GB/T 5513-1985 粮食、油料检验 还原糖和非还原糖测定法

中华人民共和国国家标准

粮食、油料检验还原糖和非还原糖测定法GB/T5513-85

Inspectionofgrainandoilseeds

Methodsfordeterminationofreducedsugarandnon-reducedsugar

━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

本标准适用于商品粮食中还原糖和非还原糖含量的测定。其中铁氰化钾法主要适用于

小麦粉。

1还原糖测定

1.1铁氰化钾法

1.1.1仪器和用具

1.1.1.1磨口带塞锥形瓶：100ml;

1.1.1.2量筒：50ml、25ml；

1.1.1.3移液管：5ml;

1.1.1.4玻璃漏斗;

1.1.1.5试管：直径1.8～2.0cm，高约18cm；

1.1.1.6铝锅：作沸水浴用；

1.1.1.7电炉：2000W；

1.1.1.8铁丝笼：放置试管用；

1.1.1.9试管架；

1.1.1.10锥形瓶：100ml;

1.1.1.11微量滴定管：5ml或10ml(刻度0.02ml);

1.1.1.12分析天平，感量0.0001g。

1.1.2试剂

1.1.2.195％乙醇；

1.1.2.2乙酸缓冲液：3ml冰Z酸、6.8g乙酸钠和比重1.84的硫酸4.5ml，混合后用水稀释

至1000ml；

1.1.2.312％钨酸钠溶液：12g钨酸钠Na2WO4·2H2O溶于100ml水中;

1.1.2.40.1N铁氰化钾溶液:32.9g干燥纯净的铁氰化钾与44.0g碳酸钠溶于1000ml水中；

1.1.2.5乙酸盐溶液：70g纯氧化钾和40g硫酸锌溶于水中，再加入200ml冰乙酸，再用水

稀释至1000ml，混匀；

1.1.2.610％碘化钾溶液：10g纯碘化钾溶于100ml水中，再加一滴饱和氢氧化钠溶液;

1.1.2.71％淀粉溶液：1g可溶性淀粉，用少量水润湿调和后，倒入沸水100ml，继续煮

沸，搅拌直至溶液清晰；

1.1.2.80.1N硫代硫酸钠溶液(按GB5490-85《粮食、油料和植物油脂检验一般规则》

附录B进行配制和标定)。

1.1.3操作方法

1.1.3.1提取样品液：精确称取粉样5.675g于100ml磨口锥形瓶中，用5ml乙醇浸湿全部

试样，再加入50ml乙酸缓冲液，摇匀后再加入2ml钨酸钠溶液，在振荡器上混合振摇5min，

取出过滤，弃去最初几滴滤液，收集滤液于干净锥形瓶中，此滤液即为样品测定液。另取

一锥形瓶不加试样，同上操作,滤液即为空白液。

1.1.3.2氧化：精确吸取样品液5ml于试管中，再精确加入5ml铁氰化钾溶液，混合后立

即将试管(置铁丝笼中，每次可同时作若干样品测定)放入剧烈沸腾的水浴中，并使管中液

面在沸水液面下3～4cm，加热准20min后取出，立即用冷水迅速冷却。

1.1.3.3滴定：将试管内容物倾入100ml锥形瓶中，用25ml乙酸盐溶液洗荡试管一并倾入

锥形瓶中，加5ml10％碘化钾，混匀后，立即用0.1N硫代硫酸钠滴定至淡黄色，再加1ml

淀

粉溶液，继续滴定直至溶液蓝色消失，记下用去硫代硫酸钠溶液体积(V1)。

1.1.3.4空白试验：吸取空白液5ml，代替样品液同1.1.3.2和1.1.3.3操作，记下消耗的

硫代硫酸钠溶液体积(V0)。

1.1.4结果计算

还原糖含量先按公式(1)计算出氧化样品液中“还原糖”所需0.1N铁氰化钾溶液体积

(V3),再根据此体积(ml)查表1，即可查得试样中含还原糖(以麦芽糖计算)的百分数。按

公式(1)计算：

(V0-V1)×N

V3=───────────(1)

0.1

式中：V0——滴定空白液消耗铁氰化钾溶液体积，ml;

V1——滴定样品液消耗铁氰化钾溶液体积，ml；

V3——氧化样品液中还原糖所需0.1N铁氰化钾溶液体积，ml；

N——硫代硫酸钠溶液实际当量浓度。

双试验结果允许差不超过0.05％，求其平均数，即为检验结果。检验结果取小数点后

第二位。

1.1.50.1N铁氰化钾(ml)与还原糖含量对照可查表1。

注：还原糖含量以麦芽糖计算。

1.2费林氏液法

1.2.1仪器和用具

1.2.1.1古氏坩埚：25ml;

1.2.1.2抽滤瓶：500ml;

