DB21/T 3692-2023 蓝莓常见品种鉴定技术规程 SSR分子标记法

ICS65.020.01

CCSB60

21

辽宁省地方标准

DB21/T3692—2023

蓝莓常见品种鉴定技术规程

SSR分子标记法

Technicalspecificationforidentificationofcommonblueberryvarieties

bySSRmolecularmarkers

2023-01-30发布2023-03-02实施

辽宁省市场监督管理局发布

DB21/T3692—2023

目次

前言..................................................................................II

1范围................................................................................1

2规范性引用文件......................................................................1

3术语和定义..........................................................................1

4试验准备............................................................................2

5操作程序............................................................................2

6结果分析............................................................................4

附录A（规范性）仪器设备与化学试剂....................................................5

附录B（规范性）溶液配制..............................................................6

附录C（规范性）核心引物信息..........................................................8

附录D（资料性）扩增图谱..............................................................9

附录E（资料性）指纹图谱.............................................................10

附录F（规范性）指纹图谱鉴定报告.....................................................11

图D.1引物SSR1007、SSR1183、SSR160在12个蓝莓主栽品种中的扩增图谱....................9

表C.14对SSR核心引物信息............................................................8

表E.112个蓝莓主栽品种的SSR数字指纹图谱............................................10

表F.1蓝莓品种SSR指纹图谱鉴定报告...................................................11

I

DB21/T3692—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由辽宁省林业和草原局提出并归口。

本文件起草单位：大连大学、大连森茂现代农业有限公司。

本文件主要起草人：徐国辉，王贺新，楚立威，娄鑫，赵倩，温立柱，崔青青，周永斌。

本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈，

我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。

归口管理部门通讯地址：辽宁省林业和草原局（沈阳市和平区太原北街2号），联系电话：

024-23448927。

文件起草单位通讯地址：大连大学（大连市经济技术开发区学府大街10号），联系电话：

0411-87402346。

II

DB21/T3692—2023

蓝莓常见品种鉴定技术规程

SSR分子标记法

1范围

本文件规定了利用简单重复序列（Simplesequencerepeats，SSR）分子标记法对12个常见蓝莓品种，

进行鉴定过程中样品准备、DNA提取、DNA质量检测、PCR扩增、PCR产物检测等方面的技术要求。

本文件适用于SSR分子标记技术构建12个常见蓝莓品种DNA指纹图谱过程中DNA分子数据采集和

鉴别。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

LY/T2426枣品种鉴定技术规程SSR分子标记法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

聚合酶链式反应PCRpolymerasechainreaction

聚合酶链反应（polymerasechainreaction，PCR)，是以DNA为模板，在DNA聚合酶、引物、dNTP

的共同作用下使目标片段扩增并用于检测分析。

3.2

SSR标记simplesequencerpeatsmarker

由几个核苷酸（一般为1~6个）为重复单位组成的长达几十个核苷酸的串联重复序列。

3.3

核心引物coreprimers

扩增产物具有高度的稳定性和一致性，并具有较强的鉴别能力，可以用于进行12个蓝莓常见品种比

对的人工合成引物。

3.4

SSR指纹图谱SSRfingerprint

1

DB21/T3692—2023

利用SSR核心引物，对不同的蓝莓品种进行PCR扩增，根据不同品种在DNA水平上的差异，利用聚

丙烯酰胺凝胶电泳技术，获得的具有差异片段的成像图，并通过引物结合字母标记法对不同的蓝莓品种

进行特异性标记。

4试验准备

4.1仪器与试剂

仪器与试剂详见附录A。

4.2溶液配制

溶液配制方法详见附录B，其中试剂配制所用水应符合GB/T6682规定的一级水的要求，其中银染、

显色溶液的配制可以使用符合三级水的要求。

4.3核心引物

核心引物信息详见附录C。

5操作程序

5