T/GDCDC 029-2023 化妆品紧致功效测试 体外成纤维细胞弹性蛋白含量测定

ICS7110070

CCSY.42.

团体标准

T/GDCDC029—2023

化妆品紧致功效测试

体外成纤维细胞弹性蛋白含量测定

Firmingliftingefficacytestofcosmetics—Invitrotestmethod

ofelastincontentwithfibroblast

2023-02-03发布2023-02-03实施

广东省日化商会发布

中国标准出版社出版

T/GDCDC029—2023

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

原理

4………………………1

材料

5………………………2

试验方法

6…………………3

结果计算

7…………………5

质量控制

8…………………5

结果评价

9…………………6

结论

10………………………6

附录资料性细胞维护和培养程序

A()…………………7

附录资料性正常人皮肤成纤维细胞

B()………………8

附录资料性受试物溶解度预测试流程

C()……………9

附录资料性十进制几何浓度序列

D()…………………10

附录规范性细胞毒性试验和弹性蛋白含量测试步骤

E()……………11

参考文献

……………………13

Ⅰ

T/GDCDC029—2023

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由广东省日化商会提出并归口

。

本文件起草单位广东悠质检测技术有限公司康正检测服务股份有限公司广州市科能化妆品科

:、、

研有限公司深圳市仙迪化妆品股份有限公司广州白云美湾检测有限公司广东北工商绿色护肤品研

、、、

究院有限公司广州好迪集团有限公司广州华评检测技术有限公司广州善草纪化妆品有限公司广东

、、、、

蕾琪化妆品有限公司广东省日化商会

、。

本文件主要起草人郭沈涛冯绮华杨登亮蔡红丽罗春红郑木创黄继奇厚静学林泽强

:、、、、、、、、、

郑如娟余雪玲卓琦余子琳

、、、。

Ⅲ

T/GDCDC029—2023

引言

本文件的发布机构提请注意声明符合本文件时可能涉及到与一种用体外细

,,CN202210045156.6

胞评价化妆品及原料紧致功效的方法相关的专利的使用

。

本文件的发布机构对该专利的真实性有效性和范围无任何立场

、。

该专利持有人已各本文件的发布机构承诺他愿意同任何申请人在合理且无歧视的条款和条件

,

下就专利授权许可进行谈判该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案相关信息可以通过

,。。

一下联系方式获得

:

专利持有人广东悠质检测技术有限公司联系人李适炜

:;:,18816786351。

地址广东省广州市白云区新贝路号楼室

:58801。

Ⅳ

T/GDCDC029—2023

化妆品紧致功效测试

体外成纤维细胞弹性蛋白含量测定

1范围

本文件规定了化妆品紧致功效测试体外成纤维细胞弹性蛋白含量测定的材料结果计算质量控

-、、

制结果评价和结论描述了试验方法

、,。

本文件适用于应用人皮肤成纤维细胞测试化妆品及原料促进弹性蛋白合成的能力为化妆品及原

,

料紧致功效宣称提供科学支持

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

光密度opticaldensityOD

;

入射光和透射光的透过率之比值的常用对数值

。

32

.

酶联免疫吸附试验enzyme-linkedimmunosorbentassayELISA

;

将抗原抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的高灵敏度分析技术基本设

、。

计是用酶如辣根过氧化物酶碱性磷酸酶等标记抗体该酶标抗体可与待测的抗原或抗体免疫吸附结

(、),

合酶催化的呈色反应可以间接反映抗原的量

,。

4原理

41弹性蛋白合成原理

.

人皮肤成纤维细胞能在体内合成型前胶原和原弹性蛋白并分泌至胞外原弹性蛋白在赖氨酰氧

Ⅰ,

化酶等的催化氧化下形成其特有的交联结构而形成弹性蛋白弹性纤维由弹性蛋白和微原纤维构

。

成分布于真皮及皮下组织使皮肤具有弹性人皮肤成纤维细胞可以作为研究化妆品提升弹性蛋白含

,,。

量的细胞模型通过测定受试物给药后细胞弹性蛋白含量的上调率评价受试物是否存在促进弹性蛋

,,,

白合成的能力

。

42弹性蛋白测试原理

.

弹性蛋白与包被在酶标板上的弹性蛋白抗体特异性结合后与带有底物标记的抗弹性蛋白抗体结

,

1

T/GDCDC029—2023

合底物被酶催化后生成有色产物弹性蛋白含量与有色产物颜色的深浅呈正相关用酶标仪在

,,,。

波长下测定光密度值计算弹性蛋白含量

450nm(OD),。

5材料

51细胞系

.

人皮肤成纤维细胞株

HFF-1。

52仪器及设备

.

测试所需仪器及设备如下

:

二氧化碳培养箱湿化

———(37℃±1℃,,5%±1%CO2);

生物安全柜或层流洁净工作台

———;

水浴槽

———(37℃±1℃);

倒置相差显微镜

———;

酶标仪配备滤光片

———:540nm、570nm、630nm;

电子天平精确到

———(0.001g);

低速离心机

———;

细胞板振荡器

———;

漩涡混匀仪

———;

移液器

———:1000μL、200μL、50μL、10μL;

细胞计数仪或血球计数板

———