GB/T 18652-2025 致病性嗜水气单胞菌检验方法

ICS11220

CCSB.41

中华人民共和国国家标准

GB/T18652—2025

代替GB/T18652—2002

致病性嗜水气单胞菌检验方法

MethodsfordetectionofpathogenicAeromonashydrophila

2025-08-29发布2026-03-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T18652—2025

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

缩略语

4……………………1

仪器设备

5…………………1

试剂和材料

6………………2

检验程序

7…………………2

样品采集运输和保存

8、……………………3

细菌的分离和纯化

9………………………4

嗜水气单胞菌的鉴定

10……………………4

嗜水气单胞菌致病性鉴定

11………………6

综合判定

12…………………6

附录规范性培养基和试剂的配制

A()…………………7

附录资料性嗜水气单胞菌鉴定基因的产物电泳和参考序列

B()PCR………………9

Ⅰ

GB/T18652—2025

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件代替致病性嗜水气单胞菌检验方法与相比除

GB/T18652—2002《》,GB/T18652—2002,

结构调整和编辑性改动外主要技术变化如下

,:

更改了范围见第章年版的第章

a)(1,20021);

增加了缩略语一章见第章

b)“”(4);

增加了仪器设备一章见第章

c)“”(5);

增加了试剂和材料一章见第章

d)“”(6);

增加了样品采集运输和保存见第章

e)“、”(8);

增加了鉴定试验方法见

f)PCR(10.2);

删除了斑点酶联免疫试验见年版的

g)(20022.3.2);

增加了血平板试验见

h)(11.2);

增加了综合判定见第章

i)(12)。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出

。

本文件由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本文件起草单位南京农业大学中国检验检疫科学研究院

:、。

本文件主要起草人刘永杰董雨豪王娜陆承平

:、、、。

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为

:

年首次发布为

———2002GB/T18652—2002;

本次为第一次修订

———。

Ⅲ

GB/T18652—2025

引言

嗜水气单胞菌Aeromonashydrophila在自然界中分布广泛有致病菌株和非致病菌株之分致

(),。

病菌株能感染鱼类两栖类爬行类鸟类哺乳类等动物导致急性败血症或皮肤溃疡等局部感染在

、、、、,。

水产养殖上致病性嗜水气单胞菌是引起淡水鱼细菌性败血症的主要病原人类感染致病性嗜水气单

,。

胞菌主要表现为急性胃肠炎

。

嗜水气单胞菌的致病性与其产生的毒力因子密切相关其中胞外产物如毒素和蛋白酶在该菌致病

,,

过程中发挥重要的作用嗜水气单胞菌产生的毒素主要有气溶素溶血素细胞毒性肠毒素和细胞兴奋

。、、

性肠毒素这些毒素属于穿孔毒素在结构和功能上非常相似具有相同的生物学活性表现为溶血性

,,,,、

肠毒性和细胞毒性嗜水气单胞菌还分泌多种蛋白酶降解酪蛋白弹性蛋白等对组织造成直接损

。,、,

伤也是非常重要的毒力因子因此凡是溶血阳性或蛋白酶阳性的嗜水气单胞菌均具有致病性通过

,。,。

检测菌株的溶血活性和或蛋白酶活性能够鉴定嗜水气单胞菌的致病性

/,。

Ⅳ

GB/T18652—2025

致病性嗜水气单胞菌检验方法

1范围

本文件描述了嗜水气单胞菌分离纯化理化鉴定和鉴定方法以及致病性嗜水气单胞菌检验的

、PCR

脱脂奶平板和血平板试验鉴定方法

。

本文件适用于嗜水气单胞菌和致病性嗜水气单胞菌的检验

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

出入境动物检疫采样

GB/T18088

水生动物产地检疫采样技术规范

SC/T7103

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

脱氧核糖核酸

DNA:(Deoxyribonucleicacid)

gyrB促旋酶亚单位

:DNAB(DNAgyraseBsubunit)

聚合酶链反应

PCR:(Polymerasechainreaction)

三羟甲基氨基甲烷乙酸乙二胺四乙酸缓冲液

TAE:--(Tris-aceticacid-EDTAbuffer)

5仪器设备

51恒温培养箱

:。

.28℃±1℃

52干式恒温金属浴

.。

53高速低温离心机转速不低于

.:12000r/min。

54二级生物安全柜或超净工作台

.。

55扩增仪

.PCR。

56凝胶成像系统

.。

57微量移液器量程

.:1μL~10μL、20μL~200μL。

58核酸电泳仪

.。

59高压灭菌锅

.。

510冰箱或以下

.(4℃、-20℃)。

1

GB/T18652—2025

511光学显微镜倍物镜

.(100)。

512无菌滤器滤膜

.