GB/T 22031-2008 干酪及加工干酪制品中添加的柠檬酸盐含量的测定 酶-比色法

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中华人民共和国国家标准

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犌犅犜２２０３１２００８

干酪及加工干酪制品中添加的

柠檬酸盐含量的测定酶比色法

国家标准ㅤ可打印ㅤ可复制ㅤ无水印ㅤ高清原版ㅤ去除空白页

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ＩＳＯ１２０８２１９９７Ｐｒｏｃｅｓｓｅｄｃｈｅｅｓｅａｎｄｒｏｃｅｓｓｅｄｃｈｅｅｓｅｒｏｄｕｃｔｓ

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２００８０６１７发布２００８１００１实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

发布

中国国家标准化管理委员会

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犌犅犜２２０３１２００８

前言

本标准修改采用国际标准：《加工干酪及其制品添加的柠檬酸盐乳化剂和酸度调

ＩＳＯ１２０８２１９９７

节剂含量（以柠檬酸计）的测定》（英文版）。

考虑到我国国情，本标准与ＩＳＯ１２０８２１９９７：的主要差异如下：

———分析步骤中增加标准曲线的绘制，由试液吸光度测定与标准系列比较定量，不采用国际标准中

摩尔吸光系数计算定量；

———乳糖含量的测定以试剂空白和试液空白扣除干扰组分和葡萄糖本底值，不采用国际标准中吸

光度减量计算；

———免去国际标准中预试验和试验报告章条；

———编写格式、用语遵照我国标准／—《标准化工作导则第部分：标准的结构和编

ＧＢＴ１．１２０００１

写规则》和／—《标准编写规则第部分：化学分析方法》。

ＧＢＴ２０００１．４２００１４

本标准的附录、附录为规范性附录。

ＡＢ

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Ⅰ

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犌犅犜２２０３１２００８

干酪及加工干酪制品中添加的

柠檬酸盐含量的测定酶比色法

１范围

本标准规定了干酪及加工干酪制品中添加的柠檬酸盐含量（以柠檬酸计）的测定方法。

本标准适用于干酪及加工干酪制品中添加的柠檬酸盐含量的测定。

２规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

／分析实验室用水规格和试验方法（／—，：）

ＧＢＴ６６８２ＧＢＴ６６８２１９９２ｎｅＩＳＯ３６９６１９８７

ｑ

３原理

测定样品中总柠檬酸盐的含量，扣除原料带入样品中的柠檬酸盐的量（以０．０４倍乳糖换算），即为

样品中添加的柠檬酸盐含量。柠檬酸盐以柠檬酸计。

４分析步骤

国家标准ㅤ可打印ㅤ可复制ㅤ无水印ㅤ高清原版ㅤ去除空白页

样品中总柠檬酸盐的测定和含量计算按附录的规定执行。

Ａ

样品中乳糖的测定和含量计算按附录的规定执行。

Ｂ

５结果计算

样品中添加的柠檬酸盐含量狑以柠檬酸计，数值以质量分数（）表示，按式（）计算：

ａ％１

狑狑狉狑…………（）

＝－１

ａｃｉ

式中：

———样品中总柠檬酸含量，；

狑ｃ％

狉———原料乳清粉或乳粉中柠檬酸含量与乳糖含量的比率（柠檬酸／乳糖）（狉＝０．０４）；

狑———样品中乳糖含量，。

ｉ％

计算结果表示到小数点后两位。

６精密度

在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的１０％。

１

／—

犌犅犜２２０３１２００８

附录犃

（规范性附录）

干酪及加工干酪制品中柠檬酸盐含量的酶法测定

犃．１范围

本附录规定了酶法测定干酪及加工干酪制品中柠檬酸盐含量的方法。

本附录适用于干酪及加工干酪制品中柠檬酸盐含量的酶法测定。

犃．２原理

柠檬酸盐裂解酶（）将柠檬酸盐转化为草酰乙酸盐和乙酸盐，苹果酸脱氢酶（）和乳酸脱氢

ＣＬＭＤＨ

酶（ＬＤＨ）在还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（ＮＡＤＨ）的存在下催化脱羧草酰乙酸盐以及脱羧产物丙酮

酸盐，分别转化成苹果酸和乳酸。在反应中被氧化成了＋。在处测定样品溶

ＬＬＮＡＤＨＮＡＤ３４０ｎｍ

液中ＮＡＤＨ的吸光度差值，计算样品中柠檬酸盐的含量。

犃．３试剂

所有的试剂如未注明规格，均为分析纯；实验用水如未注明，均应符合／的规定。

ＧＢＴ６６８２

三氯乙酸溶液（／）：称取三氯乙酸（）溶于水中，混匀，并定容至。

犃．３．１２００Ｌ２０ＣＣｌＣＯＯＨ１００ｍＬ

ｇｇ３

氢氧化钠溶液（／）：称取氢氧化钠（），用水溶解后转移至容量瓶中，

犃．３．２２００Ｌ２０ＮａＯＨ１００ｍＬ

ｇｇ

定容。充分混合。

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氢氧化钠溶液（／）：称取氢氧化钠（），用水溶解后转移至容量瓶中，定

犃．３．３４０Ｌ４ＮａＯＨ１００ｍＬ

ｇｇ

容。充分混合。

氢氧化钠溶液（／）：称取氢氧化钠（），用水溶解后转移至容量瓶中，定

犃．３．４４Ｌ０．４ＮａＯＨ１００ｍＬ

ｇｇ

容。充分混合。

氯化锌溶液（／）：称取氯化锌（），用水溶解后转移至容量瓶中，定

犃．３．５０．８Ｌ０．８ＺｎＣｌ１０００ｍＬ

ｇｇ２

容。充分混合。

犃．３．６缓冲液（Ｈ７．８）：称取７．１３双甘