1.2.1.3真空泵或水泵等。

1.2.2试剂

1.2.2.1费林氏溶液:

a.碱性酒石酸铜甲液：取硫酸铜结晶34.639g，加适量水溶解，加硫酸0.5ml，再加

水至500ml，用精制石棉过滤;

b.碱性酒石酸铜乙液：取酒石酸钾钠173g与氢氧化钠50g，加适量水溶解，稀释至

500ml，用精制石棉过滤，贮存于具有橡皮塞的玻璃瓶内。

1.2.2.2精制石棉：先用3N盐酸将石棉浸泡2～3日后，用水洗净。再加10％氢氧化钠溶

液浸泡2～3日，倾去溶液，用热碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时，用水洗净。再以3N盐酸

浸

泡数小时，用水洗至不呈酸性，使之成为微细的软纤维，用水浸泡贮存于玻璃瓶内，作填

充古氏坩埚用。

1.2.2.30.1N高锰酸钾标准溶液。

1.2.2.41N氢氧化钠溶液：取氢氧化钠4g，加水溶解至100ml。

1.2.2.5硫酸铁溶液：取硫酸铁50g，加水200ml溶解后，慢慢加入硫酸100ml，冷后加水

至1000ml。

1.2.2.63N盐酸，取盐酸25ml，加水至100ml。

1.2.3操作方法

表1

━━━━┳━━━┳━━━━┳━━━┳━━━━┳━━━┳━━━━┳━━━━

0.1NK3Fe┃还原糖┃0.1NK3Fe┃还原糖┃0.1NK3Fe┃还原糖┃0.1NK3Fe┃还原糖

(CN)6ml┃%┃(CN)6ml┃%┃(CN)6ml┃%┃(CN)6ml┃%

━━━━╋━━━╋━━━━╋━━━╋━━━━╋━━━╋━━━━╋━━━━

0.10┃0.05┃2.30┃1.16┃4.50┃2.37┃6.70┃3.79

0.20┃0.10┃2.40┃1.21┃4.60┃2.44┃6.80┃3.85

0.30┃0.15┃2.50┃1.26┃4.70┃2.51┃6.90┃3.92

0.40┃0.20┃2.60┃1.30┃4.80┃2.57┃7.00┃3.98

0.50┃0.25┃2.70┃1.35┃4.90┃2.64┃7.10┃4.06

0.60┃0.31┃2.80┃1.40┃5.00┃2.70┃7.20┃4.12

0.70┃0.36┃2.90┃1.45┃5.10┃2.76┃7.30┃4.18

0.80┃0.41┃3.00┃1.51┃5.20┃2.82┃7.40┃4.25

0.90┃0.46┃3.10┃1.56┃5.30┃2.88┃7.50┃4.31

1.00┃0.51┃3.20┃1.61┃5.40┃2.95┃7.60┃4.38

1.10┃0.56┃3.30┃1.66┃5.50┃3.02┃7.70┃4.45

1.20┃0.60┃3.40┃1.71┃5.60┃3.08┃7.80┃4.51

1.30┃0.65┃3.50┃1.76┃5.70┃3.15┃7.90┃4.58

1.40┃0.71┃3.60┃1.82┃5.80┃3.22┃8.00┃4.65

1.50┃0.76┃3.70┃1.88┃5.90┃3.28┃8.10┃4.72

1.60┃0.80┃3.80┃1.95┃6.00┃3.34┃8.20┃4.78

1.70┃0.85┃3.90┃2.01┃6.10┃3.41┃8.30┃4.85

1.80┃0.90┃4.00┃2.07┃6.20┃3.47┃8.40┃4.92

1.90┃0.96┃4.10┃2.13┃6.30┃3.53┃8.50┃4.99

2.00┃1.01┃4.20┃2.18┃6.40┃3.60┃8.60┃5.05

2.10┃1.06┃4.30┃2.25┃6.50┃3.67┃8.70┃5.12

2.20┃1.11┃4.40┃2.31┃6.60┃3.73┃8.80┃5.19

━━━━┻━━━┻━━━━┻━━━┻━━━━┻━━━┻━━━━┻━━━━━

1.2.3.1试样处理：准确称样10～20g放入250ml容量瓶中，加水200ml，在45℃水

浴

中加热1h，并时时振摇，到时待冷后加水至刻度，静置后，吸取澄清液200ml于另一250ml

容量瓶中,加碱性酒石酸铜甲液10ml和1N氢氧化钠溶液4ml,摇匀,加水至刻度,静置30min,

用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，其余滤液供测定还原糖和非还原糖用。

1.2.3.2滴定：精密吸取制备的试样溶液50ml于400ml烧杯中，加入碱性酒石酸铜甲、乙

液各25ml，盖一表面皿，置电炉上加热，在4min内沸腾，再煮沸2min，趁热用铺有石棉

的

古氏坩埚(或垂融坩埚)抽滤，并用60℃热水洗涤烧杯和沉淀，至洗液不呈碱性为止。将古

氏坩埚放回原400ml烧杯中，加硫酸铁溶液25ml和水25ml，用玻捧搅拌，使氧化亚铜完

全

溶解，以0.1N高锰酸钾标准溶液滴定至微红色。同时取水50ml，加碱性酒石酸铜甲、乙液

各25ml,做试剂空白试验。

1.2.4结果计算

相当于试样中还原糖重量的氧化亚铜重量按公式(2)计算：

x=(V-V0)N×71.54(2)

