GB/T 19495.4-2018 转基因产品检测 实时荧光定性聚合酶链式反应(PCR)检测方法

ICS65.020.01

B16

国；

中华人民共和国国家标准

GB/T19495.4-2018

代替GB/T19495.4-2004

转基因产品检测

实时荧光定性聚合酶链式反应（PCR)

检测方法

Detectionofgeneticallymodifiedorganismsandderivedproducts-

Qualitativereal-timepolymerasechainreaction(PCR)methods

2018-09-17发布2019-04-01实施

国家市场监督管理总局啦舍

中国国家标准化管理委员会＆叩

GB/T19495.4-2018

目u昌

GB/T19495《转基因产品检测》分为如下几部分：

一－GB/T19495.1转基因产品检测通用要求和定义；

GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求；

GB/T19495.3转基因产品检测核酸提取纯化方法；

一－GB/T19495.4转基因产品检测实时荧光定性聚合陌链式反应（PCR）检测方法；

一一－GB/T19495.5转基因产品检测实时荧光定量聚合陌链式反应（PCR）检测方法；

一－GB/T19495.6转基因产品检测基因芯片检测方法；

一－GB/T19495.7转基因产品检测抽样和制样方法；

GB/T19495.8转基因产品检测Jj蛋向质检测方法；

GB/T19495.9转基因产品检测植物产品液相芯片检测方法。

本部分为GB/T19495的第4部分。

本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本部分代替GB/T19495.4-2004《转基因产品检测核酸定性PCR检测方法》。与GB/T19495.4-

2004相比，除编辑性修改外，主要技术变化如下：

增加了柏物内源基因的检测方法；

一一增加了转基因植物筛选基因的检测方法；

－一删除了结构基因检测方法，增加了大豆、玉米、油菜籽、棉花、水稻、马铃薯、亚麻和甜菜等作物

的品系特异性检测方法。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本部分向全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271）提出井归IJO

