GA/T 1160-2014 常见毒品原植物的DNA提取二氧化硅法

ICS13.310

A92

中华人民共和国公共安全行业标准

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GAT11602014

常见毒品原植物的DNA提取

二氧化硅法

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DNAextractionfromdrulantsSilicamethod

gp

2014-05-09发布2014-05-09实施

中华人民共和国公安部发布

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GAT11602014

常见毒品原植物的DNA提取

二氧化硅法

1范围

(、)

本标准规定了在法庭科学鉴定中采用二氧化硅法从毒品原植物大麻罂粟中提取脱氧核糖核酸

()的方法。

DNA

,

本标准适用于法庭科学鉴定中毒品原植物及其制品的DNA提取也可用于普通植物的DNA

提取。

2规范性引用文件

。,

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,()。

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

/—分析实验室用水规格和试验方法

GBT66822008

3术语和定义

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下列术语和定义适用于本文件。

3.1

二氧化硅法silicamethod

一种以二氧化硅为固相吸附剂的基因组DNA提取方法。

4原理

(,),,

十二烷基硫酸钠sodiumdodeclsulfateSDS是一种离子型表面活性剂同时也是蛋白变性剂

y

,。()、,

能溶解细胞膜和核膜蛋白使核蛋白解聚SDS和蛋白酶KPK共同作用促使蛋白变性降解达到裂

。,

解植物细胞释放出DNA的目的在DNA纯化上利用在低pH值和高浓度离液盐如异硫氰酸胍

(),,、

GuSCN存在的条件下核酸能够与二氧化硅特异性的结合在较高温度下核酸又能被高pH值低盐

,。

浓度溶液从二氧化硅上洗脱下来的特性获得高质量的植物DNA

5器材

5.1眼科剪。

5.2眼科镊。

5.3旋涡振荡器。

()。

5.4高速离心机离心力≥13000g

5.5离心管。

5.6移液器。

、。

5.7研钵研杵等组织研磨器具

1

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GAT11602014

、。

5.8水浴箱金属加热块等恒温装置

6试剂

裂解液:缓冲液中加入至终浓度(/),值为。

6.1TNESDS0.5%~2.0%WVH8.0

p

:(,)。

6.2二氧化硅悬浮液1mL水加入0.06g二氧化硅纯度>99%颗粒直径<100m

μ

:,//

结合液将和溶于水中使用和调节

6.36.06Tris5.84EDTA1molLHCl1molLNaOHH

ggp

,,,。

值为6.5加入591g的GuSCN溶于溶液中再加入10mLTriton-X100最终用水定容至1000mL

,/