GB/T 32016-2015 蚕丝 氨基酸的测定

ICS5908001

W40..

中华人民共和国国家标准

GB/T32016—2015

蚕丝氨基酸的测定

Silk—Determinationofaminoacids

2015-09-11发布2016-04-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T32016—2015

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由中国纺织工业联合会提出

。

本标准由全国丝绸标准化技术委员会归口

(SAC/TC401)。

本标准主要起草单位浙江丝绸科技有限公司广州纤维产品检测研究院鑫缘茧丝绸集团股份有

:、、

限公司苏州大学江门出入境检验检疫局杭州市质量技术监督检测院广东出入境检验检疫局浙江

、、、、、

省检验检疫科学技术研究院

。

本标准主要起草人伍冬平李天宝吴淑焕徐昊楠孙道权左保齐湛权刘雨肖海龙顾虎

:、、、、、、、、、、

李淳周颖吴刚

、、。

Ⅰ

GB/T32016—2015

蚕丝氨基酸的测定

1范围

本标准规定了蚕丝中氨基酸成分及含量的分析测定方法

。

本标准适用于蚕丝中十八种氨基酸组分的测定天冬氨酸苏氨酸丝氨酸谷

。(Asp)、(Thr)、(Ser)、

氨酸甘氨酸丙氨酸缬氨酸异亮氨酸亮氨酸酪氨酸苯

(Glu)、(Gly)、(Ala)、(Va1)、(Ile)、(Leu)、(Tyr)、

丙氨酸赖氨酸组氨酸精氨酸脯氨酸采用酸水解法测定胱氨酸

(Phe)、(Lys)、(His)、(Arg)、(Pro),

和蛋氨酸若采用酸水解法不能准确测定应采用氧化水解法测定色氨酸采用碱水解

(Cys)(Met)、,(Trp)

法测定其最低检出限均为

。10pmol。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

纺织品调湿和试验用标准大气

GB/T6529

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

数值修约规则与极限数值的表示和判定

GB/T8170

3方法原理

酸碱水解法蚕丝蛋白在高温酸性或碱性溶液中会发生水解水解成的氨基酸可用离子交换色谱

、:,

法进行分离和测定氧化水解法蚕丝蛋白中含硫氨基酸胱氨酸蛋氨酸用过甲酸氧化并经盐酸水

。:(、),

解生成磺基丙氨酸和蛋氨酸矾此两种产物可用离子交换色谱法分离和测定

,。

4试剂与材料

41要求

.

浓盐酸为优级纯其他试剂如无特别注明均为分析纯

(12mol/L),,。

42水

.

符合二级水要求

GB/T6682。

43氮气

.

纯度为

99.99%。

44酸水解法

.

441酸解剂用水将浓盐酸稀释至

..:6mol/L。

442冷冻剂液氮干冰乙醇或干冰丙酮

..:、。

443稀释上机用缓冲液用水将浓盐酸稀释至

..:0.02mol/L。

1

GB/T32016—2015

444不同和离子强度的洗脱用缓冲液与再生液可按仪器说明书配制配制方法如下

..pH(),:

的柠檬酸钠缓冲液称取柠檬酸钠和浓盐酸

a)pH=2.2:19.6g(Na3C6H5O7·2H2O)16.5mL

加水稀释到用浓盐酸或的氢氧化钠溶液调节至

1000mL,500g/LpH2.2;

的柠檬酸钠缓冲液称取柠檬酸钠和浓盐酸加水稀释到用

b)pH=3.3:19.6g12mL1000mL,

浓盐酸或的氢氧化钠溶液调节至

500g/LpH3.3;

的柠檬酸钠缓冲液称取柠檬酸钠和浓盐酸加水稀释到用浓

c)pH=4.0:19.6g9mL1000mL,

盐酸或的氢氧化钠溶液调节至

500g/LpH4.0;

的柠檬酸钠缓冲液称取柠檬酸钠和氯化钠优级纯加水稀释到

d)pH=6.4:19.6g46.8g()

用浓盐酸或的氢氧化钠溶液调节至

1000mL,500g/LpH6.4;

再生液称取氢氧化钠优级纯和乙醇色谱纯加水稀释至

e)RG:8g()100mL()1000mL。

445茚三酮溶液可按仪器说明书配制配制方法如下

..(),:

的乙酸锂溶液称取氢氧化锂加入冰乙酸优级纯加

a)pH=5.2:(LiOH·H2O)168g,()279mL,

水稀释到用浓盐酸或的氢氧化钠溶液调节至

1000mL,500g/LpH5.2;

茚三酮溶液取二甲基亚砜和乙酸锂溶液加入水和茚三酮

b):150mL(C2H6OS)50mL4g

和还原茚三酮

(C9H4O3·H2O)0.12g(C18H10O6·2H2O)。

446混合氨基酸标准储备液含甘氨酸丙氨酸缬氨酸亮氨酸异亮氨酸丝氨酸苏氨酸天冬氨

..:、、、、、、、

酸谷氨酸赖氨酸精氨酸蛋氨酸胱氨酸苯丙氨酸赖氨酸组氨酸脯氨酸等种常规蛋白水解液

、、、、、、、、、17

分析用色谱纯氨基酸各组分浓度为或

,2.50μmol/mL(2.00μmol/mL)。

447混合氨基酸标准工作液吸取一定量的混合氨基酸标准储备液置于容量瓶中以

..:(4.4.6)50mL,

稀释上机用缓冲液定容混匀使各氨基酸组分浓度为

(4.4.3),,100nmol/mL。

45氧化水解法

.

451过甲酸溶液将过氧化氢与甲酸按的体积比混合于室温下放置