RB/T 228-2023 食品微生物定量检测的测量不确定度评估指南

ICS0312020

CCSA.00.

中华人民共和国认证认可行业标准

RB/T228—2023

代替RB/T151—2016

食品微生物定量检测的

测量不确定度评估指南

Guidelinesfortheestimationofmeasurementuncertaintyof

foodmicrobiologicalquantitativedetection

2024-05-20发布2024-07-01实施

国家认证认可监督管理委员会发布

中国标准出版社出版

RB/T228—2023

目次

前言

…………………………Ⅲ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义符号

3、…………………………1

总则

4………………………4

技术不确定度

5……………5

基质不确定度

6……………10

分布不确定度

7……………11

合成标准不确定度和扩展不确定度

8……………………14

检测报告中测量不确定度的表示方法

9…………………14

附录资料性用两个或两个以上测试部分计算实验室内再现性标准偏差和基质不确定度标准

A()

偏差

……………………16

附录资料性基质的影响和基质不确定度

B()…………19

附录资料性最可能数不确定度检索表

C()(MPN)……………………23

附录资料性合成标准不确定度和扩展不确定度计算示例

D()………26

参考文献

……………………28

Ⅰ

RB/T228—2023

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件代替食品微生物定量检测的测量不确定度评估指南与

RB/T151—2016《》,RB/T151—

相比除结构调整和编辑性改动外主要技术变化如下

2016,,:

增加了与测量不确定度评估有关的术语定义和符号

a)、;

更改了测量不确定度的评估方案使用技术不确定度基质不确定度分布不确定度来评估测

b),、、

量不确定度

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由国家认证认可监督管理委员会提出并归口

。

本文件起草单位青岛海关技术中心湖南省产商品质量检验研究院临沂大学中国合格评定国家

:、、、

认可中心大连海关技术中心中国检验检疫科学研究院粤港澳大湾区研究院北京鑫汇迈科生物科技

、、、

有限公司深圳海关食品检验检疫技术中心达能特殊营养品青岛有限公司青岛疾病预防控制中心

、、()、、

湖北省食品质量安全监督检验研究院丹东海关综合技术服务中心广州海关技术中心厦门海关技术

、、、

中心庄河市检验检测认证技术服务中心沈阳海关技术中心中国疾病预防控制中心中国计量科学研

、、、、

究院中国检验检疫科学研究院上海市质量监督检验技术研究院中国工业微生物菌种保藏管理中心

、、、。

本文件主要起草人雷质文钟文涛王曼霞王云帆王秋艳高元娇武维伟姜勇马弋麻丽丹

:、、、、、、、、、、

何飞丁小平李宏凌莉彭小莉李金霞马维兴杨滔朱金艳吕敬章刘云国卢行安王金玲

、、、、、、、、、、、、、

傅博强杨娇兰陈欣欣

、、。

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为

:

年首次发布为

———2016RB/T151—2016;

本次为第一次修订

———。

Ⅲ

RB/T228—2023

食品微生物定量检测的

测量不确定度评估指南

1范围

本文件描述了食品微生物定量检测的测量不确定度的评估和表示方法

。

本文件适用于食品和食品原料以及食品生产加工贮存相关环境样品中微生物定量分析方法的

,、、

测量不确定度评估和表示其他领域可参考使用

。。

注定量分析方法包括微生物常规平板计数法最可能数法仪器测定方法如阻抗

:、(mostprobablenumber,MPN)、[

测量法三磷酸腺苷测量法和流式细胞计数法

、(adenosinetriphosphate,ATP)]。

本文件不适用于评估食品微生物定量检测系统误差及其修正有关的不确定度分量

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定

GB4789.2

3术语和定义符号

、

31术语和定义

.

下列术语和定义适用于本文件

。

311

..

样本sample

按照某种规则从总体或大量材料中抽取的可以代表总体信息的单个或多个个体或一定比例的

()、(

材料在一定情况下可以作为判定该总体或其生产过程情况的依据

),。

312

..

实验室样品laboratorysample

送往实验室待检测的样本

(3.1.1)。

313

..

测试样品testsample

依照方法标准要求利用实验室样品制备的样品

,(3.1.2)。

314

..

