GB/T 17813-2018 添加剂预混合饲料中烟酸与叶酸的测定 高效液相色谱法

ICS65.120

B46

国；

中华人民共和国国家标准

G~/T17813-2018

代替GB/T17813-1999

添加剂预混合饲料中烟酸与叶酸的测定

高效液相色谱法

Determinationofnicotinicacidandfolicacidinpremix-

Highperformanceliquidchromatography

2018-09-17发布2019-04-01实施

国家市场监督管理总局峪非

中国国家标准化管理委员会0(..'I(J

GB/T17813-2018

目u昌

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准代替GB/T17813-1999《复合预混料中烟酸、叶酸的测定高效液相色谱法》。

本标准与GB/T178131999相比，除编辑性修改外，主要技术内容修改如下：

修改了方法的检测限，增加了定量限（见第1章，1999年版的第1章）；

一一修改了标准名称；

一一一修改了烟酸、叶酸泪rj定原理（见第3章和第4章，1999年版的第3章）；

一一修改了烟酸和叶酸的提取液组成（见第3章和第4章，1999年版的4.6);

一一修改了烟酸和叶酸流动相与色谱条件（见3.2.7、3.5.2和4.5.2,1999年版的7.2.1.1);

修改了烟酸标准溶液的配制方法（见3.2.9,1999年版的4.5.1);

复合预混合饲料提取方法中，增加了二水合乙二胶凹乙酸二铀（EDTA）使用（见3.5.1.2和

4.5.1.2,1999年版的7.1);

一一增加了烟酸、叶酸的标准色谱罔（见附录AL

本标准向全同饲料丁－业标准化技术委员会（SAC/TC76）提出井归口。

本标准起草单位：中同农业科学院农业质量标准与检测技术研究所［同家饲料质量监督检验中心

（北京）］。

本标准主要起草人：李兰、贾铮、：东德成。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为：

一一－GB/T17813-1999。

I

GB/T17813-2018

添加剂预混合饲料中烟酸与叶酸的测定

高效液相色谱法

1范围

本标准规定了添加剂预混合饲料中烟酸、叶酸含量测定的高效液相色谱法。

本标准适用于维生素预混合饲料及复合预由合饲料中烟酸、叶酸的测定。

烟酸的检测限为100mg／烛，定量限为300mg/kg；叶酸的检测限为15mg／烛，定量限为50mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1饲料来样

GB/T20195动物饲料试样的制备

3烟酸的测定

3.1原理

试样中烟酸用酸性甲醇水溶液提取，采用高效液相色谱仪分离，紫外检测，外标法定量。

3.2试剂或溶液

｜综特殊注明外，本标准所周试剂均为分析纯，水符合GB/T6682中一级水的规定。

3.2.1冰乙酸：优级纯。

3.2.2庚炕磺酸铀：色谱纯。

3.2.3三乙胶：优级纯。

3.2.4甲醇：色谱纯。

3.2.50.1%三氟乙酸溶液：移取1mL三氟乙酸于1000mL水中。

3.2.6提取液：称取50mg二水合乙二月安四乙酸二铀（以下简称EDTA）溶于约800mL水中，加入

20mL冰乙酸（3.2.1）、5mL三乙胶（3.2.3），混匀后与200mL甲醇混合，该溶液pH值约为3～4。

3.2.7流动相：称取1.1g庚炕磺酸铀（3.2.2）、50mgEDTA溶于约1000mL水中，加入20mL冰乙酸

(3.2.1）、5mL三乙胶（3.2.3），混匀，用冰乙酸、三乙胶调节溶液pH值为4.0，过0.45µm滤膜。取上述

溶液800mL与200mL甲醇（3.2.4）混合，备用。

3.2.8烟酸标准品：烟酸含量注98.0%。

3.2.9烟酸标准储备溶液：准确称取0.1g（精确到0.0001g）烟酸标准品（3.2.肘，置于100mL棕色容

量瓶中，加水使其溶解，并加入1mL0.1%三氟乙酸洛液（3.2.5），用水定容至刻度，摇匀。该标准储备

液中烟酸含量约为1mg/mL,2℃～8℃保存，有效期为6个月。

3.2.10烟酸标准丁，作液：根据试样种类（维生素预混合饲料、复合预混合饲料）调整稀释倍数，使标准

GB/T17813-2018

t作液浓度在10µg/mL~150µg/mL，用提取液（3.2.6）稀释定容。当日制备并使用。

3.3仪器设备

3.3.1天平：感量0.0001g、感量0.001go

3.3.2离心机：转速不低于8000r/min（相对离心力不低于6OlOg）。

3.3.3届声波水浴。

3.3.4高效液相色谱仪：配紫外可调波长检测器（或二极管矩阵检测器）。

3.4样品

按照GB/T14699.1抽取有代表性的饲料样品，用四分法缩减取样。按GB/T20195制备试样，粉

碎过0.425mm孔径筛，充分混匀，储存在密闭容器中，避光保存。

3.5试验步骤

3.5.1试样的提取

3.5.1.1维生素预混