GB/T 19495.5-2018 转基因产品检测 实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测方法

ICS65.020.01

B16

国

中华人民共和国国家标准

G吕／T19495.5-2018

代替GB/T19495.5-2004

转基因产品检测

实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR)

检测方法

Detectionofgeneticallymodifiedorganismsandderivedproducts-

Quantitativereal-timepolymerasechainreaction(PCR)methods

2018-09-17发布2019-04-01实施

国家市场监督管理总局峪非

中国国家标准化管理委员会0(..'I(J

GB/T19495.5-2018

目u昌

GB/T19495《转基因产品检测》分为如下几部分：

一－GB/T19495.1转基因产品检测通用要求和定义；

GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求；

GB/T19495.3转基因产品检测

核酸提取纯化方法；

一－GB/T19495.4转基因产品检测实时荧光定性聚合陌链式反应（PCR）检测方法；

一－GB/T19495.5转基因产品检测实时荧光定量聚合陌链式反应（PCR）检测方法；

GB/T19495.6转基因产品检测

基因芯片检测方法；

一－GB/T19495.7转基因产品检测抽样和制样方法；

GB/T19495.8转基因产品检测

蛋向质检测方法；

一－GB/T19495.9转基因产品检测植物产品液相芯片检测方法。

本部分为GB/T19495的第5部分。

本部分按照GB/T1.12009给出的规则起草。

本部分代替GB/T19495.52004《转基因产品检测核酸定量PCR检测方法》。与GB/T19495.5

2004相比，｜东编辑性修改外主要技术变化如下：

一一修改了标准的适用范固；

一一增加了分别基于基体标准物质以及质粒标准分子对样品中转基因植物品系进行定量检测的操

作规程；

增加了大豆、玉米、油菜、棉花、水稻、马铃薯、甜菜和木瓜等转基因植物品系拷贝数百分含量的

定量检测方法。

本部分向全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271）提出井归IJO

本部分起草单位：中同检验检疫科学研究院、中华人民共和同上海出入境检验检疫局、中华人民共

和国山东阳入境检验检疫局、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。

本部分主要起草人：黄新、李想、高宏伟、凌子导同、朱水芳、陈洪俊、潘良文、曹际娟、章桂明。

本部分所代替标准的历次版本发布情况为：

一一－GB/T19495.52004。

I

GB/T19495.5-2018

附录A

（资料性附录）

实时荧光定量PCR检测引物／探针

实时荧光定量PCR检测引物／探专｜序列和加入浓度见表A.l。

表A.1实时荧光定量PCR检测引物／探针序列和加入浓度

终浓度产物大

内标准基因习｜物／

物非1,

序列（5’－3’）

备注

或品系探针(nM)小／bp

正｜句ttgcgcctgaacggatat400

SPS反｜句cggttgatcttttcgggatg40081

探针FJ\MtccgagccgtccgtgcgtcBHQl200

内标准基因

正｜句tggtgagcgttttgcagtct200

PLD反｜句ctgatccactagcaggaggtcc20064

探针FAMtgttgtgctgccaatgtggcctgBHQl200

正JoJagagactggtgatttcagcggg400

TT51l

反JoJgcgtccagaaggaaaaggaata400119

CBt63)

