T/ZMX 004-2020 张家界莓茶 总黄酮的测定

范围:本文件规定了张家界莓茶总黄酮检测的原理、仪器和用具、试剂与溶液、操作方法及结果计算的方法。 本文件适用于张家界市莓茶协会成员生产的莓茶的总黄酮测定; 主要技术内容:3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1张家界莓茶  Zhangjiajie Ampelopsis grossedentata特指生长于张家界行政区域内，经人工栽培种植的显齿蛇葡萄植物，采摘其幼嫩茎叶或成熟绿叶为原料，采用摊青、杀青、揉捻、析晶、干燥等工艺加工而成的代用茶饮品。3.2总黄酮  Total flavonoids指一类具有苯并芘喃环结构的黄酮类化合物的总称，广泛存在于植物界，最常见的是黄酮和黄酮醇，其它包括双氢黄(醇)、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。显齿蛇葡萄叶中的黄酮类化合物主要为二氢杨梅素。4原理黄酮类化合物中的3-羟基、4-羟基或5-羟基、4-羰基或邻二位酚羟基，可与铝盐进行络合反应，在碱性液体中生成红色络合物，在一定的浓度范围内，其浓度与吸光度符合比耳定律。显齿蛇葡萄叶中的主要活性成分为黄酮类化合物中的二氢杨梅素,最大紫外吸收波长为291 nm，可通过制作标准工作曲线和测定样品的吸光度，计算样品中总黄酮含量。5仪器和用具5.1  仪器紫外可见分光光度计（波长范围190nm～900nm，日本岛津公司）、天平（感量0.001g，梅特勒-托利多仪器上海有限公司）、水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）、粉碎机（浙江屹立工贸有限公司）。5.2  用具容量瓶（10mL, 25mL, 50mL和100mL）、10mm比色皿。6试剂与溶液6.1  除非另有说明，本文件所用的试剂均为分析纯（AR），水为蒸馏水。6.2  5%AlCl3溶液：准确称取5.0g无水AlCl3，加入蒸馏水溶解并定容至100mL。6.3  95%甲醇溶液：量取95mL无水甲醇，向其中加入5 mL水，混合均匀。6.4  二氢杨梅素（上海阿拉丁生化科技股份有限公司）：纯度≥99.0%（HPLC法），4℃密封避光保存。6.5  二氢杨梅素标准品储备液：称取二氢杨梅素标准品15.00 mg，加入95%甲醇溶解并定容至25 mL。7操作方法7.1 供试样品的制备参照GB/T 8303中6.2规定的方法，称取100g左右的显齿蛇葡萄代用茶产品，粉碎成0.85mm（20目）左右的茶粉，混合均匀