GA/T 1633-2019 法庭科学 血液、尿液中乙基葡萄糖醛酸苷检验 气相色谱-质谱和液相色谱-质谱法

ICS13.310

A92GA

中华人民共和国公共安全行业标准

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法庭科学血液、尿液中乙基葡萄糖醛酸苷

检验气相色谱-质谱和液相色谱-质谱法

Forensicsciences—Examinationmethodsforethylglucuronideinblood

andurinesamples—GC-MSandLC-MS

××××-××-××发布××××-××-××实施

中华人民共和国公安部发布

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前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（SAC/TC179/SC1）提出并归口。

本标准起草单位：司法鉴定科学研究院、公安部物证鉴定中心。

本标准主要起草人：严慧、沈保华、沈敏、卓先义、刘伟、向平、于忠山、何毅、王芳琳。

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法庭科学血液、尿液中乙基葡萄糖醛酸苷检验

气相色谱-质谱和液相色谱-质谱法

1范围

本标准规定了法庭科学血液、尿液中乙基葡萄糖醛酸苷（EtG）的气相色谱-串联质谱（GC-MS/MS）、

液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）定性定量检验方法。

本标准适用于法庭科学血液、尿液中乙基葡萄糖醛酸苷的定性分析和定量分析。其他可疑样品中乙

基葡萄糖醛酸苷的定性分析和定量分析可参照使用。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GA/T122毒物分析名词术语

3术语和定义

GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。

4原理

以空白样品和添加样品作为对照，按平行操作的要求，对血液、尿液进行提取（气相色谱-串联质

谱分析前需衍生化）后，采用气相色谱-串联质谱法和液相色谱-串联质谱法定性定量，以保留时间、质

谱特征离子和相对丰度比作为定性判断依据；以峰面积为依据，采用内标法进行定量分析。

5试剂和材料

5.1试剂

气相色谱-质谱实验用水应符合GB/T6682中规定的三级水，液相色谱-质谱实验用水应符合GB/T

6682中规定的一级水。除非另有说明，在分析中使用的试剂均为分析纯，试剂包括：

a)甲醇（色谱纯）；

b)乙腈（色谱纯）；

c)BSTFA（双三甲基硅烷三氟乙酰胺）/TMCS（三甲基氯硅烷）混合溶液（体积比99:1）；

d)无水吡啶；

e)50%甲酸溶液（色谱纯）；

f)0.01%甲酸溶液：取适量水置于1000mL容量瓶，加入50%的甲酸溶液0.2mL，以水定容至刻

度；

g)标准溶液：

1）1.0mg/mL标准物质溶液：采用市售EtG标准甲醇溶液，置于冰箱中冷藏保存；

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2）10.0μg/mLEtG标准工作液：吸取0.1mL1.0mg/mLEtG标准物质溶液，用甲醇稀释定容

至10mL，混匀，配制成质量浓度为10.0μg/mL的标准物质溶液，密封，置于冰箱中冷

藏保存。有效期3个月；

3）1.0mg/mLEtG-D5（内标）溶液：采用EtG-D5市售内标溶液，置于冰箱中冷藏保存；

4）10.0μg/mLEtG-D5（内标）物质甲醇溶液：吸取0.1mL标准储备液置于10mL容量瓶中，

用甲醇稀释定容至刻度，混匀，配制成质量浓度为10.0μg/mL的标准物质甲醇溶液，置

于冰箱中冷藏保存。有效期3个月。

5.2材料

材料包括：

a)离心管；

b)有机系微孔滤膜：0.22µm。

6仪器和设备

仪器和设备包括：

a)气相色谱-串联质谱仪：配有电子轰击离子源（EI）和三重四极杆质量分析器；

b）液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）和三重四极杆质量分析器；

c）离心机；

d）振荡器；

e）移液器；

f）恒温水浴锅；

g）干燥箱。

7操作方法

7.1定性分析

7.1.1样品提取

7.1.1.1衍生化法（适用于气相色谱-串联质谱）

移取血液或尿液100µL于1.5mL离心管中，加入100ng内标物EtG-D5和900µL乙腈，涡旋，

10000r/min离心5min，转移上清液至试管，60C水浴中空气流下吹干，残留物中加入BSTFA/TMCS

混合溶液66L和无水吡啶33L，置于90C干燥箱中反应30min，冷却后作为检材样品衍生液供

GC-MS/MS分析。

7.1.1.2沉淀蛋白法（适用于液相色谱-串联质谱）

移取血液或尿液100µL于1.5mL离心管中，加入50ng内标物EtG-D和900µL乙腈，涡旋，13000r/min

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离心3min；取上清液用有机系微孔滤膜过滤，作为检材样品提取液供LC-MS/MS分析。

7.1.1.3质控样品制备

取等量相似基质的空白样品两份于离心管中，一份作为空白样品，另一份添加EtG标准物质作为

添加样品（添加样品的质量浓度为0.1µg/mL），与检材平行操作，得到空白样品提取液（或衍生液）和

添加样品提取液（或衍生液）供仪器分析。