探针FAMatctgccccagcactcgtccgBHQl200

正J岛Jagctggcgtaatagcgaagagg400

LLRice62反J岛Jtgctaacgggtgcatcgtcta40088

探针F1飞McgcaccgattatttatacttttagtccacctBHQl200

水稻

正向tctaggatccgaagcagatcgt400

LLRice601反向ggagggcgcggagtgt40068

探针FJ\MccacctcccaacaataaaagcgcctgBHQl200

正｜句gcttggatcagattgtcgttt400

科丰6反｜闪gtcagataaactgattggtctgat400154

探针FJ\McgacaaaagatcaggatttgggBHQl200

正l;,Jtccgcaatgtgttattaagttgtctaa300

克螺稻I号反｜句ccgatatgcctgcccatct90078

探针FAMcgtcaatttgtttacaccacaatatatcccgBHQl100

正｜句tggccgtatccgcaatgtg300

GoldenRice2反JoJgctgcgcctctaaccaggtat300121

探针FJ\MtcgatatgattccttcatcgagcgagcBHQl150

正JoJattgtgatgggacttgaggaaga150

棉花八CPl反｜句cttgaacagttgtgatggattgtg15076内标准基因

探针Fl\M-attgtcctcttccaccgtgattccgaa-BHQl50

9

GB/T19495.5-2018

表A.1（续）

内标准基因引物／终浓度产物大

物非1,

序列（5’3’）备注

或品系探针(nM)小／bp

正｜臼jagtttgtaggttt.tgatgttacattgag350

SAH7反｜臼jgcatctttgaaccgcctactg250115内标准基因

探针FJ\MaaacataaaataatgggaacaaccatgacatgtBHQl175

正l臼jtcccattcgagtttctcacgt150

扣fON531反｜臼jaaccaatgccaccccactga15072

探针FJ\M-ttgtccctccacttcttctc-BHQl50

正JaJggagtaagacgattcagateaaacac150

MON1445反JaJatcgacctgcagcccaagct15087

探针FJ\MatcagattgtcgtttcccgccttcagtttBHQl50

正JaJgttactagatcggggatatcc150

MON15985反JaJaaggttgctaaatggatggga15082

探针FJ\MccgctctagaactagtggatctgcactgaaBHQl50

正JaJggctttggctaccttaagagagtc500

MON88913反JaJcaaattacccattaagtagccaaattac50094

探针FJ\MaactatcagtgtttgactacatMGBNFQ100

正JaJcagatttttgtgggattggaattc400

棉花LLCotton25反J臼Jcaaggaactattcaactgag40079

探针FJ\McttaacagtactcggccgtcgaccgcBHQl200

正J臼Jcaaatacacttggaacgacttcgt400

GHB614反J臼Jgcaggcatgcaagcttttaaa400119

探针FJ\MctccatggcgatcgctacgttctagaattBHQl200

正JaJcteattgctgatccatgtagatttc350

281-24-236反JaJggacaatgctgggctttgtg450111

探针FJ\MttgggttaataaagtcagattagagggagacaaBHQl175

正JaJaaatattaacaatgcattgagtatgatg400

300621023反JaJactctttctttttctccatattgacc40090

探针FJ\MtactcattgctgatccatgtagatttcccgBHQl150

正JaJagcgcgcaaactaggataaatt400

T30440反JaJcctagatcttgggataacttgaaaaga40078

探针FJ\Mtcgcgcgcggtgtcatctatctc-BHQl200

正｜臼jccagtactaaaatccagatcatgca400

GBHll9反l臼jgaaattgcgtgactcaaattcc40090

探针FJ\Mcctgcaggtcgacggccgagtac-BHQl200

10

GB/T19495.5-2018

表A.1（续）

内标准基因•JI物／终浓度产物大

物种序列（5’3’）备注

或品系探针CnM)小／bp

正JoJcatactcattgctgatccatgtaga300

棉花孔10N8870l反JoJagtgttaaacaagttatgttctagagc30084

探针FAMttcccggacatgaagccttaattcaat-BHQI250

正JoJccagcctcatggccaaag150

八DHl反JoJccttcttggcggcttatctg15070内标准基因

探针FAM-cttaggggcagactcccgtgttccct-BHQl50

正JaJgggataagcaagtaaaagcgctc250

59122反｜句ccttaattctccgctcatgateag25086

探针FAMtttaaactgaaggcgggaaacgacaaBHQl200

正｜句gcggaacccctatttgttta750

Btll反｜句tccaagaatccctccatgag75070

探针FAMaaatacattcaaatatgtatccgctcaBHQl250

正｜句ggccgtgaacgagctgtt100

Btl76反JoJgggaagaagcctacatgttttctaa60082

探针FAMagcaaccagatcggccgacaccBHQl200

正｜臼lctctgtaacagaaaacaccatctagag450

MON874ll反JbJacaaaagtgaactagttctagggtagat450109

探针F/\Mccgcgtttaaactatcagtgtttagagaat-J3HQl200

玉米

正｜臼jcacgaaccattgagttacaatc350

DAS40278反JbJtggttcattgtattctggctttg35098

探针F；飞McgtagctaaccttcattgtattccgBHQl150

正JaJgtgtgtatgtctctttgcttggtctt500

98140反JaJgattgtcgtttcccgccttc50080

探针FAMctctatcgatccccctctttgatagtttaaact-BHQl200

正｜句cttatcgttatgctatttgcaactttaga150

GA21反｜句tggctcgcgatcctcct150112

探针FAM·catatactaactcatatctctttctcaacagc沼ggtgggt-BHQl50

正｜句tgggttcagtctgcgaatgtt150

LY038反｜句aggaattcgatatcaagcttatcga150111

探针FAMcgagcggagtttatgggtcgacggBHQl