳定性畸变是因各

种原因在细胞分裂时可能被丢失的染色体畸变。如无着丝粒断片、微小体、无着丝粒环、双着丝粒和着

丝粒环等。

4一般要求

自动化分析仪器要求

4.1.1自动化分析仪器应该包含细胞中期扫描软件、染色体核型畸变分析软件和显微镜硬件。

4.1.2细胞中期扫描软件可自动在明场环境下查找中期细胞的染色体并定位。

4.1.3有自动涂油泵，涂油后高倍油镜可自动捕获已定位的细胞中期染色体图像。

4.1.4染色体核型畸变分析软件可自动识别染色体畸变，并记录坐标。

4.1.5端口可增加相应的子系统工作站。

4.1.6自动扫描分析显微镜基本配置详见附录A。

技术人员要求

4.2.1一般要求

实验室应有两名及以上专业技术人员，专业技术人员能熟练操作实验室各项设备，能制片、复核软

件分析结果以及镜下识别正常和异常中期细胞。

4.2.2人员岗前培训

相关技术人员上岗前接受专业的理论知识和技能培训，掌握电离辐射生物效应和细胞遗传学基础知

识，熟练掌握制片步骤和审核软件识别结果。技术人员应获得相关培训机构出具的培训证明。

4.2.3人员在岗培训

4.2.3.1实验室每年制定技术人员内部质量控制计划，按照计划表对技术人员进行至少一次染色体畸

变实验考核，并取得实验室人员能力确认资格。

4.2.3.2实验室组织技术人员每年参加一次国家或省级质控中心组织的染色体畸变能力考核，并需合

格。不合格者需进行专业培训，并取得培训证明。

5实验室

配置要求

5.1.1实验室拥有足够的空间，可供实验操作、分析数据、保存数据样本等。实验室仪器设备及技术

要求见附录B。

5.1.2细胞培养间应配置生物安全柜、恒温培养箱、-20℃冰箱、4℃冰箱、移液器等。

5.1.3人工细胞收获间应配置排风装置、水平离心机、移液器、纯水仪、水浴锅、灭菌锅，选配分析

天平、涡旋振荡器、吹风机等设备。

5.1.4显微镜室应配置染色体畸变自动化分析设备和普通光学正置显微镜。

5.1.5实验室宜选配负压移液装置或真空泵、自动接种仪、自动收获仪、自动滴片仪、自动染片机等。

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设备要求

5.2.1评估仪器设备是否符合本文件的性能和配置要求。

5.2.2实验室主要仪器和设备应建立档案，并有标准操作程序；有使用及维护保养记录。

5.2.3设备应定期检定或校准，实验室根据检定或校准结果出具验证报告，评估设备是否符合实验技

术要求。

5.2.4实验室人员定期检查及更新使用标准，完善操作程序，评估分析结果的长期一致性。

试剂要求

5.3.1应按参照GBZ/T248—2014附录C中C3.1～C3.7和C4.1～C4.6的规定和要求配制试剂。

5.3.2细胞培养基可购买商业成品，成品中宜提前添加秋水仙素或秋水酰胺。更换试剂厂商和批次，

须进行验收实验，并保存实验记录。能培养出足够分析数量的培养基批次方可正式使用。

5.3.3低渗液配制可取50mL浓度为3mol/L的氯化钾饱和液加蒸馏水稀释成2L，常温保存备用。溶

液内出现结晶后不可再使用。

5.3.4染液可购买成品试剂，并按说明书要求配置和使用。试剂在有效期内使用。

6微量全血培养

样本采集、运输和保存

静脉血的采集应在所有放射性检查前进行，采用肝素抗凝管采集肘静脉血约2mL，颠倒混匀。抗凝

血应室温运输并及时进行接种培养。不能立即进行细胞培养时，可将抗凝血保存于4℃条件中，但最迟

接种时间不超过72h。

样本培养步骤

应按照GBZ/T248—2014中4.1和4.2所规定的步骤进行样本培养。

细胞培养

在无菌环境中进行接种操作。培养基离心管上编号并注明培养开始时间等相关信息。样本在

（37±0.5）℃恒温培养箱内斜面培养，斜度控制在8°～10°。斜面静置培养48h～52h后即可收获细

胞。培养箱内应放置温度计进行温度监测。

7细胞收获

细胞收获步骤

应按照GBZ/T248—2014中5.1～5.7所规定的步骤收获细胞。

低渗和固定

7.2.1操作人员应穿工作服、佩戴防毒口罩和外科手套，在通风橱内进行实验操作，所有操作必须在

符合GBZ2.1—2019要求的场所内进行。

7.2.2可选用染色体自动收获仪制备样品，但设备应存放在符合GBZ2.1—2019要求的场所内。

7.2.3废弃培养液和固定液须专门回收处理，并保留废液交接记录。

3

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滴片

7.3.1蒸馏水浸泡玻片，放置于冷藏冰箱中备用。蒸馏水中可加入适量的固定液。

7.3.2滴片应在通风橱内进行，实验人员悬空滴片于玻片的不同位置，可酒精灯过火干片。滴片也可

选用滴片仪自动操作。

7.3.3所有操作应在符合GBZ2.1—2019要求的场所进行。

染色

7.4.1玻片在室温下晾干或吹风机吹干。染液现配现用。

7.4.2技术人员应该穿工作服、佩戴防毒口罩和外科手套，也可选用全自动染色机染色。不可徒手触

摸染液和玻片。

7.4.3废弃染液须专门回收处理，并保留废液交接记录。

制片质量

细胞中期染色体应分散良好，长短粗细适中，背景干净，各条染色体可清晰辨认，见图1的示例。

图1染色体制片示例

8自动化畸变分析

自动化低倍镜扫描要求

8.1.1在一个视野下扫描到染色体数目（46±1）。

8.1.2染色体不能过于分散，不能混杂其他中期细胞。

8.1.3形态标准，同一条染色体不能两条染色单体间距过大，着丝粒清晰可辨认。

8.1.4形态长短粗细适中，不能扭曲折叠或紧缩成团。

8.1.5染色均匀，颜色太浅不清晰，太深不能鉴别染色体交叉或重叠。

自动化高倍镜扫描要求

8.2.1整张玻片中所有低倍镜扫描的对象都可被油镜重定位扫描。

8.2.2软件可提前设置好油镜需要扫描的细胞数量。如：检测需要分析100个或200个有效细胞，可

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设置油镜扫描400个或500个细胞。

8.2.3首先低倍镜扫描的细胞可按染色体形态质量排序，其次软件可自动选取设置数量范围内质量靠

前的细胞，最后油镜在玻片上从头按s形移动并扫描出被选中的细胞。

软件识别畸变要求

8.3.1基础要求

对非稳定性染色体畸变识别分析种类包括：双着丝粒体、多着丝粒体、着丝粒环。

8.3.2一般要求

对非稳定性染色体畸变识别分析种类包括：双着丝粒体、多着丝粒体、着丝粒环、无着丝粒断片、

微小体、无着丝粒环。

8.3.3可选要求

在识别非稳定性染色体畸变的基础上，增加稳定性畸变的识别分析，种类包括：倒位、易位、插入

和缺失等。

分析要求

8.4.1职业健康检查中，自动分析结果经人工复核后，每张玻片至少有效分析100个中期细胞。如出

现非稳定性异常，增加分析至200个有效中期细胞。

8.4.2剂量估算中，按本文件10.4剂量估算公式计算所需分析中期细胞数量。

8.4.3计数非稳定性染色体畸变和稳定性