式中：x——相当于试样中还原糖重量的氧化亚铜的重量，mg;

V——试样消耗高锰酸钾标准溶液的体积，ml;

V0——试样空白消耗高锰酸钾标准溶液的体积，ml；

N——高锰酸钾标准溶液的当量浓度；

71.54——1N高锰酸钾标准溶液1ml相当于氧化亚铜的毫克数。

由所得的氧化亚铜重量，按附录A的表查出相当的还原糖(以葡萄糖计)的重量。

还原糖干基含量按公式(3)计算：

62.5A

还原糖(干基%)=───────(3)

W(100-M)

式中：A——由附录A表中查得的还原糖(以葡萄糖计)的重量，mg；

W——试样重量,g;

M——试样水分百分率，％。

双试验结果允许差及小数点位数同1.1.4。

注：①煮沸时间必须控制在4min内。可先取水50ml加碱性酒石酸铜甲、乙液各25ml，

调节好适当的火力后，再作样品。

②煮沸后的溶液如不呈蓝色，表示糖量过高，可减少试样重量，另作。

2非还原糖测定

2.1铁氰化钾法

所需仪器和用具同1.1.1。

所需试剂同1.1.2。

2.1.1操作方法

分别吸取1.1.3.1样品液及空白液各5ml于试管中，先在剧烈沸腾的水浴中加热15min

(样品液中非还原糖转化为还原糖)，取出迅速冷却后，加入碱性铁氰化钾溶液5ml，混

匀后，再放入沸腾水浴中继续加热20min，取出迅速冷却后，立即按1.1.3.3方法进行

滴定，分别记下滴定样品液及空白液消耗硫代硫酸钠体积(V1'，V0')。

2.1.2结果计算

非还原糖含量先按公式(4)计算，求出氧化样品液中总"还原糖"所需0.1N铁氰化钾溶

液所需的体积(V4)，然后减去单独氧化样品液中“还原糖”所需的铁氰化钾溶液体积(V3)

[公式(1)]，最后再根据V4—V3的结果(ml)查表2，即可查得试样中含非还原糖(以蔗糖

计)的百分数。

(V0'-V1')N

V4=───────────(4)

0.1

式中：V0'——滴定空白液消耗硫代硫酸钠溶液体积，ml；

V1'——滴定样品液消耗硫代硫酸钠溶液体积，ml；

V4——氧化样品液中总还原糖所需0.1N铁氰化钾溶液体积，ml；

N——硫代硫酸钠溶液当量浓度。

双试验结果允许差不超过0.05％，求其平均数，即为测定结果。测定结果取小数点后

第二位。

2.1.30.1N铁氰化钾(ml)与非还原糖含量对照可查表2。

注:非还原糖含量以蔗糖计算。

表2

━━━━┳━━━┳━━━━┳━━━┳━━━━┳━━━┳━━━━┳━━━━━

0.1NK3Fe┃非还原┃0.1NK3Fe┃非还原┃0.1NK3Fe┃非还原┃0.1NK3Fe┃非还原

(CN)6ml┃糖%┃(CN)6ml┃糖%┃(CN)6ml┃糖%┃(CN)6ml┃糖%

━━━━╋━━━╋━━━━╋━━━╋━━━━╋━━━╋━━━━╋━━━━━

0.10┃0.05┃2.30┃1.09┃4.50┃2.14┃6.70┃3.18

0.20┃0.10┃2.40┃1.14┃4.60┃2.18┃6.80┃3.23

0.30┃0.15┃2.50┃1.19┃4.70┃2.23┃6.90┃3.28

0.40┃0.19┃2.60┃1.23┃4.80┃2.28┃7.00┃3.33

0.50┃0.24┃2.70┃1.28┃4.90┃2.33┃7.10┃3.37

0.60┃0.29┃2.80┃1.33┃5.00┃2.38┃7.20┃3.42

0.70┃0.34┃2.90┃1.38┃5.10┃2.42┃7.30┃3.47

0.80┃0.38┃3.00┃1.43┃5.20┃2.47┃7.40┃3.52

0.90┃0.43┃3.10┃1.48┃5.30┃2.51┃7.50┃3.57

1.00┃0.48┃3.20┃1.52┃5.40┃2.56┃7.60┃3.62

1.10┃0.52┃3.30┃1.57┃5.50┃2.61┃7.70┃3.67

1.20┃0.57┃3.40┃1.61┃5.60┃2.66┃7.80┃3.72

1.30┃0.62