YC/T 182-2004 烟草及烟草制品 吡虫啉农药残留量的测定 高效液相色谱法

ICS65.160

X87

备案号:14400-2004Yg

中华人民共和国烟草行业标准

YC/T182-2004

烟草及烟草制品毗虫琳农药残留量的测定

高效液相色谱法

Tobaccoandtobaccoproducts-Determinationofimidaclopridresidue-

Highperformanceliquidchromatographicmethod

2004-10-19发布2005-03-01实施

国家烟草专卖局发布

YC/T182-2004

前言

本标准的附录A为资料性附录。

本标准由国家烟草专卖局提出。

本标准由全国烟草标准化技术委员会(TC144)归口。

本标准起草单位:国家烟草质量监督检验中心、郑州大学分析测试中心、中国科学技术大学烟草与

健康研究中心。

本标准主要起草人:唐纲岭、张书胜、蔡继宝、朱永平、张威、谢雯燕、佘永祯、刘惠民。

YC/T182-2004

烟草及烟草制品毗虫琳农药残留量的测定

高效液相色谱法

1范围

本标准规定了烟草中毗虫琳农药残留量的液相色谱测定方法。

本标准适用于烟草和烟草制品。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T5606.1卷烟第1部分:抽样

GB/T19616烟草成批原料取样的一般原则(GB/T19616-2004,ISO4874:2000,MOD)

YC/T31烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法

3原理

用乙酸乙酷提取样品中的毗虫琳农药残留，以5%氯化钠溶液和二氯甲烷液一液分配净化，浓缩定

容后用高效液相色谱仪/紫外检测器测定。

4试剂与材料

水应为蒸馏水或同等纯度的水‘所有试剂应适用于农药残留量分析。

4.1毗虫琳，标准品。

4.2甲醇，需重蒸并验证。

4.3石油醚，沸程350C-600C，需重蒸并验证。

4.4二抓甲烷，需重蒸并验证。

4.5乙酸乙酷，需重蒸并验证。

4.6石英玻璃棉，经硅烷化处理后方可使用。

4.7无水硫酸钠，分析纯(550℃干燥至少2h),

4.8抓化钠溶液，5%(质量分数)。

4.9盐酸溶液，6mol/L。在通风橱中，将54mL盐酸缓慢加入30mL水中，用水稀释至100mL,

4.10流动相，乙睛:5mmol/L乙酸钱(1，4)(体积比)。

4.11标准储备液:称取0.01g(精确至0.0001g)毗虫琳(4.1)于100mL容量瓶中，用甲醇定容，配制

成浓度约为100pg/ml一的标准储备液。标准储备液避光贮存于。'C-4℃条件下，可至少稳定6个月。

4.12工作标准液:分别移取一定体积的标准储备液((4.11)于10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配

制浓度分别约为100pg/ml50j.g/mL,20pg/mL,10pg/ml,,5.0ttg/ml,,2.0pg/mL,1.0ug/mL,

0.2lg/mL的系列工作标准液。即配即用。

5仪器

常用实验仪器及下述各项:

YC/T182-2004

5.1三角瓶，300mL,

5.2量筒，100mL,

5.3分液漏斗，500mL,

5.4玻璃漏斗。直径45mm或100mm.

5.5带尾管浓缩瓶，250ml-(尾管在1.0mL,2.0mL,2.5mL,3.0mI.,4.0mL,5.0mL和10mL处

有刻度)。

5.6旋转蒸发仪。

5.7容量瓶，50mL,100mI。

5.8超声波清洗器

5.9高速匀浆机。

5.10微膜过滤器，配0.451cm微膜。

5.11高效液相色谱仪，配紫外检测器。

6采样及试样制备

6.1按GB/T5606.1或GB/T19616抽取样品。

6.2按YC/T31制备试样，并测定水分含量。

7分析步骤

7.1提取

称取10g烟末(精确至0.01g)于300mI三角瓶(5.1)中，加人100ml乙酸乙醋(4.5)，超声波

(5.8)提取30min，或用高速匀浆机((5.9)匀浆2min，静置分层。将上层清液转移到装有石英玻璃棉

(4.6)的漏斗中，过滤。

7.2净化

取50m1滤液转移到分液漏斗(5.3)中，加人100mL石油醚(4.3)，用3X100mI,5%氯化钠溶液

(4.8)液一液分配，合并水相，弃去有机相。水相加人1.0mL6mot/L的盐酸溶液((4.9)，用3X50mL二

氯甲烷((4.4)液一液分配，合并有机相，弃去水相。将有机相倒入铺有2cm厚无水硫酸钠((4.7)的漏斗过

滤，滤至带尾管的浓缩瓶(5.5)中。用旋转蒸发仪(5.6)(水浴温度小于40'C)浓缩近干，必要时氮吹。

然后加人1.5mL甲醇(4.2)，超声溶解，用水定容至3.0mL,O.45pm微膜((5.10)过滤。滤液待高效液

相色谱分析。

7.3标准曲线的制作

用工作标准溶液((4.12)制备标准曲线。其浓度范围应覆盖预计检测到的样品含量。外标法定量。

毗虫琳色谱图见图A.1所示

7.4液相色谱条件

a)色谱柱C,。柱(30cmX4.6mm);

b)流动相1mL/min;

c)检测波长270nm;

d)进样量201,1。

8结果计算

以干基计的毗虫琳农药残留量Ro，数值以f,g/g表示，按式(1)进行计算:

c义3

R,X2···。…。.。······.······。…(1)

mX(1一w)

YC/T182-2004

式中:

c—由标准曲线得出的毗虫琳浓度，单位为微克每毫升(pg/-L);

3—溶液最终定容的体积，单位为毫升(mL);

m—试料质量，单位为克(g);

。样品的水分质量分数，0oo

9皿复性、回收率和检出限

本方法的精密度试验研究结果见表1,

表1方法的精密度试验研究结果

F1凡凡

变异系检出限/

农药加人量/回收率/加人量/回收率/加人量/回收率/

数/(%)(1'g/g)

(1'g/g)(%)(pg/g)(%)(Yg/g)(%)

毗虫琳1.6589.85.5593.18.2595.42.30.10

YC/T182-2004

附录A

(资料性附录)

色谱图示例

r/min

1一一不含毗虫咐烟草样品;

2--1.25pg/m工标准溶液;

3—不含毗曳嘛烟草样品+1.65pg毗虫啦;

4—不含毗虫啡烟草样品+5.55ug毗虫琳;

5—不含毗虫琳烟草样品+8.25ug毗虫啦。

图A.毗虫琳色谱图