测试部分testportion

从测试样品中称取或吸取一定量质量或体积具有代表性的部分用以制备起始稀释样

(3.1.3),(),

品匀液

。

注液体样品可以选择一定量具有代表性的原液作为测试部分

:。

1

RB/T228—2023

315

..

被测量measurand

拟测量的量

。

来源

[:JJF1001—2011,4.7]

316

..

偏差bias

测量偏差

measurementbias

测量结果的期望值与真值或可接受的参考值之间的差异系统误差的估计值

,。

注1与随机误差相反偏差是指系统误差的综合其可能是由一个或多个系统误差引起

:,,。

注2测量结果与真值或接受参考值之差越大偏差值越大

:,。

注3系统误差是指在重复测量中保持不变或按可预见方式变化的测量误差的分量

:。

注4随机误差是指在重复测量中按不可预见方式变化的测量误差的分量

:。

来源有修改

[:GB/T3358.1—2009,1.33,]

317

..

标准偏差standarddeviation

SD

对同一被测量进行n次测量表征测量结果分散性的量

(3.1.5),。

注1n次测量中某单个测得值为xi的试验标准偏差可按照贝塞尔公式计算

:SD:

n

i2

ixx

=1()

Sxi-

()=∑n

-1

式中

:

xi第i次测量的测得值

———;

n测量次数

———;

xn次测量所得一组测得值的算术平均值

———。

注2n次测量的算术平均值x的标准偏差Sx为SxSxin

:()()=()/。

来源有修改

[:JJF1001—2011,5.17,]

318

..

测量重复性measurementrepeatability

在同一实验室由同一操作员使用同一设备按相同的测试方法在较短时间间隔内对同一对象进

,,,

行测试所获得的测试结果之间的一致性

。

来源有修改

[:JJF1001-2011,5.13,]

319

..

实验室内再现性intralaboratoryreproducibility

中间精密度intermediateprecision

在同一实验室由不同操作员使用不同设备按相同的测试方法对同一或类似测试样品进

,,,(3.1.3)

行测试所获得的测试结果之间的一致性

。

来源有修改

[:JJF1001—2011,5.12,]

3110

..

测量不确定度measurementuncertaintyMU

;

与测量结果相关联的参数用来表征合理赋予被测量值的分散性

,(3.1.5)。

注1此参数可以是标准偏差或其倍数也可以是给定置信概率的置信区间的半宽度

:,。

注2测量不确定度一般由多个分量组成其中一些分量可以用测量结果的统计分布来进行测算并且以试验标准

:,,

偏差表示而另一些分量可以根据经验或其他信息的假定概率分布来进行测算并且也以标准偏差表示

;,。

注3测量结果为被测量值的最佳估计所有不确定度的分量都与分散性有关

:。。

2

RB/T228—2023

来源有修改

[:JJF1001—2011,5.18,]

3111

..

标准不确定度standarduncertainty

以标准偏差表示的测量不确定度

。

来源

[:JJF1001—2011,5.19]

3112

..

技术不确定度technicaluncertainty

在食品微生物定量检测程序中因技术操作的可变性引起的不确定度

,。

注在制备起始稀释样品匀液和后续稀释样品匀液时技术不确定度包括从实验室样品选取测试部分

:,(3.1.2)

时的取样混匀和稀释的可变性以及培养过程和培养基变化等因素的影响

(3.1.4)、,。

3113

..

基质不确定度matrixuncertainty

测试部分不能真实代表实验室样品而产生的不确定度

(3.1.4)(3.1.2)。

3114

..

分布不确定度distributionaluncertainty

微生物在实验室样品起始稀释样品匀液和随后的梯度稀释过程中分布不均产生的不确

(3.1.2)、

定度

。

注基于微生物在样品匀液中的特性通常采用泊松分布模型但是当部分结果需要进一步确认或者使用

:,。,,MPN

法时其分布可能不符合泊松分布

,。

3115

..

泊松不确定度Poissonuncertainty

对于平板计数法假设微生物在接种液中随机分布符合泊松分布模型而产生的不确定度

,。

3116

..

确证不确定度confirmationuncertainty

对于部分平板计数法需要使用确证试验对假定的目标菌总数进行修正假设菌落为均匀分布使

,。,

用二项分布来计算某一特定结果而产生的不确定度

。

3117

..

