T/CSBM 0050.3-2024 创面修复材料有效性评价 第3部分:刺激因子屏蔽评价方法

T/CSBM 0050.3-2024 Evaluation of Wound Repair Material Efficacy - Part 3: Evaluation Method for Stimulation Factor Shielding

团体标准 中文(简体) 现行 页数:11页 | 格式:PDF

基本信息

标准号
T/CSBM 0050.3-2024
标准类型
团体标准
标准状态
现行
中国标准分类号(CCS)
-
国际标准分类号(ICS)
发布日期
2024-05-14
实施日期
2024-10-01
发布单位/组织
-
归口单位
中国生物材料学会
适用范围
范围:本文件规定了创面修复材料体外评价的刺激物浓度确定试验、物理屏蔽细胞活力试验和物理屏蔽细胞迁移试验。 本文件适用于水凝胶或固态创面修复生物材料屏蔽保护创面细胞活力和迁移效果的评价; 主要技术内容:4刺激物浓度确定试验4.1原理将刺激物溶解在培养基中,配成不同梯度已知浓度的样品,按照GB/T 16886.5测定刺激物不同浓度下的细胞毒性,确定刺激物存活率40%、50%和60%的浓度。4.2器具、试剂和耗材、细胞系、刺激物4.2.1器具试验器具如下:a)二氧化碳细胞培养箱;b)恒温水浴摇床;c)高压蒸汽灭菌锅;d)倒置荧光显微镜;e)细胞计数仪;f)恒温水浴摇床;g)酶标仪;h)电子天平;i)液氮罐;j)冷冻离心机;k)96孔板;l)细胞培养瓶或细胞培养皿。4.2.2试剂和耗材试验试剂和耗材如下:a)含10%新生胎牛血清DMEM低糖培养基(含10%FBS?DMEM低糖培养基);b)二甲基亚砜(DMSO);c)异丙醇;d)高密度聚乙烯。4.2.3细胞系4.2.3.1试验可使用的细胞系如下:a)成纤维细胞;b)皮肤上皮细胞;c)食管上皮细胞;d)胃黏膜上皮细胞;e)肠黏膜上皮细胞。4.2.3.2对于用于不同部位的修复材料选择合适的细胞系,如用于皮肤的修复材料可用皮肤细胞,用于食管的材料可选择食管上皮细胞。4.2.4刺激物试验可使用的刺激物如下:a)盐酸;b)胃蛋白酶;c)胰蛋白酶;d)过氧化氢;e)细菌内毒素;f)其他。4.3样品制备4.3.1刺激物梯度溶液准确称取刺激物溶解在含10%FBS?DMEM低糖培养基中,配置成不同梯度浓度的刺激物,过滤除菌低温保存备用。根据样品现有的细胞毒性数据,配置10个不同梯度浓度的刺激物。4.3.2阴性对照计算直径为1?cm的高密度聚乙烯双面的面积,按3?cm2/mL加入含10%FBS?DMEM低糖培养基,37?℃、120?r/min摇床中浸提24?h,取上清液使用。4.3.3阳性对照取适量DMSO加入含10%FBS?DMEM低糖培养基内,制备10%DMSO溶液,37?℃、120?r/min摇床中震荡24?h。4.3.4空白对照含10%FBS?DMEM低糖培养基,37?℃、120?r/min摇床中震荡24?h。4.4试验方法按照GB/T 16886.5—2017中附录C规定的MTT细胞毒性试验方法进行,处理条件、检测模型、观察时间按表

研制信息

起草单位:
杭州英健生物科技有限公司、中国食品药品检定研究院、四川大学
起草人:
戴建英、韩倩倩、梁洁、于栋杰、高欣怡、王良静、王涵、徐磊、李娜、王春仁、王莹
出版信息:
页数:11页 | 字数:- | 开本: -

内容描述

ICS11.040.30

CCSC30

T/CSBM

团体标准

T/CSBM0050.3—2024

创面修复材料有效性评价

第3部分:刺激因子屏蔽评价方法

Effectivenessevaluationofwoundrepairmaterials

Part3:Invitroirritantsbarrierevaluationmethod

2024-05-14发布2024-10-01实施

中国生物材料学会发布

T/CSBM0050.3—2024

目次

前言....................................................................................................................................................................II

引言..................................................................................................................................................................III

1范围................................................................................................................................................................1

2规范性引用文件...........................................................................................................................................1

3术语和定义....................................................................................................................................................1

4刺激物浓度确定试验...................................................................................................................................1

5物理屏蔽细胞活力试验...............................................................................................................................3

6物理屏蔽细胞迁移试验...............................................................................................................................5

参考文献.............................................................................................................................................................7

I

T/CSBM0050.3—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件是T/CSBM0050—2024《创面修复材料有效性评价》的第3部分。包括以下部分:

——第1部分:水溶性材料体外评价方法;

——第2部分:水不溶性材料体外浸提液评价方法;

——第3部分:刺激因子屏蔽评价方法;

——第4部分:体外微血管形成试验评价方法;

——第5部分:体外细胞粘附和增殖直接接触评价法;

——第6部分:动物食管创面模型促修复愈合评价方法;

——第7部分:动物胃创面模型促修复愈合评价方法;

——第8部分:动物肠道创面模型促修复愈合评价方法;

——第9部分:动物皮肤创面模型促修复愈合质量评价方法。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中国生物材料学会提出。

本文件由中国生物材料学会团体标准化技术委员会归口。

本文件起草单位:杭州英健生物科技有限公司、中国食品药品检定研究院、四川大学。

本文件主要起草人:戴建英、韩倩倩、梁洁、于栋杰、高欣怡、王良静、王涵、徐磊、李娜、王春

仁、王莹。

II

T/CSBM0050.3—2024

引言

早期的创面愈合材料为普通无菌的敷料,主要起到物理隔离保护创面的作用。随着生物材料的不断

发展,具有组织再生能力的材料不断出现,这些材料不仅具有保护创面,而且具有促进创面细胞再生迁

移,加速创面愈合速度和提高创面愈合质量的作用。目前评价创面材料的有效性主要是评价对细菌的隔

离作用,尚无从细胞水平评价材料促进创面愈合的方法。创面修复材料主要包括水溶性材料和非水溶性

材料。本文件采用物理隔离模型和体外细胞培养的方法,评价材料对细胞增殖和迁移的影响,确定材料

物理隔离作用的有效性。

通过体外物理防护模型试验评价材料对各种刺激因子如胃酸、胃蛋白酶、胰蛋白酶、氧化物、内毒

素等物质的隔离作用,在保护材料的作用下,细胞增殖试验应显示细胞处于存活增殖状态,细胞迁移试

验在有保护材料存在时显示细胞迁移作用。本文件采用Transw

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