本部分主要起草单位：中同检验检疫科学研究院、中华人民共和同山东出入境检验检疫局、中华人

民共和国上海内入境检盼检疫局、中华人民共和同深圳出入境检验检疫局、中华人民共和同辽宁州入境

检验检疫局。

本部分主要起草人：黄菊i、高宏伟、李想、凌杏同、朱水芳、陈洪俊、潘良文、曹际娟、章桂明。

本部分所代替标准的历次版本发布情况为：

GB/T19495.42004o

I

GB/T19495.4-2018

表A.1（续）

终浓度产物大小

序号基因／品系名称可｜物／探针序列（5’－3’）适用范围

nmol/Lbp

Ftggtgagcgttttgcagtct200

10PLDRctgatccactagcaggaggtcc20064

pFAM-tgttgtgctgccaatgtggcctg-BHQl200

水稻内源基因

Ftggtgagcgttttgcagtct200

11GOSRctgatccactagcaggaggtcc20067

pFAMtgttgtgctgccaatgtggcctgBHQl200

Fggacatgtgaagagacggagc400

12UGPaseRcctacctctacccctccgc40088马铃薯内源基因

pFAM-ctaccaccattacctcgcacctcctca-BHQl200

Fagtttgtaggttttgatgttacattgag350

13Si\H7Rgcatctttgaaccgcctactg250115棉花内源基因

pFi\MaaacataaaataatgggaacaaccatgacatgtBHQl175

Fgacctccatattactgaaaggaag150

14GLu八3Rgagtaattgctccatcctgttca150121百｜｜菜内源基因

pFAMctacgaagtttaaagtatgtgccgctc-BHQl100

Fcaacaattttctcagccccaaca200

15GAG56Rtcttgcatgggttcacctgtt200121小麦属内源基因

pFAMttcccgcagccccaacaaccgcBHQl200

Fgtcgcgggaacagaggtgt500

16WxOlZRggtgttcctccattgcgaaa500102小麦和1，内源基因

pFAMcaaggcggccgaaataagttgccBHQl200

Fgatcagtgaacttcgcaaagtac400

17Alfalfa-AceRcaacgacgtgaacactacaac40090百棺内源基因

pFAMtgaatgctcctgtgatctgcccatgcTAMRA200

Fccatgcggatcctccca500

18CHYRcatcgtagccattgtaacactagctaa50074水瓜内源基因

pFAMttcccttcatccattcccactcttgagaBHQl200

Fgcctctgccgacagtggt100转基因大豆、玉

米、油菜、棉花、

19pCaM飞135SRaagacgtggttggaacgtcttc10082水稻、番茄、马

铃薯、番水瓜等

pFAMcaaagatggacccccacccacgBHQl100

外源筛选基因

9

GB/T19495.4-2018

表A.1（续）

终浓度产物大小

序号基因／品系名称引物／探针序列（5'-3’)适用~·e:囚

nmol/Lbp

Fcgaagacttaaagttagtgggcatct400转基因大旦、油

菜、马铃薯、番

20pF扣rv35SRttttgtctggtccccacaa40079茄、玉米、棉花

和盲稽等筛选

pFAMtgaaagtaatcttgtcaacatcgagcagctggBHQl200

检测

Fatcgttcaaacatttggca400转基因大豆、玉

米、水稻、油菜、

21tNOSRattgcgggactctaateata400165棉花、小麦、番

茄、马铃薯、番木

pFAMcatcgcaagaccggcaacaggBHQl200

瓜等筛选检测

Faggatctcgtcgtgacccat400转基因油菜、棉

花、玉米、古｜｜菜、

22NPTIIRgcacgaggaagcggtca400183番茄、马铃薯、

番木瓜等筛选

pFAMcacccagccggccacagtcgat-BHQl200

检测

Facaagcacggtcaacttcc400

转基因油菜、玉

米、小麦、棉花、

23BARRactcggccgtccagtcgta400175

水稻、大豆等筛

pFAMccgagccgcaggaaccgcaggagBHQl200选检测

Fgtcgacatgtctccggagag400

转基因油菜、

玉米、棉花、大

24P八TRgcaaccaaccaagggtatc400191

豆、古｜｜菜等筛选

pFAMtggccgcggtttgtgatatcgttaaBHQl200检测

Fgtcttcgtgttgctggaaccgtt400

转基因油菜、玉

25GOXRgaactggcaggagcgagagct400121米、古｜｜菜等筛选

pFAMtgctcacgttctctacactcgcgctcgBHQl200检测

Fgcaaatcctctggcctttcc100

转基因油菜、大

立、玉米、棉花、

26CP4-EPSPSRcttgcccgtattgatgacgtc100146

马铃薯、古It菜、小

pFAMtcatgttcggcggtctcgcgBHQl200麦等筛选检测

FTccggttacgaggttctt400

转基因玉米、

27Cry3ARccatagatttgagcgtcctta40086马铃薯等筛选

pFAMacctatgctcaagctgccaacacccBHQl200检测

Fgtgaccttaggcgacttttgaac340

转基因油菜、

28pNOSRcgcgggtttctggagtttaa34079

马铃薯

pFAMcgcaataatggtttctgacgtatgtgcttagc-BHQl400

10

GB/T19495.4-2018

表A.1（续）

终浓度产物大小

可｜物／探针序列（5’－3’）

适用范围

序号基因／品系名称

nmol/Lbp

Fggcctaaggagaggtgtggaga340

转基因油菜、

29pSSuAraRetcatagataacgataagattcatggaatt34095对拟南芥是

pFAMccttatcggcttgaaccgctggaataaBHQl400内源基因

Fgaagctgtgctagagaagatgtttattc340

转基因油菜、

30pTA29Rgctcgaagtatgcacatttagcaa340117对烟草是内

pFAMagtccagccacccaccttatgcaagtc-BHQl400源基因

Fgagtagataatgccagcctgttaaac340

转基因棉花、

31pUbiRacgcgacgctgctggtt34076对玉米是内

pFAMcgtcgacgagtctaacggacaccaacBHQl400源基因

Fggggtttcttatatgctcaacacatg340

转基因玉米、

32tCaMV35SRtcaccagtctctctctacaaatctatcac340118

油菜

pFAM·aaaccctataagaaccctaattcccttatctgggaBHQl400

Ftgagaatgaacaaaaggaccatatca200转基因玉米、大

豆、油菜、棉花、

33tE9Rtttttattcggttttcgctatcg20087

对豌旦是内源

pFAM·tcattaactcttctccatccatttccatttcacagtBHQl200

基因

Fcggtcaaacctaaaagactgattaca340

34tOCSRcgctcggtgtcgtagatact34085转基因油菜

pFAMtcttattcaaatttcaaaagtgccccagggBHQl400

Fatgcaagtttaaattcagaaatatttcaa340

35tg7Ratgtattacacataatatcgcactcagtct34097转基因油菜

pFAMactgattatatcagctggtacattgccgtagatgaBHQl400

FCcgggtgaatcagcgttt200

36PMIRGccgtggcctttgacagt20059转基因玉米

pFAM-tgccgccaacgaatcaccgg-]3HQl200

Fcgcgactggatcaggtaca400

转基因大米、玉

37CrylA(b)Rtggggaacaggctcacgat40075米、棉花等外源

pFAM-ccgccgcgagctgaccctgaccgtg-BHQl200筛选基因

Fcggaaatgcgtattcaattcaac400

38CRYIACc)Rttctggactgcgaacaatgg40071

pFAMacatgaacagcgccttgaccacagcBHQl200任选其一，

转基因水稻、

Fgaccctcacagttttggacattg400

玉米、棉花

39CRYIA(c)Ratttctctggtaagttgggacact40093

pFAMtcccgaactatgactccagaacctaccct日teeBHQl200

11

GB/T19495.4-2018

表A.1（续）

终浓度产物大小

序号基因／品系名称引物／探针序列（5'-3’)适用~·e:囚

nmol/Lbp

Ftcgaggtcattcatatgcttgag340

转基因玉米、

40pRiceEactinRttttaactgθtgttttcacttttgacc34095对大米是内

pFAMagagagtcgggatagtccaaaataaaacaaaggtaBHQl400源基因

Fgggatgacgttaattggctctg375

转基因大豆、玉

41CTP2CP4EPSPSRggctgcttgcaccgtgaag37588

米、棉花、百猫

pFAMcacgccgtggaaacagaagacatgaccBHQl150

12

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