最可能数不确定度mostprobablenumberuncertainty

基于多次检出或未检出结果组合的最大似然估计得到最可能数而产生的不确定度

(MPN)。

3118

..

合成标准不确定度combinedstandarduncertainty

由在一个测量模型中各输入量的标准测量不确定度获得的输出量的标准测量不确定度

。

注均属于标准测量不确定度

:3.1.12~3.1.17。

来源

[:JJF1001—2011,5.22]

3119

..

包含因子coveragefactor

为获得扩展不确定度对合成标准不确定度所乘的大于的数

,1。

注包含因子通常用符号k表示

:。

来源

[:JJF1001—2011,5.30]

3120

..

扩展不确定度expandeduncertainty

确定测量结果区间的量使被测量的结果分布的大部分包含在此区间内

,(3.1.5)。

注1此区间也被称为包含概率或区间的置信水平置信概率

:()。

注2扩展不确定度有一个明确的扩展区间使一个特定的置信概率与扩展不确定度所规定的区间结合起来对测

:,。

3

RB/T228—2023

量结果及其合成标准不确定度所表示的概率分布进行明确或隐含假设这个区间的置信概率只有在这些假设

,

验证成立的范围内有效

。

注3扩展不确定度U是由合成标准不确定度uy和包含因子k计算得出的Ukuy

:c():=×c()。

来源有修改

[:JJF1001—2011,5.27,]

32符号

.

下列符号适用于本文件

。

C对于菌落计数方法用于计算结果的所读取的菌落数量总和

∑:,。

k包含因子

:。

n对于需要部分确证的菌落计数方法n为实际确证菌落数

c:,c。

n对于需要部分确证的菌落计数方法n为所测试的疑似菌落数

p:,p。

标准偏差

SD:。

SIR实验室内再现性或中间精密度标准偏差

:。

SR再现性标准偏差

:。

Sr重复性标准偏差

:。

U扩展不确定度

:。

u标准不确定度

:。

u分布不确定度

distrib:。

u技术不确定度

tech:。

u确证不确定度

conf:。

u基质不确定度

matrix:。

u最可能数不确定度

MPN:。

u泊松不确定度

Poisson:。

uy合成标准不确定度

c():。

4总则

41不确定度分量

.

测量不确定度通常包含多个分量本文件考虑以下三种不同类型的不确定度分量

。:

技术不确定度u第章

a)tech(5);

基质不确定度u第章

b)matrix(6);

分布不确定度u第章

c)distrib(7)。

注1食品微生物定量检测通过关键技术因素的优化和控制得到最佳估计值因标准值或参考量值一般不适用故

:。,

不考虑系统误差的评估和修正

。

注2对每一类型的分布不确定度均可基于数学方法进行计算

:。

注3以上三个不确定度分量中技术不确定度通常是最大的

:,。

42合成标准不确定度

.

本文件提供了两种方法来评估检测结果的合成标准不确定度

:

分别计算报告值的技术不确定度分量第章基质不确定度分量第章和分布不确定度

a)(5)、(6)

分量第章然后将三种分量合成第章

(7),(8)。

根据实验室规定以及客户要求可仅使用技术不确定度代替合成标准不确定度报告结果

b),。

4

RB/T228—2023

5技术不确定度

51不确定度主要来源的识别

.

511关键技术因素

..

与平板计数法或最可能数法技术不确定度相关的关键操作环节包括

(MPN):

从实验室或测试样品中称取或吸取测试部分

a)();

制备起始稀释样品匀液

b);

连续梯度稀释

c);

接种

d);

培养

e);

菌落计数过程和或生长状况如法

f)/(MPN);

确证适用时

g)()。

图列出了食品微生物学定量检测的测量不确定度的主要来源可能影响不确定度且宜加以控制

1。

的关键技术因素具体包括培养基和或试剂的来源和类型样品稀释接种和培养过程计数方法人工

,/、、、(

计数或自动计数以及不同操作人员操作团队的变化等

)()。

图1食品微生物学定量检测的测量不确定度的主要来源

512抽样不确定度

..

抽样不确定度即从一批待抽检样品中抽取实验室样品