GB/T 22984-2008 牛奶和奶粉中卡巴氧和喹乙醇代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

ICS67.050

X04OB

中华人民共和国国家标准

GB/T22984—2008

牛奶和奶粉中卡巴氧和唾乙醇代谢物

残留量的测定

液相色谱-串联质谱法

Determinationoftheresiduesofmetabolitesofcarbadoxand

olaquindoxinmilkandmilkpowder—

LC-MS-MSmethod

2008-12-31发布2009-05-01实施

发布

GB/T22984—2008

刖

本标准的附录A、附录B为资料性附录。

本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局、中华人民共和国深圳出入境检验检

疫局。

本标准主要起草人:林黎、谢丽琪、欧阳姗、梁宏、叶刚、廖菁菁、庞国芳。

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GB/T22984—2008

牛奶和奶粉中卡巴氧和瞳乙醇代谢物

残留量的测定

液相色谱-串联质谱法

1范围

本标准规定了牛奶和奶粉中卡巴氧代谢物嗟噁咻-2-竣酸(quinoxaline-2-carboxylicacid)和座乙醇

代谢物3-甲基座噁咻-2-竣酸(3-methylquinoxaline-2-carboxylicacid)残留量的液相色谱-串联质谱测定

方法。

本标准适用于牛奶和奶粉中卡巴氧代谢物嗟噁咻-2-竣酸(quinoxaline-2-carboxylicacid)和座乙醇

代谢物3-甲基座噁咻-2-竣酸(3-methylquinoxaline-2-carboxylicacid)残留量的测定。

本标准的方法检出限：嗟噁咻-2-竣酸和3-甲基座噁咻-2-竣酸的方法检出限牛奶为0.5Mg/kg,奶粉

为4.0jxg/kg。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6379.1测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第1部分：总则与定义

(GB/T6379.1—2004,ISO5725-1：1994,IDT)

GB/T6379.2测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第2部分：确定标准测量方法重复

性与再现性的基本方法(GB/T6379.2—2004,ISO5725-2：1994,IDT)

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682—2008,ISO3696：1987,MOD)

3原理

用甲酸溶液消化试样，使牛奶和奶粉中天然存在的酶失活，然后加入蛋白酶水解，盐酸酸化，离心过

滤后，固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱仪测定，内标法定量。

4试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1甲醇:色谱纯。

4.2甲酸：色谱纯。

4.乙酸钠。

4.4乙酸乙酯。

4.52%甲酸-乙酸乙酯溶液：向400mL乙酸乙酯中加入10mL甲酸，用乙酸乙酯定容至500mLo

4.60.6%甲酸溶液:量取6.0mL甲酸，用水溶解、定容至1L。

4.70.1%甲酸溶液:量取1.0mL甲酸，用水溶解、定容至1L。

4.8甲酸-甲醇溶液(19+1)：用190mL甲酸溶液(4.2)与10mL甲醇(4.1)混合。

4.90.1mol/L盐酸溶液：量取&3mL浓盐酸，用水溶解、定容至1L。

4.100.3mol/L盐酸溶液:量取25mL浓盐酸，用水溶解、定容至1L。

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GB/T22984—2008

4.11Protease蛋白酶:SigmaP5147或相当者，一18C以下保存。

4.120.01g/mL蛋白酶水溶液：称取1.00gProtease蛋白酶(4.11),用水溶解、定容至100mL,4C

保存。

4.1310%乙酸溶液：量取100mL乙酸，用水溶解、定容至1L。

4.140.05mol/L乙酸钠溶液:称取6.8g乙酸钠用800mL水溶解，再滴加10%乙酸溶液以调节溶液

pH=7,用水定容至1L。

4.15乙酸钠-甲醇溶液(19+1)：用190mL乙酸钠溶液(4.14)与10mL甲醇(4.1)混合。

4.16甲醇-水溶液(1+4)。

4.17Tris碱:SigmaT15O或相当者。

4.181.0mol/LTris溶液:称取121gTris碱(4.17),用水溶解、定容至1L,4C保存。

4.19座噁咻-2-竣酸、3-甲基座噁咻-2-竣酸、座噁咻-2-竣酸-d4标准物质：纯度$99%。

4.20标准储备液：100mg/L0准确称取适量标准物质,分别用甲醇溶解定容，配成100mg/L的标准

储备液，在一18C以下保存。

4.21基质混合标准工作溶液：根据灵敏度和使用需要，用空白样品提取液配成不同浓度(Mg/L)的混

合标准工作溶液，在4°C保存。

4.22内标工作溶液：准确称取适量座噁咻-2-竣酸-d4标准物质，用甲醇溶解定容，配成100Mg/L的标

准工作溶液，在4C保存。

4.2OasisMAX固相萃取柱"或相当者：60mg,mL。用前分别用3mL甲醇和3mL水活化，保持

柱体湿润。

4.24滤膜：0.2“m。

5仪器和设备

5.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。

5.2固相萃取真空装置。

5.吹氮浓缩仪。

5.4旋涡振荡器。

5.5分析天平：感量0.1mg和0.01g。

5.6真空泵。

5.7低温离心机：可制冷到4°C,转速大于5000r/mino

5.8移液器量程：10mL~100mL和100卩L〜1000卩L。

5.9聚丙烯离心管：15mL和50mL,具塞。

5.10pH计:精度士0.02pH单位。

6试样制备与保存

6.1试样的制备

取不少于500g有代表性的牛奶或奶粉.充分混匀，分为两份，置于样品瓶中，密封，并作上标记。

6.2试样的保存

牛奶置于4C冰柜中避光保存，奶粉则于室温下置于干燥器保存。

1)OasisMAX固相萃取柱是Waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表

示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

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GB/T22984—2008

7测定步骤

7.1提取

7.1.1牛奶

准确称取5g牛奶样品（精确到0.01g）,置于5