DB63/T 1269-2014 动物疫病监测样品采集、保存及运送技术规范

ICS11.220

B41

备案号：41686-2014DB63

青海省地方标准

DB63/T1269—2014

动物疫病监测样品采集、保存及运送

技术规范

2014-03–03发布2014-03-15实施

青海省质量技术监督局发布

DB63/T1269—2014

前言

本标准的编写符合GB/T1.1—2009给出的规则。

本标准由青海省农牧厅提出并归口管理。

本标准起草单位：青海省动物疫病预防控制中心。

本标准起草人：傅义娟、王生祥、王云平、林元清、李秀英、齐青丽、都占林、盛宗华。

I

DB63/T1269—2014

动物疫病监测样品采集、保存及运送技术规范

1范围

本标准规定了动物疫病监测样品（病料）的采集注意事项、采样前的准备工作、样品采集及保存、

样品编号、采样单填写、样品运送方法。

本标准适用于病原学、血清学、组织病理学等实验室检测、诊断所需样品（病料）的采集、保存和

送检。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T18635动物防疫基本术语

GB/T18639狂犬病诊断技术

GB/T18935口蹄疫诊断技术

NY/T765高致病性禽流感样品采集、保存及运输技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适应于本标准。

3.1动物疫病监测

调查动物群体中某种疫病或病原的存在情况。

3.2样品

取自动物或环境，拟通过检验反映动物个体、群体或环境有关状况的材料或物品。

3.3病料

来自患病或可疑患病动物的被（待）检材料。

4采样注意事项

4.1谨慎取样：遇有病死动物，先排除炭疽后，再进行解剖取样。

4.2及时取样：动物死后应尽快剖检取样，否则尸体腐败，难以采到合格的样品。

4.3无菌取样：采样所需器具均应事先消毒，不同病料不得混装于同一容器内。

4.4合理取样：取材时应根据不同的疫病和检验目的，采取相应的病料。

4.5注意安全：采样时，应注意个人的安全防护，同时也要注意防止污染周围环境。

1

DB63/T1269—2014

5采样前的准备工作

5.1器械准备

冷藏箱、解剖刀，剪刀，镊子，酒精灯，酒精棉，注射器、试管、离心管、试管架、平皿、西林瓶、

样品袋、玻片、无菌棉拭子、冰袋、封条、探杯等。

5.2器械消毒

采样用具事先应煮沸或高压灭菌。

5.3记录用品

不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单、记录本等。

5.4保存液

阿氏液、50%甘油盐水缓冲液、pH7.4磷酸盐缓冲液（PBS液），10%福尔马林固定液。

5.5人员防护用具

防护服、防护帽、一次性口罩、一次性手套、护目镜、胶鞋等。

6样品采集及保存

6.1血液

6.1.1采血部位

猪常用采血部位是耳缘静脉和前腔静脉；禽类可在翅静脉或心脏采血；牛、羊常在颈静脉采血，牛

也可在尾静脉采血；兔可从耳背静脉、颈静脉或心脏采血；啮齿类动物可从尾尖采血，也可从眼窝内的

血管丛采血。

6.1.2采血方法

对采血部位剪毛或拔毛，先用碘酒消毒，再用75%酒精脱碘，采血完毕，用干棉球压迫止血。

6.1.3血液样品的制备

6.1.3.1血清

待血液凝固，血清自然析出后取出。也可用离心机2500r/min～3500r/min离心5min～8min。若能及

时检测，可将血清放于0℃～4℃冰箱冷藏，若暂时不检测，须置-20℃冰箱冷冻保存，但要避免反复冻

融。

6.1.3.2全血（抗凝血）

样品中加入抗凝剂。抗凝剂可用阿氏液、5%枸橼酸钠溶液等，也可将血液放入装有玻璃珠的灭菌瓶

内，振摇脱去纤维蛋白。全血样品不能冻结保存，以防溶血。

6.2组织脏器

6.2.1用于病原分离的组织样品

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DB63/T1269—2014

以无菌技术采集组织样品，分别放入灭菌容器内，标记后冷藏送往实验室。

6.2.2用于病理组织学检验的组织样品

样品必须新鲜，选取病变典型的部位，连同健康组织一同用锋利的刀具切下，立即放入10倍于组织

块的10%福尔马林溶液中固定。固定器具避免使用金属材质。组织块厚度不超过0.5cm，面积在2cm2～3cm2

之间。组织块切忌挤压、刮摸和用水洗。如作冷冻切片用，则将组织块放在0℃～4℃容器中，尽快送往

实验室。

6.3牛、羊O-P液（食道-咽喉部位分泌物）

被检动物在采样前禁食(可饮水)12h，以免反刍胃内容物严重污染O-P液。采样探杯在使用前经0.2

％柠檬酸或2％氢氧化钠浸泡5min，再用自来水冲洗。每采完一头动物,探杯要重复进行消毒和清洗。采

样时动物站立保定，将探杯随吞咽动作送入食道上部10cm～15cm处，轻轻来回移动2次～3次，然后将探

杯拉出，如采集的O-P液被反刍胃内容物严重污染，要用生理盐水或自来水冲洗口腔后重新采样。采集

8mL～10mLO-P液，倒入含有等量磷酸盐缓冲液的灭菌瓶中，加盖密封后充分摇匀，标记后放入冷藏箱

及时送检，若不能及时送检应转往-60℃冰箱冷冻保存。

6.4家禽泄殖腔拭子和咽喉拭子

取无菌棉签，插入禽口腔至咽的后部直达喉气管，慢慢旋转，沾上气管分泌物或将棉拭子插入泄殖

腔约1.5cm～2cm，旋转沾上粪便，将拭子的样品端剪下，置于装有抗生素的PBS溶液的小塑料离心管中，

封口，做好标记。

6.5水泡皮、水泡液

若水泡皮表面有污物，可用清水清洗，切忌使用酒精、碘酒等消毒剂消毒、擦拭。用灭菌注射器抽

取水泡中的水泡液装入灭菌小瓶中，若水泡已破裂，剪取新鲜水泡皮放入灭菌小瓶中,加2倍体积的50

％甘油磷酸盐缓冲液(pH7.4),加盖密封，尽快