DB13/T 5572-2022 堆肥用木质纤维素降解菌筛选技术规程

ICS13.080.99

CCSB11

13

河北省地方标准

DB13/T5572—2022

堆肥用木质纤维素降解菌筛选技术规程

2022-05-31发布2022-07-01实施

河北省市场监督管理局发布

DB13/T5572—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规

定起草。

本文件由河北省农业农村厅提出。

本文件起草单位：河北工程大学。

本标准主要起草人：柳焕章、刘建钗、陈凯、刘利强、刘会洽、吴志勇、姬国强、王春霞、张

良、刘彦威、刘娜、刘孟啸、赵梓筱、董帅、赵海琪、杨硕、赵萍。

I

DB13/T5572—2022

堆肥用木质纤维素降解菌筛选技术规程

1范围

本文件规定了堆肥用木质纤维素降解菌菌株筛选的培养基配制、富集培养、菌株分离、初筛、

复筛技术等。

本文件适用于农林牧及加工业的有机废弃物堆肥、农作物秸秆还田，及其它行业和生活垃圾的

有机废物中木质纤维素降解与资源化利用领域。

本文件不适用于厌氧发酵和其他材料及形式的处理与利用。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本

文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB7959-87粪便无害化卫生标准

GB15618-2018土壤环境质量农用地土壤污染风险管控标准

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

木质纤维素

由纤维素、半纤维素和木质素组成的复合体，广泛存在于各种植物细胞壁中，是植物有机体和

残体的主要构成物质，其结构致密、分解困难，与腐殖质形成有密切关系。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

CMC-Na：羧甲基纤维素钠；

CMCase：羧甲基纤维素酶；

DNS：3,5-二硝基水杨酸；

Lip：木质素过氧化物酶；

Mnp：锰过氧化物酶；

Lac：漆酶

ABTS：2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸。

5菌株筛选

包括样品采集、筛选培养基制备、木质纤维素降解菌的富集与分离、菌株初筛与复筛。

筛选培养基配制

参见附录A。

样品采集

从养殖场、有机肥厂、菌菇厂、垃圾填埋场、污水处理厂、林地和农田等场所采集发酵过程中

的粪便、堆肥、菌菇发酵料、活性污泥、腐殖土和耕层土壤等，每种材料采样不少于20g样品，避光

冷藏，在24h内进行富集或分离培养。

富集培养

1

DB13/T5572—2022

称取各类样品各20g，充分打散混匀；称取2份10g混合样品，分别放入2个灭菌的含100mL木质

纤维素富集培养液的250mL锥形瓶中，两瓶分别于35℃和45℃、160r/min摇瓶48h。

分离纯化

取上述富集悬液1.0mL，依此倍比稀释至10﹣5稀释液；均匀涂布于细菌、放线菌、真菌分离培养

基平板，2个重复，将稀释平板分别置于35℃和45℃条件下恒温培养1d～7d。在培养期间每天观察

菌落生长情况，并从适当稀释平板上挑