DB35/T 1761-2018 蜜蜂黑蜂王台病诊断技术

ICS65.140

B47

DB35

福建省地方标准

DB35/T1761—2018

蜜蜂黑蜂王台病诊断技术

DiagnostictechniquesforBlackQueenCellDiseaseofHoneyBees

2018-04-03发布2018-07-03实施

福建省质量技术监督局发布

DB35/T1761—2018

目次

前言................................................................................II

1范围..............................................................................1

2规范性引用文件....................................................................1

3术语和定义........................................................................1

4缩略语............................................................................1

5疾病概述..........................................................................2

6临床诊断..........................................................................2

7实验室诊断........................................................................2

8综合判定..........................................................................5

附录A（规范性附录）溶液的配制......................................................7

附录B（资料性附录）溶液的配制......................................................8

附录C（资料性附录）核酸扩增电泳图..................................................9

I

DB35/T1761—2018

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由福建出入境检验检疫局提出并归口。

本标准起草单位：福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心、福建农林大学、吉林出入境检验检疫

局、厦门瑞德利校准检测技术有限公司。

本标准主要起草人：张体银、郑腾、王武军、黄少康、宋战昀、张永东、张志灯、白泉阳、林杰、

于师宇。

II

DB35/T1761—2018

蜜蜂黑蜂王台病诊断技术

1范围

本标准规定了蜜蜂黑蜂王台病临床诊断、实验室诊断和综合判定。

本标准适用于蜜蜂黑蜂王台病的诊断和蜜蜂黑蜂王台病毒的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

王台queencell

候选蜂王的寝宫，即工蜂为培育蜂王所筑成的巢房。

注：王台亦名“母蜂房”。

3.2

黑蜂王台病blackqueencelldisease

由蜜蜂黑蜂王台病毒（Blackqueencellvirus）引起的蜂王幼虫及蛹感染，并可导致巢房变黑，

进而引发蜜蜂大量死亡的一种严重的蜜蜂病毒病。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

BQCV：黑蜂王台病毒（Blackqueencellvirus）

Ct：循环阈值（Cyclethreshold）

DEPC：焦碳酸二乙酯（Diethypyrocarbonate）

dNTP：三磷酸脱氧核苷酸（Deoxynucleosidetriphosphate）

EB：溴化乙锭（Ethidiumbromide）

RNA：核糖核酸（Ribonucleicacid）

RT-PCR：逆转录聚合酶链式反应（Reversetranscriptionpolymerasechainreaction）

TBE：三羟甲基氨基甲烷-硼酸-乙二胺四乙酸（Trihydroxymethylaminomethane-boricacid-

ethylenediaminetetraaceticacid）

1

DB35/T1761—2018

5疾病概述

蜜蜂黑蜂王台病（Blackqueencelldisease）是由黑蜂王台病毒(Blackqueencellvirus，BQCV)

引起的一种常见的蜜蜂病毒病，春季和初夏高发，主要危害蜂王的幼虫和蛹，并可导致巢房变黑，进而

引发蜜蜂大量死亡，目前已呈全球性分布。

6临床诊断

6.1临床症状

6.1.1患病蜂王幼虫体色变黄，表皮逐渐硬化呈囊状。

6.1.2患病蜂蛹体色变暗，快速死亡。

6.1.3患病蜂王体色先变为灰白色，逐渐再变为黑色，最后王台内壁变成棕色或黑色。

6.1.4成年蜜蜂主要有尾部变黑，体毛脱落、斑纹混乱、蜜蜂吻拉长，严重时无法飞行而只能爬行移

动。

6.2初步诊断

当蜂群出现以上部分或全部临床症状时，可做出初步诊断，确认需要进行实验室诊断。

7实验室诊断

7.1设备、材料和试剂

7.1.1设备

7.1.1.1普通PCR扩增仪。

7.1.1.2荧光PCR仪。

7.1.1.3台式冷冻高速离心机。

7.1.1.4微量移液器